| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 植物器官离体再生研究 | 第13-20页 |
| 1.1.1 植物细胞全能性与组织培养 | 第13-14页 |
| 1.1.2 植物离体再生过程 | 第14页 |
| 1.1.3 大豆离体再生体系的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.1.4 植物体细胞胚与合子胚发生的差异性 | 第15页 |
| 1.1.5 植物胚胎发生及其分子调控机理的研究 | 第15-17页 |
| 1.1.6 影响植物体细胞胚发生的几类激素及基因 | 第17-18页 |
| 1.1.7 再生基因的克隆与鉴定 | 第18-20页 |
| 1.2 HAP3转录因子在植物发育中的作用 | 第20-22页 |
| 1.2.1 HAP3转录因子功能 | 第20-21页 |
| 1.2.2 HAP3转录因子在各方面的作用 | 第21-22页 |
| 1.3 LEC1基因的研究概况 | 第22-23页 |
| 1.3.1 LEC1基因的发现 | 第22页 |
| 1.3.2 LEC1基因的结构与功能 | 第22-23页 |
| 1.3.3 LEC1基因在拟南芥发育过程中的作用 | 第23页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-39页 |
| 2.2.1 大豆Gm LEC1基因的克隆及序列分析 | 第25-30页 |
| 2.2.2 Gm LEC1基因的生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 2.2.3 大豆Gm LEC1-a组织特异性表达 | 第31-32页 |
| 2.2.4 激素诱导条件下LEC1-a基因的表达模式 | 第32页 |
| 2.2.5 大豆Gm LEC1-a基因植物表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.6 农杆菌的制备及其转化 | 第33-34页 |
| 2.2.7 花序浸染法转化拟南芥 | 第34页 |
| 2.2.8 农杆菌介导法转化大豆子叶节 | 第34-36页 |
| 2.2.9 转基因植株的检测 | 第36-37页 |
| 2.2.10转基因拟南芥表型分析 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-57页 |
| 3.1 大豆Gm LEC1基因的克隆及全长序列分析 | 第39-41页 |
| 3.1.1 大豆Gm LEC1基因的克隆 | 第39页 |
| 3.1.2 大豆Gm LEC1基因序列全长的获得 | 第39-41页 |
| 3.2 Gm LEC1基因的生物信息学分析 | 第41-45页 |
| 3.2.1 Gm LEC1基因蛋白质序列差异的比对 | 第41页 |
| 3.2.2 Gm LEC1编码的蛋白质氨基酸结构分析 | 第41-42页 |
| 3.2.3 Gm LEC1编码蛋白质产物的二级结构分析 | 第42-43页 |
| 3.2.4 Gm LEC1编码蛋白质产物的三级结构分析 | 第43-44页 |
| 3.2.5 Gm LEC1编码蛋白质产物的亲水性、疏水性分析 | 第44页 |
| 3.2.6 Gm LEC1基因进化树分析 | 第44-45页 |
| 3.3 大豆Gm LEC1-a组织特异性分析 | 第45-46页 |
| 3.4 激素诱导条件下LEC1-a基因的表达模式分析 | 第46-49页 |
| 3.4.1 拟南芥LEC1-a基因的表达模式分析 | 第46页 |
| 3.4.2 大豆LEC1-a基因的表达模式分析 | 第46-49页 |
| 3.5 Gm LEC1-a基因植物表达载体的构建 | 第49-51页 |
| 3.5.1 载体构建 | 第49-50页 |
| 3.5.2 Gm LEC1-a植物表达载体的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.6 拟南芥遗传转化 | 第51页 |
| 3.7 大豆遗传转化 | 第51-52页 |
| 3.8 拟南芥植株的检测 | 第52-54页 |
| 3.8.1 拟南芥纯合体检测 | 第52-53页 |
| 3.8.2 过表达拟南芥检测 | 第53-54页 |
| 3.9 大豆植株的检测 | 第54-55页 |
| 3.9.1 过表达大豆T0代荧光蛋白检测 | 第54-55页 |
| 3.9.2 过表达大豆T0代PCR检测 | 第55页 |
| 3.10 过表达拟南芥表型分析 | 第55-57页 |
| 3.10.1 过表达拟南芥萌发期表型分析 | 第55-56页 |
| 3.10.2 拟南芥突变体与野生型拟南芥的表型分析 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 4.1 目的基因的选择 | 第57页 |
| 4.2 组织特异性分析 | 第57页 |
| 4.3 激素处理后大豆Gm LEC1-a的表达模式分析 | 第57-58页 |
| 4.4 转基因植株的检测 | 第58页 |
| 4.4.1 拟南芥PCR检测 | 第58页 |
| 4.4.2 荧光蛋白检测 | 第58页 |
| 4.5 转基因拟南芥后代表型分析 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第72页 |
