| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 致病菌与宿主的相互作用 | 第11页 |
| 1.2 细胞死亡方式 | 第11-12页 |
| 1.3 EHEC O157：H7 | 第12页 |
| 1.4 A/E损伤 | 第12-13页 |
| 1.5 Ⅲ型分泌系统 | 第13-14页 |
| 1.6 LEE岛 | 第14-15页 |
| 1.7 Nles | 第15-17页 |
| 1.8 NleF的研究进展 | 第17页 |
| 1.9 依赖Caspase-4的炎性细胞死亡 | 第17-19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-35页 |
| 2.1.1 质粒、菌株和细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 引物 | 第19-20页 |
| 2.1.3 抗体 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要试剂及设备 | 第21-22页 |
| 2.1.5 主要实验溶剂的配方 | 第22-26页 |
| 2.1.6 实验方法与原理 | 第26-35页 |
| 3 NleF原核表达载体的构建 | 第35-43页 |
| 3.1 pET-24a(+)-NleF的构建 | 第35-37页 |
| 3.1.1 pET-24a(+)-NleF的构建 | 第35-37页 |
| 3.1.2 pET-24a(+)-NleF在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第37页 |
| 3.2 pGEX-2TK-NleF的构建 | 第37-43页 |
| 3.2.1 pGEX-2TK-NleF的构建 | 第38-40页 |
| 3.2.2 pGEX-2TK-NleF在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第40页 |
| 3.2.3 pGEX-2TK-NleF的纯化 | 第40-43页 |
| 4 △nleF和△nleF/NleF的构建 | 第43-47页 |
| 4.1 nleF上下游同源臂及kana基因片段的扩增 | 第43-44页 |
| 4.2 △nleF和△nleF/NleF的构建 | 第44-47页 |
| 4.2.1 △nleF的构建 | 第44页 |
| 4.2.2 △nleF/NleF的构建 | 第44-45页 |
| 4.2.3 △nleF：：kana、△nleF和△nleF/NleF的鉴定 | 第45页 |
| 4.2.4 小结与讨论 | 第45-47页 |
| 5 pcDNA3-Flag-Caspase-4-p19/p10的构建 | 第47-53页 |
| 5.1 pcDNA3-Flag-Caspase-4-p19的构建 | 第47-50页 |
| 5.1.1 Caspase-4-p19序列的扩增 | 第47-48页 |
| 5.1.2 pcDNA3-Flag-Caspase-4-p19的构建 | 第48-49页 |
| 5.1.3 pcDNA3-Flag-Caspase-4-p19的表达 | 第49-50页 |
| 5.2 pcDNA3-Flag-Caspase-4-p10的构建 | 第50-53页 |
| 5.2.1 Caspase-4-p10序列的扩增 | 第50页 |
| 5.2.2 pcDNA3-Flag-Caspase-4-p10的构建 | 第50-51页 |
| 5.2.3 pcDNA3-Flag-Caspase-4-p10的表达 | 第51-53页 |
| 6 NleF对EHEC致病性的影响 | 第53-59页 |
| 6.1 NleF对EHEC生长的影响 | 第53-54页 |
| 6.1.1 实验结果 | 第53-54页 |
| 6.1.2 小结与讨论 | 第54页 |
| 6.2 NleF对EHEC黏附能力的影响 | 第54-56页 |
| 6.2.1 实验结果 | 第55页 |
| 6.2.2 小结与讨论 | 第55-56页 |
| 6.3 NleF对细胞死亡的影响 | 第56-59页 |
| 6.3.1 实验结果 | 第56页 |
| 6.3.2 小结与讨论 | 第56-59页 |
| 7 NleF靶标蛋白的探索 | 第59-61页 |
| 8 总结与讨论 | 第61-63页 |
| 9 展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 硕士期间发表论文 | 第67页 |
