| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第14-27页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一章 miRNA的合成及调控 | 第15-20页 |
| 1.1 miRNA的合成 | 第15-17页 |
| 1.1.1 miRNA合成过程 | 第15-16页 |
| 1.1.2 miRNA合成过程中的重要因子 | 第16-17页 |
| 1.2 miRNA转录的调控 | 第17-19页 |
| 1.2.1 miRNA转录的激活子和抑制物 | 第17-18页 |
| 1.2.2 miRNA的表达调控网络 | 第18-19页 |
| 1.3 miRNA合成的调控 | 第19-20页 |
| 第二章 脂肪细胞研究概述 | 第20-25页 |
| 2.1 脂肪细胞的类型 | 第20-21页 |
| 2.2 脂肪细胞的起源与发育 | 第21-23页 |
| 2.3 脂肪细胞的功能 | 第23页 |
| 2.4 miRNA与脂肪细胞的增殖、分化以及棕色化 | 第23-25页 |
| 2.4.1 miRNA与脂肪细胞的增殖 | 第23页 |
| 2.4.2 miRNA与脂肪细胞的分化 | 第23-24页 |
| 2.4.3 miRNA与棕色化及棕色脂肪细胞的分化 | 第24-25页 |
| 第三章 miR-129 及G3BP1研究概述 | 第25-27页 |
| 3.1 miR-129 研究概述 | 第25-26页 |
| 3.1.1 miR-129 的生物学信息 | 第25-26页 |
| 3.1.2 miR-129 的功能研究 | 第26页 |
| 3.2 G3BP1研究概述 | 第26-27页 |
| 试验研究 | 第27-58页 |
| 前言 | 第27-28页 |
| 第四章 miR1295p组织、时序表达及物种间保守性分析 | 第28-33页 |
| 4.1 材料及方法 | 第28-29页 |
| 4.1.1 细胞及实验动物 | 第28页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第28页 |
| 4.1.3 miRNA物种保守性分析 | 第28页 |
| 4.1.4 3T3-L1前体脂肪细胞系的培养及诱导分化 | 第28页 |
| 4.1.5 细胞及组织RNA的提取与反转 | 第28页 |
| 4.1.6 RT-qPCR检测mi R1295p表达差异 | 第28-29页 |
| 4.2 结果及分析 | 第29-31页 |
| 4.2.1 miR1295p序列物种间保守性分析 | 第29页 |
| 4.2.2 miR1295p的组织表达模式 | 第29页 |
| 4.2.3 miR1295p在 3T3增殖分化过程中的表达模式 | 第29-31页 |
| 4.3 讨论 | 第31-32页 |
| 4.4 小结 | 第32-33页 |
| 第五章 miR1295p抑制了 3T3前体脂肪细胞的增殖 | 第33-39页 |
| 5.1 材料及方法 | 第33-34页 |
| 5.1.1 细胞及实验试剂 | 第33页 |
| 5.1.2 3T3-L1前体脂肪细胞系的培养及诱导分化 | 第33页 |
| 5.1.3 细胞转染 | 第33页 |
| 5.1.4 细胞RNA的提取与反转 | 第33页 |
| 5.1.5 RT-qPCR检测 | 第33页 |
| 5.1.6 Western blot检测 | 第33-34页 |
| 5.1.7 CCK-8 检测 | 第34页 |
| 5.1.8 EdU检测 | 第34页 |
| 5.1.9 流式细胞术检测 | 第34页 |
| 5.1.10 数据分析及作图 | 第34页 |
| 5.2 结果及分析 | 第34-38页 |
| 5.2.1 过表达miR1295p影响了细胞周期相关基因mRNA及蛋白水平的表达 | 第34-36页 |
| 5.2.2 miR1295p抑制了 3T3细胞的增殖 | 第36-38页 |
| 5.3 讨论 | 第38页 |
| 5.4 小结 | 第38-39页 |
| 第六章 miR1295p通过靶定G3BP1调控 3T3细胞增殖过程 | 第39-47页 |
| 6.1 材料及方法 | 第39-41页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 6.1.2 细胞培养及转染 | 第40页 |
| 6.1.3 G3BP13'UTR荧光素酶报告载体构建 | 第40-41页 |
| 6.1.4 双荧光素酶报告分析 | 第41页 |
| 6.1.5 细胞RNA的提取与反转，mRNA水平及蛋白水平检测 | 第41页 |
| 6.2 结果及分析 | 第41-45页 |
| 6.2.1 G3BP1是miR1295p的靶基因 | 第41-43页 |
| 6.2.2 miR1295p直接靶定G3BP1的 3'UTR区域并影响p38通路 | 第43-45页 |
| 6.3 讨论 | 第45-46页 |
| 6.4 小结 | 第46-47页 |
| 第七章 miR1295p不影响小鼠原代脂肪细胞的分化 | 第47-53页 |
| 7.1 材料及方法 | 第47-48页 |
| 7.1.1 实验材料 | 第47页 |
| 7.1.2 小鼠原代脂肪细胞的分离培养与诱导 | 第47页 |
| 7.1.3 小鼠原代脂肪细胞转染 | 第47页 |
| 7.1.4 细胞RNA的提取与反转 | 第47页 |
| 7.1.5 RT-qPCR检测 | 第47页 |
| 7.1.6 Western blot检测 | 第47页 |
| 7.1.7 油红O染色法检测脂滴形成 | 第47-48页 |
| 7.1.8 Bodipy染色法检测脂滴形成 | 第48页 |
| 7.1.9 数据分析及作图 | 第48页 |
| 7.2 结果及分析 | 第48-51页 |
| 7.2.1 小鼠原代脂肪细胞分化模型的建立 | 第48-49页 |
| 7.2.2 过表达miR1295p没有影响成脂相关基因的表达 | 第49-50页 |
| 7.2.3 过表达miR1295p没有影响小鼠原代脂肪细胞成脂 | 第50-51页 |
| 7.3 讨论 | 第51-52页 |
| 7.4 小结 | 第52-53页 |
| 第八章 miR1295p对小鼠原代脂肪细胞棕色化的作用研究 | 第53-58页 |
| 8.1 材料及方法 | 第53-54页 |
| 8.1.1 实验材料 | 第53页 |
| 8.1.2 小鼠原代皮下白色脂肪细胞的棕色化诱导 | 第53页 |
| 8.1.3 细胞转染 | 第53-54页 |
| 8.1.4 细胞RNA的提取与反转 | 第54页 |
| 8.1.5 RT-qPCR检测 | 第54页 |
| 8.1.6 Western blot检测 | 第54页 |
| 8.1.7 数据分析及作图 | 第54页 |
| 8.2 结果及分析 | 第54-56页 |
| 8.2.1 罗格列酮法诱导小鼠原代皮下白色脂肪棕色化 | 第54-55页 |
| 8.2.2 过表达miR1295p抑制棕脂相关基因的表达 | 第55-56页 |
| 8.3 讨论 | 第56-57页 |
| 8.4 小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58页 |
| 创新点 | 第58页 |
| 进一步研究内容 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 作者简介 | 第85页 |
