| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 抗虫基因的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.1 Bt抗虫基因 | 第11页 |
| 1.1.2 蛋白酶抑制剂基因 | 第11-12页 |
| 1.1.3 凝集素基因 | 第12页 |
| 1.2 植物的防御机制 | 第12-13页 |
| 1.3 茉莉酸信号途径 | 第13-17页 |
| 1.4 植物基因启动子 | 第17-21页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.5 实验过程所用PCR引物 | 第24页 |
| 2.1.6 常用培养基的配制 | 第24页 |
| 2.1.7 实验所需试剂的配制 | 第24-26页 |
| 2.1.8 其它溶液配制 | 第26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-34页 |
| 2.2.1 启动子的克隆 | 第26页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收（康为世纪胶回收试剂盒） | 第26-27页 |
| 2.2.3 在质粒载体中进行DNA克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.4 酶切连接 | 第28页 |
| 2.2.5 质粒提取 | 第28-29页 |
| 2.2.6 农杆菌感受态制备 | 第29页 |
| 2.2.7 农杆菌转化 | 第29页 |
| 2.2.8 农杆菌的准备 | 第29-30页 |
| 2.2.9 拟南芥种植及培养 | 第30页 |
| 2.2.10拟南芥侵染 | 第30页 |
| 2.2.11转基因拟南芥的筛选 | 第30页 |
| 2.2.12植物基因组DNA提取 （CTAB法） | 第30-31页 |
| 2.2.13玉米总RNA提取（Trizol法） | 第31页 |
| 2.2.14 RT-PCR分析 | 第31-32页 |
| 2.2.15荧光定量PCR | 第32页 |
| 2.2.16 GUS组织化学染色 | 第32页 |
| 2.2.17植物总蛋白提取 | 第32-33页 |
| 2.2.18蛋白浓度测定 | 第33页 |
| 2.2.19 GUS表达水平测定 | 第33页 |
| 2.2.20植物材料的种植及处理 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-45页 |
| 3.1 候选基因筛选 | 第34-36页 |
| 3.1.1 Zm281基因及Zm Pal基因的表达分析 | 第34-35页 |
| 3.1.2 Zm281及ZmPal蛋白分析 | 第35-36页 |
| 3.2 Zm281基因和Zm Pal基因的启动子分析 | 第36-39页 |
| 3.3 转基因拟南芥植株的获得及分子检测 | 第39-42页 |
| 3.3.1 载体构建 | 第39-41页 |
| 3.3.2 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第41页 |
| 3.3.3 T0代植株分子检测 | 第41-42页 |
| 3.4 Zm281及Zm Pal基因启动子在拟南芥中的功能验证 | 第42-44页 |
| 3.5 转基因拟南芥的GUS活性测定 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 4.1 玉米Zm281和Zm PAL的蛋白分析 | 第45页 |
| 4.2 Zm281基因和Zm Pal基因表达量分析 | 第45-46页 |
| 4.3 虫害诱导型启动子的应用价值 | 第46页 |
| 4.4 创新点 | 第46页 |
| 4.5 展望 | 第46-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
