第一部分 核酸适配体修饰的铁纳米颗粒靶向性的提升NK对MUC1阳性肿瘤细胞的免疫杀伤作用 | 第1-43页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 前言 | 第10-17页 |
1. MUC1阳性肿瘤的治疗手段 | 第10-11页 |
2. MUC1蛋白 | 第11-12页 |
3. 免疫治疗及自然杀伤细胞 | 第12页 |
4. 核酸适配体 | 第12-13页 |
5. 纳米技术在肿瘤治疗中的应用 | 第13-14页 |
6. 选题依据以及意义 | 第14页 |
7. 研究策略以及技术路线 | 第14-15页 |
8. 技术路线 | 第15-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
1. 主要材料和试剂 | 第17-20页 |
·人外周血来源 | 第17页 |
·细胞系 | 第17页 |
·顺磁性氧化铁纳米颗粒 | 第17页 |
·单链寡核苷酸和引物 | 第17-18页 |
·细胞培养试剂 | 第18-19页 |
·试剂盒 | 第19页 |
·化学试剂 | 第19页 |
·溶液的配置 | 第19-20页 |
·细胞培养耗材 | 第20页 |
2. 实验仪器和设备 | 第20-21页 |
3. 实验方法 | 第21-27页 |
·人外周血单个核细胞(PBMC)的分离 | 第21页 |
·细胞培养 | 第21页 |
·MUC1-NP-CD16复合物的构建 | 第21-22页 |
·核酸适配体的扩增 | 第21-22页 |
·构建两亲性MUC1-NP-CD16复合物 | 第22页 |
·MUC1-NP-CD16的表征检测 | 第22-23页 |
·利用激光共聚焦显微镜评估MUC1-NP-CD16复合物的形态 | 第22页 |
·利用动态光散射粒径仪评估MUC1-NP-CD16复合物的大小 | 第22-23页 |
·流式检测 | 第23-24页 |
·流式检测MUC1和CD16核酸适配体的亲和特性 | 第23页 |
·流式检测MUC1和CD16核酸适配体是否连接到铁纳米粒上 | 第23-24页 |
·相差显微镜成像分析检测 | 第24页 |
·竞争实验 | 第24页 |
·免疫杀伤实验 | 第24-26页 |
·MUC1-NP-CD16影响NK细胞对MUC1阳性肺癌细胞A549的免疫杀伤的研究 | 第24-25页 |
·MUC1-NP-CD16影响NK细胞对MUC1阴性乳腺癌细胞MD-MBA-231的免疫杀伤的研究 | 第25-26页 |
·统计学处理 | 第26-27页 |
第三章 实验结果与分析 | 第27-38页 |
1. 两亲性纳米粒的构建 | 第27-28页 |
2. PCR制备核酸适配体 | 第28-29页 |
3. 核酸适配体特异性的检测 | 第29-30页 |
4. 核酸适配体同纳米粒的连接 | 第30-32页 |
5. 两亲性纳米粒的表征 | 第32-33页 |
6. 核酸适配体修饰的纳米颗粒能够结合靶细胞 | 第33-34页 |
7. 两亲性纳米颗粒可以募集NK到A549细胞附近 | 第34-35页 |
8. 两亲性纳米颗粒影响NK免疫杀伤作用的研究 | 第35-38页 |
第四章 讨论与结论 | 第38-40页 |
1. 讨论 | 第38-39页 |
2. 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-43页 |
第二部分 核酸适配体修饰的铁纳米粒对人胶质瘤细胞的靶向热疗效应 | 第43-71页 |
摘要 | 第43-45页 |
Abstract | 第45-47页 |
第一章 前言 | 第47-52页 |
1. 神经胶质瘤的治疗 | 第47-48页 |
2. 表皮生长因子受体突变体Ⅲ型 | 第48页 |
3. 肿瘤热疗 | 第48-49页 |
4. 课题设计 | 第49-50页 |
5. 研究策略 | 第50页 |
6. 技术路线 | 第50-52页 |
第二章 材料与方法 | 第52-58页 |
1. 主要材料和试剂 | 第52-54页 |
2. 实验仪器和设备 | 第54-55页 |
3. 实验方法 | 第55-58页 |
·细胞培养 | 第55页 |
·Apt-NP的构建 | 第55-56页 |
·流式检测 | 第56页 |
·表征检测 | 第56页 |
·吸光度值检测 | 第56页 |
·Apt-NP热疗效率检测 | 第56-57页 |
·统计学分析 | 第57-58页 |
第三章 实验结果与分析 | 第58-66页 |
1. PCR制备核酸适配体 | 第58-59页 |
2. 核酸适配体的结合性质分析 | 第59-60页 |
3. Apt-NP的构建 | 第60-62页 |
4. Apt-NP的尺寸表征 | 第62页 |
5. Apt-NP特异性地结合人胶质瘤U251细胞 | 第62-64页 |
6. Apt-NP对热疗效果的靶向调节作用 | 第64-66页 |
第四章 讨论与结论 | 第66-68页 |
1. 讨论 | 第66-67页 |
2. 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-71页 |
附录一 英文缩略词汇表 | 第71-73页 |
附录二 个人简历 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-76页 |