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拟南芥E3泛素连接酶PUB30与PUB31耐盐功能分析及互作的14-3-3蛋白的筛选

摘要第1-12页
Abstract第12-14页
第一章 文献综述第14-23页
   ·蛋白质降解在植物中的功能和途径第14-15页
     ·蛋白质降解在植物中的功能第14页
     ·蛋白质降解在植物中的途径第14-15页
   ·U-box E3泛素连接酶在植物体内的作用第15-19页
     ·植物中的U-box E3泛素连接酶第15页
     ·U-box E3泛素连接酶的生理作用第15-19页
   ·14-3-3蛋白第19-22页
     ·14-3-3蛋白在生物体内的结构和功能第19-20页
     ·14-3-3蛋白在植物体内的作用第20-22页
   ·研究目的与意义第22-23页
第二章 拟南芥U-box E3连接酶突变体pub30和pub31对盐胁迫的生理响应第23-28页
   ·材料与方法第23页
     ·拟南芥的基因型、生长条件及1/2MS培养基播种拟南芥的方法第23页
     ·生物信息学分析数据库第23页
   ·结果与分析第23-27页
     ·AtPUB30和AtPUB31的生物信息学分析第23-25页
     ·在萌发过程中pub30、pub31及pub30pub31对盐胁迫的响应第25-27页
   ·讨论第27-28页
第三章 拟南芥pub30-1/PUB30回补种子在盐胁迫下的生理响应第28-40页
   ·材料与方法第28-36页
     ·pub30回补载体的构建与转化第28页
     ·菌株与质粒第28-29页
     ·酶与试剂第29页
     ·常用试剂配制第29-30页
     ·回补载体的构建第30-33页
     ·回补载体转化农杆菌第33-34页
     ·带有回补载体的农杆菌侵染转化pub30-1突变体第34-35页
     ·Western blot鉴定阳性植株的基因表达情况第35-36页
   ·结果与分析第36-39页
     ·回补载体的构建第36-37页
     ·转基因回补阳性幼苗的筛选第37页
     ·在种子萌发过程中AtPUB30对盐胁迫的响应起负调控作用第37-39页
   ·讨论第39-40页
第四章 酵母双杂交技术筛选与AtPUB30和AtPUB31互作的14-3-3蛋白第40-53页
   ·材料与方法第40-47页
     ·菌株第40页
     ·拟南芥总RNA的提取和cDNA的合成第40页
     ·PCR扩增14-3-3基因第40页
     ·酵母表达载体构建第40-44页
     ·酵母感受态的制备与转化第44-46页
     ·biat菌株和prey菌株杂交第46页
     ·提取酵母质粒鉴定转化结果第46页
     ·筛选阳性菌株第46-47页
   ·结果与分析第47-51页
     ·pGADT7和14-3-3基因的连接第47页
     ·AtPUB31与14-3-3蛋白中的IOTA互作第47-49页
     ·AtPUB30与14-3-3蛋白中的OMICRON和OMEGA互作第49-51页
   ·讨论第51-53页
第五章 总结与展望第53-55页
参考文献第55-68页
附录第68-69页
致谢第69-70页

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