| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| ·Rho1 及其功能 | 第11-13页 |
| ·Rho 族蛋白及功能 | 第11-12页 |
| ·Rho1 及其研究进展 | 第12-13页 |
| ·与Rho1 互作蛋白的研究分析 | 第13-14页 |
| ·能量代谢途径在稻瘟病菌中的研究意义 | 第14-15页 |
| ·泛素化在真菌生物中的研究 | 第15-17页 |
| ·蛋白质水解在稻瘟病菌中的研究进展 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·实验用载体 | 第18页 |
| ·实验用菌株 | 第18页 |
| ·实验植物材料 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·生化试剂 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-30页 |
| ·生物信息学分析 | 第19-20页 |
| ·AD（prey）载体的构建 | 第20-21页 |
| ·BD（bait）载体的构建 | 第21-22页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·酵母转化 | 第22-23页 |
| ·稻瘟病菌菌丝体基因组DNA 的提取 | 第23页 |
| ·稻瘟病菌菌丝体总RNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·PCR | 第24-25页 |
| ·反转录PCR | 第25页 |
| ·敲除突变体载体的构建 | 第25-27页 |
| ·过量表达突变体载体的构建 | 第27页 |
| ·原生质体的制备 | 第27-28页 |
| ·原生质体转化 | 第28-29页 |
| ·稻瘟菌生长速度的测定 | 第29页 |
| ·产孢量的统计 | 第29页 |
| ·孢子的萌发及附着胞的形成实验 | 第29页 |
| ·洋葱表皮侵染观察实验 | 第29页 |
| ·大麦的接种实验 | 第29页 |
| ·水稻致病性分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-61页 |
| ·酵母双杂交验证所研究蛋白与Rho1 的互作关系 | 第30-34页 |
| ·生物信息学分析 | 第30页 |
| ·MPID 分析预测所研究的蛋白与Rho1 的互作关系 | 第30页 |
| ·AD 载体的构建 | 第30-31页 |
| ·BD 载体的构建 | 第31页 |
| ·Rho1 诱饵载体自身激活活性检测 | 第31-32页 |
| ·酵母共转化及转化子的筛选、验证 | 第32-34页 |
| ·MoAca 的功能分析 | 第34-41页 |
| ·MoAca 的生物信息学分析 | 第34-36页 |
| ·MoAca 相关突变体分析 | 第36-41页 |
| ·MoAca 的敲除突变体的获得 | 第36-37页 |
| ·MoAca 敲除载体的构建 | 第36页 |
| ·MoAca 敲除转化子的筛选与鉴定 | 第36-37页 |
| ·MoAca 敲除突变体的表型分析 | 第37-41页 |
| ·MoAca 的敲除导致稻瘟病菌生长缓慢且菌丝生长异常 | 第37-39页 |
| ·MoAca 的敲除并不影响稻瘟病菌的产孢量，孢子形态及萌发率 | 第39页 |
| ·MoAca 的敲除影响稻瘟病菌对寄主的侵染 | 第39-41页 |
| ·MoPnrs 的功能分析 | 第41-51页 |
| ·MoPnrs 的生物信息学分析 | 第41-42页 |
| ·MoPnrs 的敲除突变体功能分析 | 第42-47页 |
| ·MoPnrs 敲除突变体的获得 | 第43-44页 |
| ·MoPnrs 敲除载体的构建 | 第43页 |
| ·MoPnrs 敲除转化子的筛选与鉴定 | 第43-44页 |
| ·MoPnrs 敲除突变体的表型分析 | 第44-47页 |
| ·MoPnrs 基因的敲除并不影响稻瘟病菌生长发育 | 第44-45页 |
| ·MoPnrs基因的敲除影响稻瘟病菌的产孢量而并不影响孢子的形态及萌发率 | 第45-47页 |
| ·对MoPnrs 的敲除并不影响稻瘟病菌对水稻及大麦的致病性 | 第47页 |
| ·MoPnrs 过量表达突变体的分析 | 第47-51页 |
| ·MoPnrs 过量表达突变体的获得 | 第47-49页 |
| ·MoPnrs 过量表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·MoPnrs 过量表达转化子的筛选和验证 | 第48-49页 |
| ·MoPnrs 过量表达突变体的表型分析 | 第49-51页 |
| ·MoPnrs 在稻瘟病菌中的过量表达不影响稻瘟病菌菌丝的生长 | 第49页 |
| ·MoPnrs在稻瘟病菌中的过量表达致使稻瘟病菌的产孢量增加却不影响孢子的萌发和侵染 | 第49-51页 |
| ·MoPnrs 在稻瘟病菌中的过量表不影响稻瘟病菌的致病性 | 第51页 |
| ·MoCnd 的功能分析 | 第51-61页 |
| ·MoCnd 的生物信息学分析 | 第51-53页 |
| ·MoCnd 的敲除突变体功能分析 | 第53-57页 |
| ·MoCnd 敲除突变体的获得 | 第53-54页 |
| ·MoCnd 敲除载体的构建 | 第53页 |
| ·MoCnd 敲除转化子的筛选与鉴定 | 第53-54页 |
| ·MoCnd 敲除突变体的表型分析 | 第54-57页 |
| ·MoCnd 基因的敲除并不影响稻瘟病菌生长发育 | 第54-55页 |
| ·MoCnd 基因的敲除对到稻瘟病菌产孢量及萌发率的影响 | 第55-56页 |
| ·对MoCnd 的敲除并不影响稻瘟病菌对水稻及大麦的致病性 | 第56-57页 |
| ·MoCnd 过量表达突变体的分析 | 第57-61页 |
| ·MoCnd 过量表达突变体的获得 | 第57-58页 |
| ·MoCnd 过量表达载体的构建 | 第57页 |
| ·MoCnd 过量表达转化子的筛选和验证 | 第57-58页 |
| ·MoCnd 过量表达突变体的表型分析 | 第58-61页 |
| ·MoCnd 在稻瘟病菌中的过量表达不影响稻瘟病菌菌丝的生长 | 第58页 |
| ·MoCnd 在稻瘟病菌中的过量表达致使稻瘟病菌的产孢量增加却不影响孢子的萌发和侵染 | 第58-59页 |
| ·MoCnd 在稻瘟病菌中的过量表达不影响稻瘟病菌的致病性 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| ·初步明确 MoAca、MoPnrs、MoCnd 与 Rho1是互作蛋白。 | 第61页 |
| ·MoAca、MoPnrs、MoCnd 参与着Rho1 激活态所调节的下游多种信号通路 | 第61页 |
| ·MoAca 与Rho1 可能共同作用调节稻瘟病菌气生菌丝的生长及致病性 | 第61-62页 |
| ·在稻瘟菌中的蛋白质降解与产孢之间的关系 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录1 本研究所用的PCR 引物序列及其相关用途 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
