缩略词说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-23页 |
1.1 鸭甲型病毒性肝炎的流行与分布 | 第11页 |
1.2 DHAV的特性 | 第11-13页 |
1.2.1 病毒特征 | 第11页 |
1.2.2 DHAV的生物学特性 | 第11-13页 |
1.3 DHAV的传播途径 | 第13-14页 |
1.4 临床症状和病理变化 | 第14-15页 |
1.4.1 临床症状 | 第14页 |
1.4.2 组织病理学变化 | 第14-15页 |
1.5 DHAV的培养特性 | 第15-16页 |
1.5.1 自然宿主 | 第15页 |
1.5.2 实验宿主 | 第15-16页 |
1.5.2.1 在鸡胚或鸭胚中的增殖 | 第15-16页 |
1.5.2.2 细胞培养 | 第16页 |
1.6 DHAV致病机理 | 第16-17页 |
1.7 DHA的诊断 | 第17-21页 |
1.7.1 中和试验 | 第17页 |
1.7.2 琼脂扩散试验 | 第17-18页 |
1.7.3 酶联免疫吸附实验 | 第18-19页 |
1.7.3.1 间接ELISA | 第18-19页 |
1.7.3.2 斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)法 | 第19页 |
1.7.3.3 双夹心ELISA | 第19页 |
1.7.4 胶体金法 | 第19-20页 |
1.7.5 血凝试验 | 第20页 |
1.7.6 分子生物学诊断技术 | 第20-21页 |
1.7.7 荧光抗体检测 | 第21页 |
1.8 防治 | 第21-22页 |
1.9 研究目的和意义 | 第22-23页 |
2 实验材料与方法 | 第23-34页 |
2.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1 病料 | 第23页 |
2.1.2 实验动物 | 第23页 |
2.1.3 主要仪器与试剂 | 第23-24页 |
2.1.4 实验所用试剂的配制方法 | 第24页 |
2.2 病毒的分离与鉴定方法 | 第24-27页 |
2.2.1 病毒RNA的提取 | 第24-25页 |
2.2.2 病毒RT-PCR的检测 | 第25-26页 |
2.2.3 电泳检测 | 第26-27页 |
2.2.4 病毒的鸭胚终点稀释法纯化 | 第27页 |
2.3 8株DHAV的全基因测序方法 | 第27-30页 |
2.3.1 引物设计 | 第27-28页 |
2.3.2 DHAV全基因组分段扩增及序列测定 | 第28-30页 |
2.3.2.1 DHAV分片段的获取 | 第28页 |
2.3.2.2 目的基因的纯化 | 第28-29页 |
2.3.2.3 DHAV序列测定与毒株基因组序列拼接 | 第29页 |
2.3.2.4 进化树以及同源性的比对 | 第29-30页 |
2.4 雏鸭的致病性实验 | 第30-34页 |
2.4.1 病毒的扩增 | 第30页 |
2.4.2 ELD50的测定 | 第30-31页 |
2.4.3 动物攻毒实验 | 第31页 |
2.4.4 临床症状及剖检病变观察 | 第31-32页 |
2.4.5 样品处理 | 第32页 |
2.4.6 病毒血症的检测 | 第32页 |
2.4.7 不同毒株的病毒在雏鸭体内的分布情况 | 第32-34页 |
3 实验结果 | 第34-45页 |
3.1 8株DHV病毒的分离鉴定结果 | 第34页 |
3.2 8株DHV基因组分片段扩增结果 | 第34-35页 |
3.3 测序结果拼接与分析 | 第35-37页 |
3.4 进化树的构建与分析 | 第37-41页 |
3.5 鸭胚终点稀释法病毒纯化结果 | 第41页 |
3.6 毒株ELD50的测定结果 | 第41页 |
3.7 人工感染的雏鸭临床症状和剖检变化 | 第41-42页 |
3.8 病毒血症的测定结果 | 第42-43页 |
3.9 病毒滴定结果 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
附录 | 第48-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59页 |