| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 丹参基础研究概述 | 第10-11页 |
| 1.2 基因工程技术在丹参代谢工程中的应用 | 第11-16页 |
| 1.2.1 丹参毛状根的研究 | 第11页 |
| 1.2.2 丹参次生代谢研究进展 | 第11-14页 |
| 1.2.3 多基因共表达策略的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.4 MIGS技术在基因调控中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 研究目标及意义 | 第16-17页 |
| 1.4 研究内容和技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第18页 |
| 2.2 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.3 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.4 实验方法 | 第20-33页 |
| 2.4.1 培养基配制与处理 | 第20-22页 |
| 2.4.2 药品与标准品配制 | 第22-23页 |
| 2.4.3 感受态制备 | 第23页 |
| 2.4.4 质粒转化 | 第23-24页 |
| 2.4.5 核酸回收与质粒提取 | 第24页 |
| 2.4.6 丹参gDNA、cDNA获取 | 第24-27页 |
| 2.4.7 载体构建 | 第27-29页 |
| 2.4.8 农杆菌介导的丹参毛状根遗传转化 | 第29-30页 |
| 2.4.9 丹参毛状根阳性转化子PCR鉴定 | 第30页 |
| 2.4.10 GUS组织化学染色 | 第30-31页 |
| 2.4.11 丹参毛状根培养 | 第31页 |
| 2.4.12 丹参酮回流提取 | 第31页 |
| 2.4.13 HPLC丹参酮含量检测 | 第31-33页 |
| 第三章 结果分析与讨论 | 第33-49页 |
| 3.1 丹参Sm CPS与SmKSL基因的功能分析 | 第33-36页 |
| 3.1.1 SmCPS与SmKSL cDNA克隆与序列分析 | 第33页 |
| 3.1.2 SmCPS与SmKSL共表达载体构建 | 第33-34页 |
| 3.1.3 转基因丹参毛状根的获得与检测 | 第34-36页 |
| 3.2 丹参SmGPPS与SmFPPS基因功能分析 | 第36-46页 |
| 3.2.1 SmGPPS与SmFPPS cDNA克隆与序列分析 | 第36页 |
| 3.2.2 SmGPPS与SmFPPS基因过表达及抑制表达载体构建 | 第36-37页 |
| 3.2.3 转基因阳性毛状根的获得与检测 | 第37-39页 |
| 3.2.4 不同转基因根系中SmGPPS与SmFPPS基因表达分析 | 第39-41页 |
| 3.2.5 丹参SmGPPS与SmFPPS基因转基因毛状根的扩大培养 | 第41-43页 |
| 3.2.6 丹参SmGPPS与SmFPPS基因转基因毛状根中次生代谢产物含量的测定 | 第43-46页 |
| 3.3 讨论 | 第46-49页 |
| 第四章 总结与展望 | 第49-50页 |
| 4.1 全文总结 | 第49页 |
| 4.2 展望 | 第49-50页 |
| 附表 | 第50-52页 |
| 附表1 引物序列统计 | 第50-51页 |
| 附表2 中英缩略词对照表 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第58-59页 |
