| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 缩略词 | 第18-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-30页 |
| 1 木奈果实褐变机制的研究进展 | 第19-20页 |
| ·木奈果实褐变症状及定义 | 第19-20页 |
| ·木奈果实褐变生理及分子研究进展 | 第20页 |
| 2 农产品酶促褐变机制的研究进展 | 第20-23页 |
| ·褐变发生的条件 | 第20-22页 |
| ·底物（酚类物质） | 第20-21页 |
| ·果实褐变发生的相关酶类 | 第21-22页 |
| ·氧 | 第22页 |
| ·农产品酶促褐变的基因调控研究进展 | 第22-23页 |
| 3 影响果实酶促褐变的因素 | 第23-27页 |
| ·采前因素 | 第23-24页 |
| ·果实大小与成熟度 | 第24页 |
| ·栽植条件与树体营养 | 第24页 |
| ·采后因素 | 第24-27页 |
| ·机械损伤 | 第24-25页 |
| ·冷害 | 第25页 |
| ·气体伤害 | 第25-26页 |
| ·乙烯 | 第26-27页 |
| ·光线 | 第27页 |
| 4 本研究采用的均一化全长 cDNA 文库构建策略 | 第27-29页 |
| ·均一化全长 cDNA 文库构建的技术流程 | 第27-28页 |
| ·均一化全长 cDNA 文库在分离植物基因中的应用 | 第28-29页 |
| 5 本试验研究目的及意义 | 第29-30页 |
| 第二章 木奈褐变果实均一化全长 cDNA 文库的构建及随机 EST 序列初步分析 | 第30-40页 |
| 1 材料与方法 | 第30-32页 |
| ·植物材料与主要试剂 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·木奈褐变果肉总 RNA 的提取 | 第30页 |
| ·cDNA 第一链合成和 LD-PCR 扩增 | 第30-31页 |
| ·cDNA 进行均一化处理 | 第31页 |
| ·均一化全长 cDNA 的纯化与回收 | 第31页 |
| ·cDNA 与 pBluescript Ⅱ质粒连接、转化、克隆和测序 | 第31-32页 |
| ·序列测定及分析 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-37页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第32页 |
| ·双链 cDNA 的合成与 LD-PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·均一化处理效果检测 | 第33-34页 |
| ·cDNA 文库的质量评价 | 第34页 |
| ·cDNA 文库测序结果分析 | 第34-37页 |
| ·ESTs 长度及其分析 | 第34页 |
| ·ESTs 序列分析与功能注释 | 第34-37页 |
| 3 讨论 | 第37-40页 |
| ·cDNA 文库构建技术改进 | 第37-38页 |
| ·cDNA 文库中 ESTs 序列分析 | 第38-40页 |
| 第三章 木奈果实花青素合成酶基因（PsANS）和苯丙氨酸解氨酶基因（PsPAL）的分离与表达分析 | 第40-54页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| ·植物材料与处理 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-43页 |
| ·PsANS 基因和 PsPAL 基因的分离与序列分析 | 第41-42页 |
| ·PsANS 基因和 PsPAL 基因组 DNA 序列的扩增 | 第42页 |
| ·PAL 活性测定 | 第42页 |
| ·PsANS 原核表达载体构建及在大肠杆菌 BL21 菌株中的表达 | 第42-43页 |
| ·PsPAL 基因在木奈果实不同发育时期和采后果实在生物和非生物胁迫处理下的表达分析 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-50页 |
| ·PsANS 和 PsPAL 基因 cDNA 和 DNA 序列的获得与分析 | 第43-47页 |
| ·PAL 活性变化 | 第47-48页 |
| ·PsANS 的原核表达分析 | 第48-49页 |
| ·PsPAL 在木奈果实不同生长发育时期的表达模式分析 | 第49页 |
