| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 蜕皮激素 | 第11-14页 |
| 1.1 蜕皮激素的种类及功能 | 第11-12页 |
| 1.2 蜕皮激素在蜜蜂体内的周期性变化 | 第12-13页 |
| 1.3 蜕皮激素的合成与代谢 | 第13-14页 |
| 2 蜕皮激素受体与超气门蛋白 | 第14-18页 |
| 2.1 EcR与USP的结构特征 | 第14-15页 |
| 2.2 EcR/USP复合体与蜕皮激素信号的传导 | 第15-17页 |
| 2.3 EcR与USP在变态发育中的作用 | 第17页 |
| 2.4 EcR与USP的研究前景与意义 | 第17-18页 |
| 3 荧光定量 | 第18-19页 |
| 3.1 荧光定量的原理与应用 | 第18页 |
| 3.2 荧光定量方法 | 第18-19页 |
| 4 基因干扰技术及其在蜜蜂RNAi中的应用 | 第19-20页 |
| 4.1 基因干扰技术的原理与应用 | 第19页 |
| 4.2 试剂盒合成dsRNA介导RNAi | 第19-20页 |
| 5 本论文拟解决的问题 | 第20-21页 |
| 第二章 西方蜜蜂体内EcR与USP基因的表达 | 第21-34页 |
| 1 材料与方法 | 第21-24页 |
| 1.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 1.1.1 供体蜜蜂品种及采样标准 | 第21页 |
| 1.1.2 试剂 | 第21页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第21-22页 |
| 1.2 实验方法 | 第22-24页 |
| 1.2.1 提取RNA与cDNA反转录 | 第22-23页 |
| 1.2.2 ecr、usp克隆与定量引物验证 | 第23页 |
| 1.2.3 荧光定量PCR | 第23-24页 |
| 1.2.4 数据分析 | 第24页 |
| 2 实验结果与分析 | 第24-31页 |
| 2.1 ecr、usp定量引物验证 | 第24-25页 |
| 2.2 定量引物特异性检验 | 第25-26页 |
| 2.3 建立标准曲线 | 第26-27页 |
| 2.4 ecr在西方蜜蜂体内各时期的表达 | 第27页 |
| 2.5 ecr在3种级型之间的表达差异 | 第27-29页 |
| 2.6 usp在西方蜜蜂体内各时期的表达 | 第29页 |
| 2.7 usp在3种级型之间的表达差异 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31-34页 |
| 第三章 利用试剂盒合成dsRNA干扰西方蜜蜂ecr的研究 | 第34-44页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| 1.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 1.1.1 供体蜜蜂品种及采样标准 | 第34页 |
| 1.1.2 试剂 | 第34页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
| 1.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 1.2.1 提取RNA与cDNA反转录 | 第35页 |
| 1.2.2 ecri克隆与引物验证 | 第35页 |
| 1.2.3 试剂盒合成dsRNA | 第35-36页 |
| 1.2.4 纯化ecr的dsRNA | 第36页 |
| 1.2.5 试剂盒合成并纯化egfp dsRNA | 第36页 |
| 1.2.5 ecr dsRNA注射工蜂幼虫干扰试验 | 第36页 |
| 2 实验结果与分析 | 第36-43页 |
| 2.1 ecr的PCR扩增、质粒重组及基因克隆 | 第36-37页 |
| 2.2 ecr和egfp dsRNA的合成 | 第37-38页 |
| 2.3 dsRNA注射干扰结果 | 第38-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第四章 总结与展望 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53页 |