| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-17页 |
| ·课题背景 | 第10-17页 |
| ·慢病毒研究概况 | 第10-11页 |
| ·APOBEC与Vif的相互作用 | 第11-14页 |
| ·国内外相关研究现状及发展趋势 | 第14-15页 |
| ·研究的目的与意义 | 第15-17页 |
| 2 质粒的构建及鉴定 | 第17-26页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·质粒及菌株 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-20页 |
| ·PCR扩增Vif、CBF-β片段及其产物检测和回收 | 第17-20页 |
| ·实验结果与分析 | 第20-25页 |
| ·HIV-1 Vif和SIVagm Vif序列对比分析 | 第20页 |
| ·HIV-1 Vif蛋白复合体结构预测 | 第20-21页 |
| ·构建HIV-1 Vif、SIVagm Vif及相应氨基酸截短的表达质粒 | 第21-22页 |
| ·Vif、CBF-β片段的PCR扩增 | 第22-24页 |
| ·克隆产物双酶切鉴定 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25页 |
| ·本章小结 | 第25-26页 |
| 3 CBF-β促进SIVagm-Vif功能的生化分析 | 第26-38页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·质粒及细胞株 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-28页 |
| ·HEK293T及Hala细胞的培养 | 第26页 |
| ·细胞转染 | 第26-27页 |
| ·Western Blot检测 | 第27页 |
| ·间接免疫荧光实验 | 第27页 |
| ·蔗糖密度梯度离心实验 | 第27-28页 |
| ·CHX稳定性实验 | 第28页 |
| ·CBF-β对SIVagm Vif功能影响实验 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-36页 |
| ·CBF-β辅助SIVagm Vif降解APOBEC的检测结果 | 第28-29页 |
| ·HIV-1 Vif、SIVagm Vif缺失N端12个氨基酸对A3G降解能力的检测 | 第29-30页 |
| ·CBF-β对SIVagm Vif细胞内稳定性的检测结果 | 第30-31页 |
| ·CBF-β对HIV-1 Vif△12aa、SIVagm Vif△12aa蛋白在细胞内的稳定性的检测 | 第31-32页 |
| ·CBF-β对SIVagm Vif蛋白在细胞内分布状态影响的检测 | 第32-33页 |
| ·CBF-β对HIV-1 Vif△12aa、SIVagm Vif△12aa蛋白在细胞内分布状态影响的检测 | 第33-34页 |
| ·CBF-β对Vif蛋白寡聚化影响的检测结果 | 第34-35页 |
| ·CBF-β对缺失N端12个氨基酸的Vif蛋白寡聚化影响的检测结果 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
