| 摘要 | 第2-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 支气管败血波氏杆菌及生物被膜研究进展 | 第10-20页 |
| 1 支气管败血波氏杆菌的相关研究 | 第10-12页 |
| 1.1 支气管败血波氏杆菌 | 第10-11页 |
| 1.2 支气管败血波氏杆菌致病性 | 第11页 |
| 1.3 支气管败血波氏杆菌的毒力因子及外膜蛋白 | 第11-12页 |
| 1.3.1 丝状血凝素 | 第11页 |
| 1.3.2 腺苷酸环化酶溶血素 | 第11-12页 |
| 1.3.3 外膜蛋白ompQ | 第12页 |
| 1.3.4 皮肤坏死毒素 | 第12页 |
| 2 细菌生物被膜的研究进展 | 第12-20页 |
| 2.1 细菌生物被膜 | 第12-13页 |
| 2.2 细菌生物被膜的组成 | 第13-14页 |
| 2.2.1 多糖 | 第13页 |
| 2.2.2 eDNA | 第13-14页 |
| 2.2.3 蛋白和脂类 | 第14页 |
| 2.3 细菌生物被膜的形态结构 | 第14页 |
| 2.4 细菌生物被膜的形成过程 | 第14-15页 |
| 2.5 细菌的密度感应系统与生物被膜的关系 | 第15-16页 |
| 2.6 生物被膜形成过程中的蛋白的表达 | 第16-17页 |
| 2.7 生物被膜的致病性 | 第17-18页 |
| 2.8 超氧化物歧化酶与生物被膜的关系 | 第18-20页 |
| 第二章 猪支气管败血波氏杆菌生物被膜的形成及其影响因素研究 | 第20-28页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| 1.1 材料 | 第20-21页 |
| 1.1.1 菌种 | 第20页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 1.2 方法 | 第21-23页 |
| 1.2.1 细菌培养 | 第21页 |
| 1.2.2 支气管败血波氏杆菌生物被膜结晶紫染色观察 | 第21-22页 |
| 1.2.3 生物被膜形成能力的测定 | 第22页 |
| 1.2.4 影响支气管败血波氏杆菌生物被膜形成的因素 | 第22-23页 |
| 1.2.4.1 培养时间对支气管败血波氏杆菌生物被膜的影响 | 第22页 |
| 1.2.4.2 氯化钠浓度对支气管败血波氏杆菌生物被膜的影响 | 第22页 |
| 1.2.4.3 培养基pH对支气管败血波氏杆菌生物被膜的影响 | 第22页 |
| 1.2.4.4 葡糖糖、蔗糖、乳糖对支气管败血波氏杆菌生物被膜的影响 | 第22-23页 |
| 2 结果 | 第23-26页 |
| 2.1 支气管败血波氏杆菌生物被膜的形成过程 | 第23页 |
| 2.2 培养时间对支气管败血波氏杆菌生物被膜的影响 | 第23页 |
| 2.3 氯化钠浓度对支气管败血波氏杆菌生物被膜的影响 | 第23-24页 |
| 2.4 培养基pH对支气管败血波氏杆菌生物被膜的影响 | 第24-26页 |
| 2.5 葡糖糖、蔗糖、乳糖对支气管败血波氏杆菌生物被膜的影响 | 第26页 |
| 3 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 支气管败血波氏杆菌浮游态和生物被膜态比较蛋白组学研究 | 第28-35页 |
| 1 材料与方法 | 第28-32页 |
| 1.1 材料 | 第28-30页 |
| 1.1.1 菌株和培养条件 | 第28-29页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第29页 |
| 1.1.4 培养基、主要缓冲液及试剂的配制 | 第29-30页 |
| 1.2 方法 | 第30-32页 |
| 1.2.1 菌体蛋白的提取及样品的制备 | 第30-31页 |
| 1.2.2 双向凝胶电泳 | 第31-32页 |
| 1.2.2.1 等电聚焦 | 第31页 |
| 1.2.2.2 SDS—PAGE | 第31-32页 |
| 1.2.2.3 凝胶图像分析及质谱鉴定 | 第32页 |
| 2 结果 | 第32-33页 |
| 2.1 双向电泳结果分析 | 第32页 |
| 2.2 质谱鉴定结果分析 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 第四章 超氧化物歧化酶(SOD)基因的克隆表达及生物学特性研究 | 第35-50页 |
| 1 材料与方法 | 第35-44页 |
| 1.1 材料 | 第35-38页 |
| 1.1.1 菌种、载体及试验动物 | 第35页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第35-36页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第36页 |
| 1.1.4 试剂配方 | 第36-37页 |
| 1.1.5 引物设计与合成 | 第37-38页 |
| 1.2 方法 | 第38-44页 |
| 1.2.1 支气管败血波氏杆菌总DNA的提取 | 第38页 |
| 1.2.2 目的基因片段的克隆 | 第38页 |
| 1.2.3 PCR产物纯化回收 | 第38页 |
| 1.2.4 回收产物的连接转化 | 第38-40页 |
| 1.2.5 重组表达载体的构建及鉴定 | 第40页 |
| 1.2.6 重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第40-41页 |
| 1.2.7 表达条件的优化及重组蛋白的纯化 | 第41页 |
| 1.2.8 重组蛋白的Western blot检测 | 第41-42页 |
| 1.2.9 重组超氧化物歧化酶的酶比活性检测 | 第42页 |
| 1.2.10 小鼠的免疫及攻毒 | 第42-43页 |
| 1.2.10.1 动物免疫 | 第42-43页 |
| 1.2.10.2 间接ELISA检测抗体效价 | 第43页 |
| 1.2.10.3 多克隆抗体的Western blot检测 | 第43页 |
| 1.2.10.4 人工感染和免疫保护效率的测定 | 第43页 |
| 1.2.11 多抗血清对生物被摸的抑制试验 | 第43-44页 |
| 2 结果 | 第44-48页 |
| 2.1 SOD基因的扩增克隆 | 第44页 |
| 2.3 重组质粒的鉴定及序列分析 | 第44页 |
| 2.4 重组蛋白SOD的诱导表达及纯化 | 第44-45页 |
| 2.5 表达产物的Western-blot分析 | 第45-46页 |
| 2.6 超氧化物歧化酶稀释以及活性测定 | 第46-47页 |
| 2.7 SOD多克隆抗体的检测 | 第47-48页 |
| 2.8 人工感染以及免疫效率的检测 | 第48页 |
| 2.9 多抗血清对生物被膜的抑制试验 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 导师简介 | 第63-64页 |
