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突变型FoxO1转基因小鼠的基因表达及表型分析

致谢第4-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-11页
    1.1 能量代谢障碍综合症第8页
    1.2 瘦素第8-10页
        1.2.1 瘦素的发现及分泌第8页
        1.2.2 瘦素对能量代谢的影响第8-9页
        1.2.3 瘦素信号通路第9-10页
        1.2.4 瘦素抵抗第10页
    1.3 转基因动物第10页
    1.4 FoxO1第10-11页
        1.4.1 Fox01的结构第10-11页
        1.4.2 FoxO1的功能第11页
2 引言第11-12页
3 材料与方法第12-23页
    3.1 材料第12-16页
        3.1.1 试验动物第12页
        3.1.2 实验仪器第12-13页
        3.1.3 实验试剂第13页
        3.1.4 实验耗材第13页
        3.1.5 实验试剂配制第13-16页
    3.2 方法第16-23页
        3.2.1 转染用质粒的获取第16-17页
        3.2.2 pEF1α-Myc- Fox01ΔDBD、p Fox01阳性对照蛋白获取第17-18页
        3.2.3 转基因小鼠基因型鉴定第18-19页
        3.2.4 转基因小鼠组织mRNA转录检测第19-21页
        3.2.5 转基因小鼠组织蛋白表达检测第21-22页
        3.2.6 转基因小鼠体重与采食量分析第22页
        3.2.7 常规条件下转基因小鼠POMC、AGRP转录水平检测第22-23页
        3.2.8 常规条件下小鼠与饥饿条件下POMC转录水平的对比第23页
        3.2.9 转基因小鼠leptin刺激实验第23页
        3.2.10 常规条件下转基因小鼠UCP1、UCP2、UCP3转录水平检测第23页
4 结果与分析第23-36页
    4.1 pEF1α-Myc- Fox01ΔDBD、pFoxO1在 293Rb细胞中的转染情况第23页
    4.2 F1代转基因小鼠基因型鉴定第23-26页
    4.3 F1代转基因小鼠目的基因Fox01ΔDBD转录水平检测第26-32页
        4.3.1 RNA质量检测第26页
        4.3.2 荧光定量PCR检测Fox01ΔDBD在各品系及不同组织中的表达第26-32页
    4.4 转基因小鼠Fox01ΔDBD目的蛋白的检测第32页
    4.5 转基因小鼠部分表型分析第32-36页
        4.5.1 Line7转基因小鼠体重(Body weight)与采食量(Food intake)检测第32-34页
        4.5.2 常规条件下转基因小鼠POMC、AGRP转录水平检测第34页
        4.5.3 常规条件下小鼠与饥饿条件下POMC转录水平的对比第34页
        4.5.4 转基因小鼠leptin刺激后p-STAT3的表达情况及POMC水平第34-35页
        4.5.5 常规条件下转基因小鼠UCP1、UCP2、UCP3转录水平检测第35-36页
5 讨论与结论第36-37页
    5.1 讨论第36-37页
    5.2 结论第37页
参考文献第37-41页
英文摘要第41-42页

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