| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 文献综述 | 第8-14页 |
| 1.1 大豆疫霉概述 | 第8-9页 |
| 1.2 琥珀酸脱氢霉的概述 | 第9-10页 |
| 1.3 RNA干扰技术介绍 | 第10页 |
| 1.4 RNAi效用机理 | 第10-12页 |
| 1.5 RNA干扰技术与基因敲出技术的比较 | 第12页 |
| 1.6 RNA干扰技术在疫霉基因功能研究中的应用 | 第12页 |
| 1.7 琥珀酸脱氢霉（SDH）研究进展 | 第12-14页 |
| 2 引言 | 第14-16页 |
| 3 材料与方法 | 第16-23页 |
| 3.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 3.1.1 供试菌株和载体 | 第16页 |
| 3.1.2 供试大豆品种 | 第16页 |
| 3.1.3 培养基 | 第16页 |
| 3.1.4 溶液的配制及主要试剂 | 第16-17页 |
| 3.2 实验方法 | 第17-23页 |
| 3.2.1 大肠杆菌DH5a/JM109感受态细胞的制备（CaCl_2法） | 第17-18页 |
| 3.2.2 RNA的提取 | 第18页 |
| 3.2.3 基因组DNA的提取（CTAB-SDS法） | 第18页 |
| 3.2.4 大豆疫霉各个生长时期RNA的提取 | 第18-19页 |
| 3.2.5 cDNA的反转录 | 第19页 |
| 3.2.6 PsSDHB目的片段的扩增 | 第19-20页 |
| 3.2.7 PsSDHB沉默载体的构建 | 第20页 |
| 3.2.8 PsSDHB克隆载体质粒回收和SDHB目的片段的胶回收 | 第20页 |
| 3.2.9 pTOR-GFP-PsSDHB表达质粒大量提取 | 第20页 |
| 3.2.10 大豆疫霉PEG介导的原生质体稳定转化 | 第20-21页 |
| 3.2.11 各个沉默突变菌株PsSDHB表达量qRT-PCR分析 | 第21-22页 |
| 3.2.12 沉默突变菌株PsSDHB相关表型分析 | 第22页 |
| 3.2.13 PsSDHB沉默突变体的致病性研究 | 第22-23页 |
| 4 结果与分析 | 第23-32页 |
| 4.1 PsSDHB基因克隆以及氨基酸序列分析 | 第23-24页 |
| 4.2 PsSDHB各个生活史阶段和侵染阶段的转录的表达分析 | 第24-25页 |
| 4.3 PsSDHB反向沉默载体的构建及转化子的获得 | 第25-26页 |
| 4.4 PsSDHB沉默转化菌株的表型分析 | 第26-30页 |
| 4.4.1 PsSDHB沉默转化菌株在 10%V8培养基上菌丝成长速率 | 第26-27页 |
| 4.4.2 PsSDHB沉默转化菌株菌丝形态变化 | 第27-28页 |
| 4.4.3 PsSDHB沉默转化子孢子囊的产生和游动孢子释放差异 | 第28页 |
| 4.4.4 PsSDHB沉默转化子在胁迫条件下生长情况 | 第28-30页 |
| 4.5 PsSDHB沉默转化子的致病性分析 | 第30-32页 |
| 5 讨论 | 第32-33页 |
| 6 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 作者简介 | 第38页 |
