| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第10-32页 |
| 1.1 本章引论 | 第10-11页 |
| 1.2 ABC转运蛋白的功能 | 第11-14页 |
| 1.2.1 ABC转运蛋白在原核生物中的功能 | 第11-12页 |
| 1.2.2 ABC转运蛋白在真核生物中的功能 | 第12-14页 |
| 1.3 ABC转运蛋白的结构组成 | 第14-22页 |
| 1.3.1 底物结合蛋白（SBPs） | 第15-18页 |
| 1.3.2 核酸结合结构域（NBDs） | 第18-21页 |
| 1.3.3 跨膜区结构域（TMDs） | 第21-22页 |
| 1.4 ABC转运蛋白的机制 | 第22-23页 |
| 1.5 向外转运蛋白（exporter） | 第23-24页 |
| 1.6 向内转运蛋白 | 第24-29页 |
| 1.6.1 Ⅰ型向内转运蛋白（Ⅰ型importer） | 第24-26页 |
| 1.6.2 Ⅱ型向内转运蛋白（Ⅱ型importer） | 第26-28页 |
| 1.6.3 ECF类向内转运蛋白 | 第28-29页 |
| 1.7 氨基酸ABC转运蛋白的研究现状 | 第29-30页 |
| 1.8 本文研究工作的目的和意义 | 第30-32页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第32-56页 |
| 2.1 本章引论 | 第32-33页 |
| 2.2 表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 2.2.1 载体及菌种 | 第33页 |
| 2.2.2 试剂及仪器 | 第33-34页 |
| 2.2.3 实验所用培养基和试剂的配制 | 第34-35页 |
| 2.2.4 大肠杆菌表达载体的构建与筛选 | 第35-36页 |
| 2.3 蛋白的表达与纯化 | 第36-41页 |
| 2.3.1 试剂及仪器 | 第36-37页 |
| 2.3.2 实验中常用缓冲液的配制 | 第37-38页 |
| 2.3.3 目的蛋白的表达 | 第38-39页 |
| 2.3.4 目的蛋白的提取 | 第39-41页 |
| 2.3.4.1 Art I的纯化 | 第40页 |
| 2.3.4.2 Art Q-Art N复合物的纯化 | 第40-41页 |
| 2.4 目的蛋白的结晶与结构解析 | 第41-49页 |
| 2.4.1 试剂及仪器 | 第41页 |
| 2.4.2 晶体初步筛选方法 | 第41-45页 |
| 2.4.3 晶体的优化方法 | 第45-47页 |
| 2.4.4 配置晶体防冻液 | 第47页 |
| 2.4.5 获取晶体相位的方法 | 第47-48页 |
| 2.4.6 晶体结构解析 | 第48-49页 |
| 2.5 Art I和底物的结合 | 第49-51页 |
| 2.5.1 Art I的变性和复性 | 第49-50页 |
| 2.5.1.1 仪器和试剂 | 第49-50页 |
| 2.5.1.2 变性和复性方法 | 第50页 |
| 2.5.2 等温滴定量热技术（ITC）测定Art I的底物 | 第50-51页 |
| 2.6 Art I和Art Q-Art N的结合 | 第51-52页 |
| 2.6.1 仪器和试剂 | 第51页 |
| 2.6.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 2.7 蛋白的酶活测定 | 第52-56页 |
| 2.7.1 仪器和试剂 | 第52页 |
| 2.7.2 去垢剂环境下测量酶活 | 第52-53页 |
| 2.7.3 脂质体环境下测量酶活 | 第53-56页 |
| 2.7.3.1 脂质体的制备 | 第53-55页 |
| 2.7.3.2 脂质体中酶活的测定 | 第55-56页 |
| 第3章 蛋白的纯化与结晶 | 第56-70页 |
| 3.1 Art I的表达纯化及结晶 | 第56-60页 |
| 3.1.1 Art I的表达纯化 | 第56-58页 |
| 3.1.2 Art I的结晶 | 第58-60页 |
| 3.2 Art Q-Art N复合物的表达纯化及结晶 | 第60-69页 |
| 3.2.1 Art Q的表达纯化 | 第60-61页 |
| 3.2.2 Art Q的结晶 | 第61-62页 |
| 3.2.3 Art N的表达纯化 | 第62-64页 |
| 3.2.4 Art Q-Art N复合物的表达纯化 | 第64-65页 |
| 3.2.5 Art Q-Art N复合物的结晶 | 第65-66页 |
| 3.2.6 Art Q-Art N复合物的晶体优化 | 第66-68页 |
| 3.2.7 Art Q-Art N-底物/ATP复合物的晶体生长 | 第68-69页 |
| 3.3 本章小结 | 第69-70页 |
| 第4章 晶体结构解析 | 第70-82页 |
| 4.1 晶体数据收集与结构解析 | 第70-71页 |
| 4.2 Art I的结构及生化特性分析 | 第71-75页 |
| 4.2.1 Art I的结构特性 | 第71-74页 |
| 4.2.2 Art I的生化特性 | 第74-75页 |
| 4.3 Art Q-Art N复合物的结构及生化特性分析 | 第75-80页 |
| 4.3.1 Art Q-Art N复合物的整体结构 | 第75-76页 |
| 4.3.2 Art Q的结构特性 | 第76-78页 |
| 4.3.3 Art N的结构特性 | 第78-80页 |
| 4.4 本章小结和讨论 | 第80-82页 |
| 第5章 Art(QN)_2选择底物的机制分析 | 第82-97页 |
| 5.1 本章引论 | 第82页 |
| 5.2 Art(QN)_2 与Art I的结合 | 第82-83页 |
| 5.3 Art(QN)_2 酶活的测定 | 第83-86页 |
| 5.3.1 去垢剂环境下测定的酶活 | 第83-84页 |
| 5.3.2 脂质体环境下测定的酶活 | 第84-86页 |
| 5.4 Art(QN)_2 选择底物的机制的分析 | 第86-96页 |
| 5.4.1 Art(QN)_2-底物复合物的晶体结构 | 第86-88页 |
| 5.4.2 底物选择的机制 | 第88-92页 |
| 5.4.3 选择底物的共同特征 | 第92-95页 |
| 5.4.4 Art Q的正确折叠对酶活的影响 | 第95-96页 |
| 5.5 本章小结 | 第96-97页 |
| 第6章讨论与展望 | 第97-103页 |
| 6.1 本论文的主要结论 | 第97-98页 |
| 6.2 本论文结论的讨论及要解决的问题 | 第98-101页 |
| 6.2.1 Art(QN)_2 的转运状态 | 第98-99页 |
| 6.2.2 Art(QN)_2 有两个底物结合位点 | 第99-100页 |
| 6.2.3 Art(QN)_2 转运底物的能力 | 第100页 |
| 6.2.4 底物的特异性 | 第100-101页 |
| 6.3 展望 | 第101-103页 |
| 参考文献 | 第103-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 附录A 数据收集和结构修正结果总结图 | 第115-117页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第117页 |
