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基于鞭毛蛋白佐剂的鼠疫炭疽联合疫苗初步研究

主要缩略词表第1-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-15页
前言第15-22页
第一章 基于鞭毛蛋白佐剂的重组鼠疫抗原的构建与评价第22-51页
 第一节 FliCdel-F1mut-V的构建及重组表达第22-46页
  1. 材料与方法第22-33页
   ·材料第22-24页
   ·方法第24-33页
  2. 结果第33-45页
   ·FliCdel的基因设计第33-34页
   ·FliCdel的基因克隆与测序第34-35页
   ·F1mut-V的克隆第35-36页
   ·FliCdel-F1mut-V的克隆第36-38页
   ·FliCdel与FliCdel-F1mut-V的诱导表达与SDS-PAGE第38-40页
   ·FliCdel的Western blotting分析第40页
   ·FliCdel与FliCdel-F1mut-V的纯化第40-41页
   ·FliCdel-F1mut-V的Western blotting分析第41-42页
   ·FliCdel-F1mut-V的N端测序第42-45页
  3. 讨论第45-46页
 第二节 FliCdel-F1mut-V的免疫保护评价第46-51页
  1. 材料与方法第46-47页
   ·材料第46页
   ·方法第46-47页
  2. 结果第47-50页
   ·FliCdel-F1mut-V诱导小鼠产生抗原特异性抗体第47-49页
   ·FliCdel-F1mut-V能够保护小鼠对抗鼠疫强毒株的攻毒第49-50页
  3. 讨论第50-51页
第二章 基于鞭毛蛋白佐剂的鼠疫炭疽联合疫苗的构建与初步评价第51-73页
 第一节 FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的构建及重组表达第51-63页
  1. 材料与方法第51-56页
   ·材料第51-52页
   ·方法第52-56页
  2. 结果第56-62页
   ·pET32a-FliCdel-PAloop2 的克隆第56-57页
   ·pET32a-F1mut-V-linker-PAloop2 原核表达质粒的构建第57-58页
   ·FliCdel-PAloop2 和FliCdel-F1mut-V-PAloop2 诱导表达与可溶性分析第58-59页
   ·FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的纯化第59-60页
   ·FliCdel-PAloop2 包涵体的纯化第60页
   ·FliCdel-PAloop2 和FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的免疫印迹分析第60-61页
   ·FliCdel-PAloop2 和FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的ELISA分析第61-62页
  3. 讨论第62-63页
 第二节 FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的初步免疫保护评价第63-73页
  1. 材料与方法第63-65页
   ·材料第63页
   ·方法第63-65页
  2. 结果第65-72页
   ·FliCdel-PAloop2 和FliCdel-F1mut-V-PAloop2 在大鼠模型上诱导产生PA特异性抗体第65-66页
   ·FliCdel的佐剂效应第66-67页
   ·小鼠产生PA的特异性抗体第67-68页
   ·小鼠产生炭疽毒素中和性抗体第68-69页
   ·小鼠的炭疽毒素攻毒第69-70页
   ·FliCdel-F1mut-V-PAloop2 诱导小鼠产生F1、V特异性抗体第70-72页
  3. 讨论第72-73页
第三章 鼠疫菌F1 抗原中和表位的筛选第73-86页
 1. 材料与方法第73-79页
   ·材料第73-74页
   ·方法第74-79页
 2. 结果第79-84页
   ·F2H5 识别的噬菌体克隆的筛选第79页
   ·9株与F2H5 特异性结合的噬菌体单克隆第79-80页
   ·噬菌体DNA测序结果第80-81页
   ·F1 抗原竞争抑制噬菌体克隆与F2H5 结合第81页
   ·FliCdel-F1 表位重组表达质粒的构建第81-82页
   ·重组蛋白的可溶性表达与纯化第82-83页
   ·FliCdel-1、FliCdel-14 的Western blotting与ELISA分析第83-84页
 3. 讨论第84-86页
结论第86-87页
 有待完善之处第86-87页
参考文献第87-93页
附录 主要溶液配制第93-95页
文献综述:鞭毛蛋白作为疫苗佐剂和载体的应用第95-103页
 参考文献第100-103页
个人简历第103-104页
致谢第104页

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