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甲型鸭肝炎病毒的分离鉴定及致病性研究

缩略词说明第4-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 引言第11-23页
    1.1 鸭甲型病毒性肝炎的流行与分布第11页
    1.2 DHAV的特性第11-13页
        1.2.1 病毒特征第11页
        1.2.2 DHAV的生物学特性第11-13页
    1.3 DHAV的传播途径第13-14页
    1.4 临床症状和病理变化第14-15页
        1.4.1 临床症状第14页
        1.4.2 组织病理学变化第14-15页
    1.5 DHAV的培养特性第15-16页
        1.5.1 自然宿主第15页
        1.5.2 实验宿主第15-16页
            1.5.2.1 在鸡胚或鸭胚中的增殖第15-16页
            1.5.2.2 细胞培养第16页
    1.6 DHAV致病机理第16-17页
    1.7 DHA的诊断第17-21页
        1.7.1 中和试验第17页
        1.7.2 琼脂扩散试验第17-18页
        1.7.3 酶联免疫吸附实验第18-19页
            1.7.3.1 间接ELISA第18-19页
            1.7.3.2 斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)法第19页
            1.7.3.3 双夹心ELISA第19页
        1.7.4 胶体金法第19-20页
        1.7.5 血凝试验第20页
        1.7.6 分子生物学诊断技术第20-21页
        1.7.7 荧光抗体检测第21页
    1.8 防治第21-22页
    1.9 研究目的和意义第22-23页
2 实验材料与方法第23-34页
    2.1 材料第23-24页
        2.1.1 病料第23页
        2.1.2 实验动物第23页
        2.1.3 主要仪器与试剂第23-24页
        2.1.4 实验所用试剂的配制方法第24页
    2.2 病毒的分离与鉴定方法第24-27页
        2.2.1 病毒RNA的提取第24-25页
        2.2.2 病毒RT-PCR的检测第25-26页
        2.2.3 电泳检测第26-27页
        2.2.4 病毒的鸭胚终点稀释法纯化第27页
    2.3 8株DHAV的全基因测序方法第27-30页
        2.3.1 引物设计第27-28页
        2.3.2 DHAV全基因组分段扩增及序列测定第28-30页
            2.3.2.1 DHAV分片段的获取第28页
            2.3.2.2 目的基因的纯化第28-29页
            2.3.2.3 DHAV序列测定与毒株基因组序列拼接第29页
            2.3.2.4 进化树以及同源性的比对第29-30页
    2.4 雏鸭的致病性实验第30-34页
        2.4.1 病毒的扩增第30页
        2.4.2 ELD50的测定第30-31页
        2.4.3 动物攻毒实验第31页
        2.4.4 临床症状及剖检病变观察第31-32页
        2.4.5 样品处理第32页
        2.4.6 病毒血症的检测第32页
        2.4.7 不同毒株的病毒在雏鸭体内的分布情况第32-34页
3 实验结果第34-45页
    3.1 8株DHV病毒的分离鉴定结果第34页
    3.2 8株DHV基因组分片段扩增结果第34-35页
    3.3 测序结果拼接与分析第35-37页
    3.4 进化树的构建与分析第37-41页
    3.5 鸭胚终点稀释法病毒纯化结果第41页
    3.6 毒株ELD50的测定结果第41页
    3.7 人工感染的雏鸭临床症状和剖检变化第41-42页
    3.8 病毒血症的测定结果第42-43页
    3.9 病毒滴定结果第43-45页
4 讨论第45-47页
5 结论第47-48页
附录第48-53页
参考文献第53-59页
致谢第59页

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