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灰霉菌胁迫下小立碗藓转录组测序研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
1. 引言第10-15页
    1.1. 植物与病原菌的互作机制第10-11页
    1.2. 小立碗藓被灰霉菌侵染后的前期研究第11-12页
    1.3. 转录组测序技术第12-13页
    1.4. 研究目的及意义第13-15页
2. 材料和方法第15-24页
    2.1. 实验材料第15-16页
        2.1.1. 植物材料与病原菌第15页
        2.1.2. 主要仪器设备第15页
        2.1.3. 主要试剂第15-16页
    2.2. 实验方法第16-24页
        2.2.1. 植物材料与病原菌的培养第16-17页
            2.2.1.1. 小立碗藓培养第16-17页
            2.2.1.2. 灰霉菌培养第17页
        2.2.2. 植物材料与病原菌接种第17-18页
            2.2.2.1. 孢子悬浮液制备第17-18页
            2.2.2.2. 小立碗藓与灰霉菌接种第18页
        2.2.3. 总RNA提取、IIIumina测序及转录组数据分析第18-22页
            2.2.3.1. 总RNA提取第18-19页
            2.2.3.2. RNA琼脂糖凝胶电泳检测第19-20页
            2.2.3.3. cDNA文库构建第20页
            2.2.3.4. 文库质控第20-21页
            2.2.3.5. 上机测序第21页
            2.2.3.6. 测序数据生物信息学分析第21-22页
        2.2.4. qRT-PCR验证第22-24页
            2.2.4.1. 总RNA提取第22页
            2.2.4.2. RNA琼脂糖凝胶电泳检测第22页
            2.2.4.3. 逆转录第22-23页
            2.2.4.4. 实时荧光定量PCR第23-24页
3. 结果与分析第24-56页
    3.1. 总RNA质量评估第24页
        3.1.1. RNA琼脂糖凝胶电泳检测第24页
    3.2. 灰霉菌胁迫下小立碗藓转录组的初步分析第24-45页
        3.2.1. 测序数据产出统计第24-25页
        3.2.2. 与参考基因组比对效率统计第25-26页
        3.2.3. 差异表达基因分析第26-27页
        3.2.4. 接种灰霉菌不同时间的差异表达基因的分析第27-45页
            3.2.4.1. 接种灰霉菌 12h的差异表达基因GO及COG分析第27-31页
            3.2.4.2. 接种灰霉菌 1d的差异表达基因GO及COG分析第31-34页
            3.2.4.3. 接种灰霉菌 2d的差异表达基因GO及COG分析第34-38页
            3.2.4.4. 接种灰霉菌 3d的差异表达基因GO及COG分析第38-43页
            3.2.4.5. 差异表达基因的KEGG分析第43-45页
    3.3. 接种灰霉菌后特定差异表达基因分析第45-55页
        3.3.1. 特定时期差异表达基因筛选及分析第45-46页
        3.3.2. 特定时期差异表达基因GO分析第46-53页
        3.3.3. 防御相关代谢途径及基因分析第53-55页
    3.4. qRT-PCR验证第55-56页
        3.4.1. qRT-PCR对RNA-seq数据的验证第55-56页
4. 讨论与结论第56-63页
    4.1. 基因的差异表达分析第56-57页
    4.2. 防御相关代谢途径及基因第57-63页
        4.2.1. p53信号通路相关基因第57-58页
        4.2.2. 苯丙烷类生物合成路径相关基因第58-59页
        4.2.3. 植物与病原菌互作路径相关基因第59-60页
        4.2.4. 植物激素信号转导路径相关基因第60-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-70页
附录第70-76页

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