| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-24页 |
| ·兔出血症病毒概述 | 第15-16页 |
| ·杯状病毒与宿主相互作用研究进展 | 第16-19页 |
| ·杯状病毒概述 | 第16-17页 |
| ·杯状病毒受体 | 第17-19页 |
| ·病毒与宿主相互作用研究技术 | 第19-23页 |
| ·双杂交系统 | 第19-20页 |
| ·免疫共沉淀（Co-IP） | 第20页 |
| ·串联亲和纯化技术 | 第20-21页 |
| ·GST-Pulldown技术 | 第21-22页 |
| ·双分子荧光互补技术（BiFC） | 第22页 |
| ·其他蛋白质相互作用研究技术 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 稳定表达RHDV VPg蛋白RK-13细胞系的构建 | 第24-34页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·质粒、细胞系和菌种 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·主要试剂及抗体 | 第25页 |
| ·主要缓冲液及试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·研究方法 | 第26-30页 |
| ·慢病毒包装质粒pLOV-3Flag-VPg的构建 | 第26-27页 |
| ·制备含VPg基因的重组慢病毒样颗粒 | 第27页 |
| ·表达VPg基因的RK-13细胞系的制备及阳性细胞株的筛选 | 第27-28页 |
| ·VPg基因组插入水平检测以及mRNA转录水平检测 | 第28-29页 |
| ·VPg蛋白表达水平Western blot检测以及间接免疫荧光（IFA）检测 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-33页 |
| ·p LOV-3Flag-VPg重组质粒构建与鉴定 | 第30-31页 |
| ·稳定表达VPg的RK-13细胞筛选 | 第31页 |
| ·细胞基因组中外源基因以及其转录mRNA的检测 | 第31页 |
| ·Western blot检测和间接免疫荧光（IFA）分析外源基因蛋白表达 | 第31-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 人工构建能在细胞中增殖的兔出血症病毒 | 第34-46页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·质粒和细胞系 | 第35页 |
| ·主要仪器设备、试剂及抗体 | 第35-36页 |
| ·主要缓冲液及试剂的配制 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·构建含RHDVRGD突变株全基因的pRHDVRGD重组质粒 | 第36页 |
| ·RHDVRGD突变株的拯救 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR鉴定RHDVRGD突变株 | 第37页 |
| ·间接免疫荧光IFA鉴定RHDVRGD突变株 | 第37页 |
| ·Western blot鉴定RHDVRGD突变株 | 第37页 |
| ·RHDVRGD突变株负染透射电镜观察 | 第37页 |
| ·RHDVRGD突变株动物回归实验 | 第37-38页 |
| ·RHDVRGD突变株免疫保护实验 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-44页 |
| ·pRHDVRGD重组质粒构建与鉴定 | 第38-39页 |
| ·RHDVRGD病毒突变株拯救观察结果 | 第39-40页 |
| ·RHDVRGD病毒突变株RT-PCR鉴定 | 第40-41页 |
| ·RHDVRGD病毒突变株IFA鉴定 | 第41页 |
| ·RHDVRGD病毒突变株Western blot鉴定 | 第41-42页 |
| ·病毒突变株RHDVRGD透射电镜观察 | 第42页 |
| ·RHDVRGD突变株动物回归实验结果 | 第42-44页 |
| ·RHDVRGD突变株免疫保护实验结果 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 VPg在兔出血症病毒翻译起始阶段的功能研究 | 第46-65页 |
| ·材料和方法 | 第47-56页 |
| ·病毒cDNA与细胞系 | 第47页 |
| ·抗体与质粒 | 第47页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第47页 |
| ·主要缓冲液及试剂的配制 | 第47页 |
| ·质粒构建 | 第47-48页 |
| ·质粒DNA转染方法 | 第48-49页 |
| ·荧光素酶活性检测 | 第49-50页 |
| ·qRT-PCR分析 | 第50-51页 |
| ·哺乳动物双杂交实验 | 第51页 |
| ·免疫共沉淀（Co-IP）实验 | 第51页 |
| ·双分子荧光互补（BiFC）实验 | 第51-52页 |
| ·siRNA干扰eIF4E功能实验 | 第52-53页 |
| ·4EBP1影响RHDV翻译实验 | 第53页 |
| ·RNA电泳迁移率变动分析(REMSA) 实验 | 第53-56页 |
| ·数据统计与分析 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-64页 |
| ·VPg与RHDV基因组RNA 5′-末端序列相互作用 | 第56-57页 |
| ·VPg蛋白为RHDV的翻译所必需 | 第57-59页 |
| ·RHDV的VPg蛋白与翻译起始因子e IF4E相互作用 | 第59-62页 |
| ·VPg-eIF4E相互作用为RHDV翻译所必需 | 第62-63页 |
| ·干扰eIF4E基因对RHDV翻译的影响 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| 第五章 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |
