| 中文摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 rpoS基因概述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 RNA聚合酶 σ 因子简介 | 第12页 |
| 1.1.2 σS（RpoS）的表达调控 | 第12-13页 |
| 1.1.3 σS（RpoS）识别的启动子序列 | 第13-14页 |
| 1.1.4 rpoS基因的功能 | 第14-15页 |
| 1.2 细菌VI型分泌系统概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 细菌分泌系统简介 | 第15-16页 |
| 1.2.2 细菌VI型分泌系统的结构 | 第16-17页 |
| 1.2.3 细菌VI型分泌系统的功能 | 第17页 |
| 1.3 细菌的鞭毛系统 | 第17-19页 |
| 1.3.1 鞭毛的结构 | 第17-18页 |
| 1.3.2 鞭毛的功能 | 第18-19页 |
| 1.3.3 鞭毛基因的表达调控 | 第19页 |
| 1.4 细菌生物膜简介 | 第19-21页 |
| 1.4.1 生物膜的形成机制与组成成分 | 第20-21页 |
| 1.4.2 生物膜的调控机制 | 第21页 |
| 1.5 假结核耶尔森氏菌概述 | 第21-22页 |
| 1.6 本研究目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-31页 |
| 2.1 材料 | 第23页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 试验试剂和培养基 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-31页 |
| 2.2.1 原核表达质粒pET28a-rpoS和互补质粒pKT100-rpoS的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.2 突变体的制备 | 第25页 |
| 2.2.3 氯化铷法制备感受态 | 第25-26页 |
| 2.2.4 细菌生长曲线的测定 | 第26页 |
| 2.2.5 细菌存活率的测定 | 第26页 |
| 2.2.6 重组蛋白原核表达和纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.7 lacZ报告基因的融合及 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第27页 |
| 2.2.8 凝胶迁移阻滞实验（EMSA） | 第27-28页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR检测胁迫相关基因的表达 | 第28-29页 |
| 2.2.10细菌运动性的检测 | 第29页 |
| 2.2.11生物膜形成能力的检测 | 第29页 |
| 2.2.12胞外多糖的定量测定 | 第29-31页 |
| 第三章 试验结果 | 第31-43页 |
| 3.1 △rpoS突变体的构建 | 第31-33页 |
| 3.1.1 敲除质粒的构建原理 | 第31页 |
| 3.1.2 重组质粒pDM4-△rpoS的构建 | 第31-32页 |
| 3.1.3 rpoS基因突变体的筛选 | 第32-33页 |
| 3.2 RpoS对细菌生长状态的影响 | 第33页 |
| 3.3 假结核耶尔森氏菌中RpoS抗胁迫功能的研究 | 第33-36页 |
| 3.3.1 RpoS抗氧化胁迫功能的研究 | 第34页 |
| 3.3.2 RpoS抗酸胁迫功能的研究 | 第34-35页 |
| 3.3.3 RpoS抗渗透压胁迫功能的检测 | 第35页 |
| 3.3.4 RpoS抗热胁迫功能的研究 | 第35-36页 |
| 3.4 RpoS对胁迫相关基因的调节作用 | 第36页 |
| 3.5 RpoS对VI型分泌系统的调控作用 | 第36-39页 |
| 3.5.1 RpoS对T6SS4的调节作用 | 第36-37页 |
| 3.5.2 RpoS与T6SS4启动子结合的检测 | 第37-39页 |
| 3.6 rpoS基因与细菌运动性的关系 | 第39页 |
| 3.7 rpoS基因在生物膜形成方面的作用 | 第39-43页 |
| 3.7.1 线虫表面生物膜形成情况的观察 | 第39-40页 |
| 3.7.2 生物膜形成严重程度的统计 | 第40-41页 |
| 3.7.3 RpoS对胞外多糖合成的影响 | 第41-43页 |
| 第四章 分析与讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
