| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 中英文对照词表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-29页 |
| ·实验主要试剂和材料 | 第13-15页 |
| ·实验主要设备和仪器 | 第15页 |
| ·实验主要试剂的配制 | 第15-16页 |
| ·pFC14A-KPNA2 质粒的构建 | 第16-20页 |
| ·KPNA2 基因mRNA序列的引物设计 | 第16-17页 |
| ·提取HepG2 细胞总RNA | 第17页 |
| ·RNA逆转录成cDNA | 第17页 |
| ·PCR扩增KPNA2 基因 | 第17-18页 |
| ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳回收 | 第18页 |
| ·回收产物和pFC14A质粒的双酶切，回收以及连接 | 第18-19页 |
| ·质粒的转化，筛选，提取和鉴定 | 第19-20页 |
| ·pcDNA3.1-HBsAg质粒的构建 | 第20页 |
| ·pcDNA3.1-HBsAgt质粒的构建 | 第20-21页 |
| ·点突变引物的设计 | 第20页 |
| ·PCR反应程序 | 第20-21页 |
| ·pFC14A-KPNA2 质粒转染HepG2 细胞 | 第21-22页 |
| ·pcDNA3.1-HBsAg质粒转染HepG2 细胞 | 第22-23页 |
| ·HepG2 细胞免疫荧光实验 | 第23页 |
| ·p-KPNA2、p-HBsAg、p-HBsAgt三种质粒的共转染 | 第23-24页 |
| ·western blot检测HepG2、LO2 和 293T细胞内c-Myc表达水平 | 第24-26页 |
| ·细胞中总蛋白的提取 | 第24-26页 |
| ·RTFQ-PCR检测LO2 细胞中c-Myc的mRNA表达水平 | 第26-28页 |
| ·RNA提取 | 第26页 |
| ·逆转录反应 | 第26-27页 |
| ·荧光定量PCR反应体系和程序 | 第27-28页 |
| ·数据处理 | 第28-29页 |
| 第3章 结果 | 第29-43页 |
| ·成功构建pFC14A-KPNA2 质粒 | 第29-32页 |
| ·pFC14A-KPNA2 质粒酶切结果鉴定 | 第29页 |
| ·pFC14A-KPNA2 质粒测序结果鉴定 | 第29-32页 |
| ·成功构建pcDNA3.1-HBsAg质粒 | 第32-35页 |
| ·pcDNA3.1-HBsAg质粒双酶切鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·pcDNA3.1-HBsAg质粒测序鉴定结果 | 第33-35页 |
| ·成功构建pcDNA3.1-HBsAgt质粒 | 第35-36页 |
| ·pcDNA3.1-HBsAgt质粒双酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·pcDNA3.1-HBsAgt质粒测序鉴定结果 | 第36页 |
| ·pFC14A-KPNA2 质粒转染HepG2 细胞 | 第36-38页 |
| ·pcDNA3.1-HBsAg质粒转染HepG2 细胞 | 第38-39页 |
| ·c-Myc在HepG2 细胞中的表达水平 | 第39页 |
| ·c-Myc在LO2 细胞中的表达水平 | 第39-40页 |
| ·c-Myc在 293T细胞中的表达水平 | 第40-41页 |
| ·LO2 细胞中p-HBsAg组、p-HBsAgt组和p-HBsAgt+p-KPNA2 组的c-Myc的mRNA表达水平 | 第41-42页 |
| ·p-HBsAgt对不同细胞中c-Myc的表达影响 | 第42-43页 |
| 第4章 讨论 | 第43-46页 |
| 第5章 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 综述 | 第51-58页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
