| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 引言 | 第7-18页 |
| 第1章 实验材料与方法 | 第18-42页 |
| 1.1 实验材料 | 第18-32页 |
| 1.1.1 溶液配制 | 第18-27页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 1.1.3 细胞株和细胞培养相关试剂 | 第28-29页 |
| 1.1.4 质粒、转化菌株和蛋白纯化相关试剂 | 第29-30页 |
| 1.1.5 Western Blot、免疫共沉淀、免疫荧光试剂 | 第30-31页 |
| 1.1.6 抗体 | 第31-32页 |
| 1.2 实验方法 | 第32-42页 |
| 1.2.1 免疫荧光 | 第32-33页 |
| 1.2.2 制备感受态细胞 | 第33页 |
| 1.2.3 免疫共沉淀 | 第33-35页 |
| 1.2.4 原核表达系统及GST蛋白纯化 | 第35页 |
| 1.2.5 稳定细胞系筛选 | 第35-36页 |
| 1.2.6 细胞收集和总蛋白提取、定量 | 第36-37页 |
| 1.2.7 Western Blotting分析 | 第37页 |
| 1.2.8 GST Pull Down Assay | 第37-38页 |
| 1.2.9 细胞周期同步化 | 第38页 |
| 1.2.10 lipofetamine2000转染 | 第38页 |
| 1.2.11 lipofetamine RNAiMAX转染 | 第38-39页 |
| 1.2.12 质粒构建 | 第39-41页 |
| 1.2.13 统计学分析 | 第41-42页 |
| 第2章 实验结果 | 第42-51页 |
| 1. Tankyrase1与MERIT40相互作用并在纺锤极共定位 | 第42-44页 |
| 2. MERIT40保守基序RXXPEG介导MERIT40-Tankyrase1相互作用和纺锤极形成 | 第44-46页 |
| 3. Tankyrase1的亚结构域ARC V介导Tankyrase1与MERIT40、BRCC36相互作用 | 第46-47页 |
| 4. RXXPEG介导MERIT40纺锤极定位和维持完整纺锤体结构 | 第47-48页 |
| 5. MERIT40复合物调控Tankyrase1 K63连接泛素化修饰 | 第48-51页 |
| 第3章 讨论 | 第51-54页 |
| 第4章 综述 DUBS在有丝分裂中的作用 | 第54-72页 |
| 4.1 泛素化修饰 | 第54-55页 |
| 4.2 DUBs逆转非蛋白水解泛素化信号 | 第55-64页 |
| 4.3 DUBs逆转蛋白泛素化水解信号 | 第64-65页 |
| 4.4 UBPs在有丝分裂中的作用 | 第65-66页 |
| 4.5 UBPs靶向底物经蛋白酶体降解 | 第66-69页 |
| 4.6 UBPs调节底物定位 | 第69-70页 |
| 4.7 结束语和展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
