摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第1章 前言 | 第12-21页 |
·三氯乙烯简介 | 第12-13页 |
·三氯乙烯的生物毒性 | 第12-13页 |
·SET蛋白综述 | 第13-14页 |
·表观遗传调控 | 第14-18页 |
·DNA甲基化 | 第15-16页 |
·mi RNA调控 | 第16-18页 |
·课题研究基础、目的意义及实验方案 | 第18-20页 |
·课题研究基础 | 第18页 |
·课题研究的目的意义 | 第18-19页 |
·课题研究方案 | 第19-20页 |
·课题研究的创新点 | 第20-21页 |
第2章 材料与方法 | 第21-51页 |
·实验材料 | 第21-24页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·主要试剂 | 第22-23页 |
·细胞及细胞受试物 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-51页 |
·培养基和常用试剂的配制 | 第24-25页 |
·细胞培养和染毒 | 第25页 |
·细胞DNA提取 | 第25-26页 |
·DNA的亚硫酸氢盐修饰 | 第26-30页 |
·PCR扩增 | 第30-32页 |
·基因克隆和测序 | 第32-34页 |
·统计检验分析 | 第34页 |
·获得与SET基因关联的目的mi RNA | 第34-37页 |
·获得mi RNA初级转录本Pri-mi RNA基因产物 | 第37-42页 |
·p CI Mamma Lian Expression Vector质粒载体的双酶切及回收 | 第42-43页 |
·p CI Mamma Lian Expression Vector质粒载体与Pri-mi RNA基因产物的连接 | 第43页 |
·连接产物的转化 | 第43页 |
·Pri-mi RNA重组质粒载体的鉴定、扩增及提取 | 第43-45页 |
·获得含绿色荧光基因的Pri-mi RNA基因序列 | 第45-47页 |
·双酶切p CDH-CMV-MCS-EF1-Puro病毒载体 | 第47-48页 |
·双酶切后的p CDH-CMV-MCS-EF1-Puro病毒载体与Zsgreen+Pri-mi R-21/23A/20A/199B产物的连接 | 第48页 |
·连接产物的转化 | 第48-49页 |
·Pri-mi RNA重组病毒载体的鉴定、扩增及提取 | 第49页 |
·转染Pri-mi RNA重组病毒载体进行病毒包装 | 第49页 |
·病毒滴度检测与浓缩 | 第49-50页 |
·病毒上清转染L-02肝细胞 | 第50页 |
·mi RNA重组病毒载体在肝细胞中的表达鉴定 | 第50-51页 |
第3章 结果与分析 | 第51-80页 |
·TCE作用下肝细胞中SET基因启动子区甲基化检测分析 | 第51-70页 |
·DNA完整性检测 | 第51页 |
·SET基因五段启动片段的甲基化位点测序结果 | 第51-66页 |
·SET基因启动子区甲基化水平分析 | 第66页 |
·SET基因启动子区甲基化位点分析 | 第66-69页 |
·SET基因启动子区差异甲基化及其结合转录因子分析 | 第69-70页 |
·TCE作用下肝细胞中SET相关的mi RNA调控的初步研究 | 第70-80页 |
·候选mi RNAs的相对定量检测分析 | 第70-74页 |
·Pri-mi RNA质粒载体的鉴定 | 第74-76页 |
·Pri-mi RNA重组病毒载体的鉴定 | 第76-78页 |
·Pri-mi RNA重组病毒载体的病毒上清转染L-02肝细胞及其表达鉴定 | 第78-80页 |
第4章 讨论与结论 | 第80-86页 |
·TCE作用下肝细胞中SET基因启动子区甲基化水平检测分析 | 第80-82页 |
·SET基因启动子区甲基化水平检测分析 | 第80-82页 |
·TCE作用下肝细胞中SET相关的mi RNAs调控的初步研究 | 第82-86页 |
·生物信息学筛选mi RNAs | 第82-83页 |
·SET相关的mi RNA调控及mi RNA治疗展望 | 第83-86页 |
·结论 | 第86页 |
课题展望 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-96页 |
附录:英文缩略词表 | 第96-97页 |
综述 | 第97-109页 |
参考文献 | 第103-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
攻读硕士学位期间取得的成果 | 第110-112页 |