摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-23页 |
·蛋白质降解在植物中的功能和途径 | 第14-15页 |
·蛋白质降解在植物中的功能 | 第14页 |
·蛋白质降解在植物中的途径 | 第14-15页 |
·U-box E3泛素连接酶在植物体内的作用 | 第15-19页 |
·植物中的U-box E3泛素连接酶 | 第15页 |
·U-box E3泛素连接酶的生理作用 | 第15-19页 |
·14-3-3蛋白 | 第19-22页 |
·14-3-3蛋白在生物体内的结构和功能 | 第19-20页 |
·14-3-3蛋白在植物体内的作用 | 第20-22页 |
·研究目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 拟南芥U-box E3连接酶突变体pub30和pub31对盐胁迫的生理响应 | 第23-28页 |
·材料与方法 | 第23页 |
·拟南芥的基因型、生长条件及1/2MS培养基播种拟南芥的方法 | 第23页 |
·生物信息学分析数据库 | 第23页 |
·结果与分析 | 第23-27页 |
·AtPUB30和AtPUB31的生物信息学分析 | 第23-25页 |
·在萌发过程中pub30、pub31及pub30pub31对盐胁迫的响应 | 第25-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
第三章 拟南芥pub30-1/PUB30回补种子在盐胁迫下的生理响应 | 第28-40页 |
·材料与方法 | 第28-36页 |
·pub30回补载体的构建与转化 | 第28页 |
·菌株与质粒 | 第28-29页 |
·酶与试剂 | 第29页 |
·常用试剂配制 | 第29-30页 |
·回补载体的构建 | 第30-33页 |
·回补载体转化农杆菌 | 第33-34页 |
·带有回补载体的农杆菌侵染转化pub30-1突变体 | 第34-35页 |
·Western blot鉴定阳性植株的基因表达情况 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-39页 |
·回补载体的构建 | 第36-37页 |
·转基因回补阳性幼苗的筛选 | 第37页 |
·在种子萌发过程中AtPUB30对盐胁迫的响应起负调控作用 | 第37-39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
第四章 酵母双杂交技术筛选与AtPUB30和AtPUB31互作的14-3-3蛋白 | 第40-53页 |
·材料与方法 | 第40-47页 |
·菌株 | 第40页 |
·拟南芥总RNA的提取和cDNA的合成 | 第40页 |
·PCR扩增14-3-3基因 | 第40页 |
·酵母表达载体构建 | 第40-44页 |
·酵母感受态的制备与转化 | 第44-46页 |
·biat菌株和prey菌株杂交 | 第46页 |
·提取酵母质粒鉴定转化结果 | 第46页 |
·筛选阳性菌株 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-51页 |
·pGADT7和14-3-3基因的连接 | 第47页 |
·AtPUB31与14-3-3蛋白中的IOTA互作 | 第47-49页 |
·AtPUB30与14-3-3蛋白中的OMICRON和OMEGA互作 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第五章 总结与展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-68页 |
附录 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |