主要缩略词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-15页 |
前言 | 第15-22页 |
第一章 基于鞭毛蛋白佐剂的重组鼠疫抗原的构建与评价 | 第22-51页 |
第一节 FliCdel-F1mut-V的构建及重组表达 | 第22-46页 |
1. 材料与方法 | 第22-33页 |
·材料 | 第22-24页 |
·方法 | 第24-33页 |
2. 结果 | 第33-45页 |
·FliCdel的基因设计 | 第33-34页 |
·FliCdel的基因克隆与测序 | 第34-35页 |
·F1mut-V的克隆 | 第35-36页 |
·FliCdel-F1mut-V的克隆 | 第36-38页 |
·FliCdel与FliCdel-F1mut-V的诱导表达与SDS-PAGE | 第38-40页 |
·FliCdel的Western blotting分析 | 第40页 |
·FliCdel与FliCdel-F1mut-V的纯化 | 第40-41页 |
·FliCdel-F1mut-V的Western blotting分析 | 第41-42页 |
·FliCdel-F1mut-V的N端测序 | 第42-45页 |
3. 讨论 | 第45-46页 |
第二节 FliCdel-F1mut-V的免疫保护评价 | 第46-51页 |
1. 材料与方法 | 第46-47页 |
·材料 | 第46页 |
·方法 | 第46-47页 |
2. 结果 | 第47-50页 |
·FliCdel-F1mut-V诱导小鼠产生抗原特异性抗体 | 第47-49页 |
·FliCdel-F1mut-V能够保护小鼠对抗鼠疫强毒株的攻毒 | 第49-50页 |
3. 讨论 | 第50-51页 |
第二章 基于鞭毛蛋白佐剂的鼠疫炭疽联合疫苗的构建与初步评价 | 第51-73页 |
第一节 FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的构建及重组表达 | 第51-63页 |
1. 材料与方法 | 第51-56页 |
·材料 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-56页 |
2. 结果 | 第56-62页 |
·pET32a-FliCdel-PAloop2 的克隆 | 第56-57页 |
·pET32a-F1mut-V-linker-PAloop2 原核表达质粒的构建 | 第57-58页 |
·FliCdel-PAloop2 和FliCdel-F1mut-V-PAloop2 诱导表达与可溶性分析 | 第58-59页 |
·FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的纯化 | 第59-60页 |
·FliCdel-PAloop2 包涵体的纯化 | 第60页 |
·FliCdel-PAloop2 和FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的免疫印迹分析 | 第60-61页 |
·FliCdel-PAloop2 和FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的ELISA分析 | 第61-62页 |
3. 讨论 | 第62-63页 |
第二节 FliCdel-F1mut-V-PAloop2 的初步免疫保护评价 | 第63-73页 |
1. 材料与方法 | 第63-65页 |
·材料 | 第63页 |
·方法 | 第63-65页 |
2. 结果 | 第65-72页 |
·FliCdel-PAloop2 和FliCdel-F1mut-V-PAloop2 在大鼠模型上诱导产生PA特异性抗体 | 第65-66页 |
·FliCdel的佐剂效应 | 第66-67页 |
·小鼠产生PA的特异性抗体 | 第67-68页 |
·小鼠产生炭疽毒素中和性抗体 | 第68-69页 |
·小鼠的炭疽毒素攻毒 | 第69-70页 |
·FliCdel-F1mut-V-PAloop2 诱导小鼠产生F1、V特异性抗体 | 第70-72页 |
3. 讨论 | 第72-73页 |
第三章 鼠疫菌F1 抗原中和表位的筛选 | 第73-86页 |
1. 材料与方法 | 第73-79页 |
·材料 | 第73-74页 |
·方法 | 第74-79页 |
2. 结果 | 第79-84页 |
·F2H5 识别的噬菌体克隆的筛选 | 第79页 |
·9株与F2H5 特异性结合的噬菌体单克隆 | 第79-80页 |
·噬菌体DNA测序结果 | 第80-81页 |
·F1 抗原竞争抑制噬菌体克隆与F2H5 结合 | 第81页 |
·FliCdel-F1 表位重组表达质粒的构建 | 第81-82页 |
·重组蛋白的可溶性表达与纯化 | 第82-83页 |
·FliCdel-1、FliCdel-14 的Western blotting与ELISA分析 | 第83-84页 |
3. 讨论 | 第84-86页 |
结论 | 第86-87页 |
有待完善之处 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-93页 |
附录 主要溶液配制 | 第93-95页 |
文献综述:鞭毛蛋白作为疫苗佐剂和载体的应用 | 第95-103页 |
参考文献 | 第100-103页 |
个人简历 | 第103-104页 |
致谢 | 第104页 |