| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要符号表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 细胞凋亡 | 第13-14页 |
| 1.3 细胞凋亡的主要信号传导通路 | 第14-16页 |
| 1.3.1 死亡受体通路 | 第14-15页 |
| 1.3.2 线粒体通路 | 第15页 |
| 1.3.3 内质网通路 | 第15-16页 |
| 1.4 Caspase家族与细胞凋亡 | 第16页 |
| 1.5 血吸虫细胞凋亡 | 第16-18页 |
| 1.5.1 血吸虫凋亡现象的研究 | 第16-17页 |
| 1.5.2 吡喹酮（PZQ）诱导的细胞凋亡 | 第17页 |
| 1.5.3 细胞凋亡与宿主的免疫应答 | 第17-18页 |
| 1.6 血吸虫凋亡相关蛋白和凋亡通路 | 第18-21页 |
| 1.6.1 血吸虫的Bcl-2 家族蛋白 | 第18-19页 |
| 1.6.2 血吸虫caspases | 第19-20页 |
| 1.6.3 血吸虫凋亡体 | 第20页 |
| 1.6.4 血吸虫凋亡蛋白抑制因子IAP | 第20-21页 |
| 1.6.5 血吸虫SjCIAP | 第21页 |
| 1.6.6 血吸虫的凋亡通路研究 | 第21页 |
| 1.7 血吸虫凋亡通路分子作为药物靶标的研究 | 第21-24页 |
| 1.7.1 血吸虫病和新治疗药物研发的需求 | 第22页 |
| 1.7.2 直接定位于凋亡机制的药物 | 第22-23页 |
| 1.7.3 间接活化凋亡机制的药物 | 第23-24页 |
| 1.7.4 展望 | 第24页 |
| 1.8 凋亡诱导因子AIF的研究现状 | 第24-29页 |
| 1.8.1 AIF的结构 | 第25页 |
| 1.8.2 AIF：攻击DNA的双功能蛋白 | 第25-26页 |
| 1.8.3 AIF与caspase的复杂关系 | 第26-28页 |
| 1.8.4 AIF在个体发育中的研究 | 第28-29页 |
| 1.9 本文研究思路 | 第29-30页 |
| 第二章 日本血吸虫凋亡诱导因子的克隆表达及生物学特性分析 | 第30-60页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料 | 第30-36页 |
| 2.2.1 菌种、血清和实验动物 | 第30-31页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第31页 |
| 2.2.3 主要实验仪器 | 第31页 |
| 2.2.4 主要试剂配制 | 第31-36页 |
| 2.3 实验方法 | 第36-47页 |
| 2.3.1 SjAIF生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 2.3.2 SjAIF基因的克隆 | 第37-38页 |
| 2.3.3 重组质粒pET28a(+)-SjAIF的构建 | 第38-40页 |
| 2.3.4 重组质粒pET-28a(+)-SjAIF的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.5 重组质粒pET-28a(+)-SjAIF在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第41-42页 |
| 2.3.6 Western Blotting分析重组蛋白的免疫原性 | 第42页 |
| 2.3.7 SjAIF基因在不同时期和性别虫体内的表达分析 | 第42-44页 |
| 2.3.8 重组蛋白rSjAIF多克隆抗体制备 | 第44-45页 |
| 2.3.9 SjAIF的组织定位分析 | 第45页 |
| 2.3.10 ELISA检测特异性抗体水平 | 第45-46页 |
| 2.3.11 不同来源宿主虫体SjAIF实时定量分析 | 第46-47页 |
| 2.4 实验结果 | 第47-58页 |
| 2.4.1 SjAIF基因克隆及生物信息学分析 | 第47-51页 |
| 2.4.2 重组质粒pET-28a(+)-SjAIF的构建及鉴定 | 第51页 |
| 2.4.3 rSjAIF的原核表达与重组蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| 2.4.4 Western blotting分析 | 第52-53页 |
| 2.4.5 Real-time PCR分析SjAIF在童虫和成虫中的表达 | 第53-54页 |
| 2.4.6 SjAIF的组织定位 | 第54-56页 |
| 2.4.7 重组蛋白SjAIF在小鼠体内诱导的特异抗体的检测 | 第56-57页 |
| 2.4.8 大小鼠来源虫体SjAIF实时定量分析 | 第57-58页 |
| 2.5 讨论 | 第58-60页 |
| 第三章SjAIF真核重组质粒在 293T细胞中的表达分析 | 第60-70页 |
| 3.1 引言 | 第60页 |
| 3.2 材料与方法 | 第60-61页 |
| 3.2.1 主要试剂与细胞 | 第60-61页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第61页 |
| 3.3 实验方法 | 第61-66页 |
| 3.3.1 重组质粒pMD19-T-SjAIF构建 | 第61-62页 |
| 3.3.2 重组质粒pc DNA3.1(+)-SjAIF的构建及鉴定 | 第62-64页 |
| 3.3.3 重组质粒pc DNA3.1(+)-SjAIF的转染 | 第64-65页 |
| 3.3.4 Western blot鉴定pcDNA3.1(+)-SjAIF的表达情况 | 第65页 |
| 3.3.5 流式细胞术分析SjAIF的促凋亡作用 | 第65-66页 |
| 3.4 实验结果 | 第66-68页 |
| 3.4.1 重组质粒pc DNA3.1(+)-SjAIF的构建及鉴定 | 第66页 |
| 3.4.2 Western-blot鉴定pcDNA3.1(+)-SjAIF的表达 | 第66-67页 |
| 3.4.3 流式细胞术检测SjAIF的促凋亡功能 | 第67-68页 |
| 3.5 讨论 | 第68-70页 |
| 第四章 全文总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
