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TCE致L-02肝细胞毒性中SET相关的表现遗传调控机制的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第1章 前言第12-21页
   ·三氯乙烯简介第12-13页
     ·三氯乙烯的生物毒性第12-13页
   ·SET蛋白综述第13-14页
   ·表观遗传调控第14-18页
     ·DNA甲基化第15-16页
     ·mi RNA调控第16-18页
   ·课题研究基础、目的意义及实验方案第18-20页
     ·课题研究基础第18页
     ·课题研究的目的意义第18-19页
     ·课题研究方案第19-20页
   ·课题研究的创新点第20-21页
第2章 材料与方法第21-51页
   ·实验材料第21-24页
     ·主要仪器设备第21-22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·细胞及细胞受试物第23-24页
   ·实验方法第24-51页
     ·培养基和常用试剂的配制第24-25页
     ·细胞培养和染毒第25页
     ·细胞DNA提取第25-26页
     ·DNA的亚硫酸氢盐修饰第26-30页
     ·PCR扩增第30-32页
     ·基因克隆和测序第32-34页
     ·统计检验分析第34页
     ·获得与SET基因关联的目的mi RNA第34-37页
     ·获得mi RNA初级转录本Pri-mi RNA基因产物第37-42页
     ·p CI Mamma Lian Expression Vector质粒载体的双酶切及回收第42-43页
     ·p CI Mamma Lian Expression Vector质粒载体与Pri-mi RNA基因产物的连接第43页
     ·连接产物的转化第43页
     ·Pri-mi RNA重组质粒载体的鉴定、扩增及提取第43-45页
     ·获得含绿色荧光基因的Pri-mi RNA基因序列第45-47页
     ·双酶切p CDH-CMV-MCS-EF1-Puro病毒载体第47-48页
     ·双酶切后的p CDH-CMV-MCS-EF1-Puro病毒载体与Zsgreen+Pri-mi R-21/23A/20A/199B产物的连接第48页
     ·连接产物的转化第48-49页
     ·Pri-mi RNA重组病毒载体的鉴定、扩增及提取第49页
     ·转染Pri-mi RNA重组病毒载体进行病毒包装第49页
     ·病毒滴度检测与浓缩第49-50页
     ·病毒上清转染L-02肝细胞第50页
     ·mi RNA重组病毒载体在肝细胞中的表达鉴定第50-51页
第3章 结果与分析第51-80页
   ·TCE作用下肝细胞中SET基因启动子区甲基化检测分析第51-70页
     ·DNA完整性检测第51页
     ·SET基因五段启动片段的甲基化位点测序结果第51-66页
     ·SET基因启动子区甲基化水平分析第66页
     ·SET基因启动子区甲基化位点分析第66-69页
     ·SET基因启动子区差异甲基化及其结合转录因子分析第69-70页
   ·TCE作用下肝细胞中SET相关的mi RNA调控的初步研究第70-80页
     ·候选mi RNAs的相对定量检测分析第70-74页
     ·Pri-mi RNA质粒载体的鉴定第74-76页
     ·Pri-mi RNA重组病毒载体的鉴定第76-78页
     ·Pri-mi RNA重组病毒载体的病毒上清转染L-02肝细胞及其表达鉴定第78-80页
第4章 讨论与结论第80-86页
   ·TCE作用下肝细胞中SET基因启动子区甲基化水平检测分析第80-82页
     ·SET基因启动子区甲基化水平检测分析第80-82页
   ·TCE作用下肝细胞中SET相关的mi RNAs调控的初步研究第82-86页
     ·生物信息学筛选mi RNAs第82-83页
     ·SET相关的mi RNA调控及mi RNA治疗展望第83-86页
   ·结论第86页
课题展望第86-87页
参考文献第87-96页
附录:英文缩略词表第96-97页
综述第97-109页
 参考文献第103-109页
致谢第109-110页
攻读硕士学位期间取得的成果第110-112页

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