| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第11页 |
| 1.2 启动子 | 第11-19页 |
| 1.2.1 组成型启动子 | 第12-13页 |
| 1.2.2 组织（或器官）特异型启动子 | 第13-16页 |
| 1.2.3 诱导型启动子 | 第16-17页 |
| 1.2.4 特殊类型启动子 | 第17-19页 |
| 1.2.4.1 双向启动子 | 第18页 |
| 1.2.4.2 人工合成启动子 | 第18-19页 |
| 1.3 褐飞虱 | 第19-20页 |
| 1.3.1 褐飞虱的危害特征 | 第19-20页 |
| 1.3.2 植物对昆虫的防御 | 第20页 |
| 1.4 启动子的研究方法 | 第20-23页 |
| 1.4.1 候选目的基因的预测 | 第21页 |
| 1.4.2 启动子的生物信息学分析 | 第21页 |
| 1.4.3 启动子的分离克隆 | 第21-22页 |
| 1.4.4 启动子表达模式和表达强度的分析方法 | 第22页 |
| 1.4.5 启动子顺式作用元件及转录因子的鉴定 | 第22-23页 |
| 1.4.5.1 缺失分析 | 第22页 |
| 1.4.5.2 凝胶阻滞实验 | 第22页 |
| 1.4.5.3 酵母单杂交技术 | 第22-23页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-38页 |
| 2.1 菌株材料 | 第24页 |
| 2.2 植物材料 | 第24页 |
| 2.3 实验试剂 | 第24页 |
| 2.4 候选基因的基本信息 | 第24-27页 |
| 2.4.1 PYM1的基因信息 | 第25页 |
| 2.4.2 PYM2的基因信息 | 第25页 |
| 2.4.3 PYM4的基因信息 | 第25-26页 |
| 2.4.4 PYM5的基因信息 | 第26页 |
| 2.4.5 BDP1 和BDP2 的基因信息 | 第26页 |
| 2.4.6 BDP3 的基因信息 | 第26页 |
| 2.4.7 BDP4 的基因信息 | 第26-27页 |
| 2.4.8 BDP5 的基因信息 | 第27页 |
| 2.5 验证候选基因的表达模式 | 第27-30页 |
| 2.5.1 RNA的抽提 | 第27-28页 |
| 2.5.2 cDNA的获得 | 第28-30页 |
| 2.5.3 基因表达模式的检测 | 第30页 |
| 2.6 启动子的克隆及表达载体的构建 | 第30-34页 |
| 2.6.1 褐飞虱诱导型启动子的克隆及表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.6.2 双向启动子的克隆及表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 2.7 启动子的表达载体的构建及其遗传转化 | 第34页 |
| 2.8 转基因植株的阳性检测 | 第34页 |
| 2.9 转基因植株的拷贝数检测 | 第34-36页 |
| 2.9.1 转基因植物基因组的获得及检测 | 第35页 |
| 2.9.2 地高辛法Sourthern杂交 | 第35-36页 |
| 2.10 阳性植株GUS活性的组织化学染色 | 第36页 |
| 2.11 转基因阳性植株的不同处理 | 第36-37页 |
| 2.12 转基因阳性植株的不同处理表达量检测 | 第37-38页 |
| 3.结果 | 第38-50页 |
| 3.1 褐飞虱诱导型启动子的结果分析 | 第38-44页 |
| 3.1.1 褐飞虱接种芯片数据结果 | 第38-39页 |
| 3.1.2 候选基因RT-PCR验证结果 | 第39-40页 |
| 3.1.3 褐飞虱诱导型启动子生物信息学分析及克隆 | 第40-41页 |
| 3.1.4 转基因植株拷贝数检测 | 第41-42页 |
| 3.1.5 接褐飞虱和针刺处理前后GUS组织化学染色结果 | 第42-43页 |
| 3.1.6 褐飞虱接种和针刺处理后GUS基因表达量的定量分析 | 第43-44页 |
| 3.2 双向启动子的结果分析 | 第44-50页 |
| 3.2.1 双向启动子的生物信息学分析 | 第44-46页 |
| 3.2.2 双向启动子的克隆 | 第46-47页 |
| 3.2.3 GUS组织化学染色结果 | 第47-50页 |
| 4.讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 褐飞虱诱导型启动子 | 第50-51页 |
| 4.2 胚乳特异型双向启动子(BDP1 和BDP2) | 第51-52页 |
| 4.3 双向启动子(BDP3、BDP4 和BDP5) | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录1 植物表达载体示意图 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