| ·PsPAL 在木奈果实采后各种胁迫处理下的表达模式分析 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-54页 |
| ·PsANS 基因的克隆与序列分析 | 第50-51页 |
| ·PsPAL 基因的克隆及序列分析 | 第51-52页 |
| ·PsPAL 基因的表达模式分析 | 第52-54页 |
| 第四章 三个膨胀素基因在木奈果实生长发育及采后各种胁迫下的表达分析 | 第54-70页 |
| 1 材料与方法 | 第55-57页 |
| ·植物材料与方法 | 第55页 |
| ·试验方法 | 第55-57页 |
| ·3 个膨胀素基因的分离与序列分析 | 第55-56页 |
| ·3 个膨胀素基因组 DNA 序列的扩增 | 第56页 |
| ·3 个膨胀素基因启动子的分离与序列分析 | 第56-57页 |
| ·3 个膨胀素基因在木奈叶片和果实中的表达模式分析 | 第57页 |
| ·3 个膨胀素基因在木奈果实不同生长发育时期和采后各种生物胁迫和非生物胁迫下的表达分析 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-67页 |
| ·3 个膨胀素基因的分离与序列分析 | 第57-61页 |
| ·3 个膨胀素基因基因组序列分析 | 第61页 |
| ·3 个膨胀素基因启动子序列克隆与分析 | 第61-62页 |
| ·3 个膨胀素基因在木奈叶片和果实中的表达模式分析 | 第62-63页 |
| ·3 个膨胀素基因在木奈果实不同生长发育时期的表达分析 | 第63页 |
| ·3 个膨胀素基因在木奈果实机械损伤褐变过程中的表达模式分析 | 第63-65页 |
| ·3 个膨胀素基因在木奈果实采后各种非生物胁迫和乙烯处理下的表达模式分析 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| ·木奈膨胀素编码一个多基因家族 | 第67页 |
| ·木奈PsEXP 基因的内含子结构分析 | 第67-68页 |
| ·木奈PsEXP 基因的表达模式分析 | 第68页 |
| ·木奈PsEXP 基因的表达可能受各种因素的调控 | 第68-70页 |
| 第五章 木奈果实 NAC 转录因子的分离与表达分析 | 第70-86页 |
| 1 材料与方法 | 第73-76页 |
| ·植物材料与处理 | 第73页 |
| ·试验方法 | 第73-76页 |
| ·NAC 基因的分离与序列分析 | 第73-74页 |
| ·载体构建 | 第74-75页 |
| ·亚细胞定位分析 | 第75页 |
| ·瞬间表达分析 | 第75页 |
| ·转录激活活性分析 | 第75页 |
| ·PsNAC 基因启动子的分离与序列分析 | 第75页 |
| ·PsNAC 基因表达模式分析 | 第75-76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-83页 |
| ·木奈NAC 基因全长 cDNA 的分离与序列分析 | 第76页 |
| ·木奈NAC 基因推导的蛋白结构域及系统进化分析 | 第76-79页 |
| ·木奈PsNAC 与 NAC 识别元件 NACRS 的瞬间表达分析 | 第79页 |
| ·木奈PsNAC 的亚细胞定位分析 | 第79页 |
| ·木奈PsNAC 在酵母细胞中的转录激活活性分析 | 第79-80页 |
| ·木奈PsNAC 基因启动子序列克隆与分析 | 第80-81页 |
| ·PsNAC 基因在木奈果实采后的表达模式分析 | 第81-83页 |
| ·PsNAC 基因在木奈褐变果和未褐变果中以及机械损伤后的表达模式 | 第81-82页 |
| ·PsNAC 基因在木奈采后各种非生物胁迫和乙烯处理下的表达模式分析 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-86页 |
| ·PsNAC 蛋白的结构特征分析 | 第83-84页 |
| ·PsNAC 基因可能与木奈果实衰老相关，在褐变过程中发挥着作用 | 第84-86页 |
| 第六章 木奈果实 WRKY 类转录因子的分离与表达分析 | 第86-100页 |
| 1 材料与方法 | 第89-91页 |
| ·植物材料与处理 | 第89页 |
| ·试验方法 | 第89-91页 |
| ·WRKY 基因的分离与序列分析 | 第89-90页 |
| ·载体构建 | 第90页 |
| ·亚细胞定位分析 | 第90页 |
| ·瞬间表达分析 | 第90页 |
| ·转录激活活性分析 | 第90-91页 |
| ·木奈WRKY 基因启动子的分离与序列分析 | 第91页 |
| ·木奈WRKY 基因表达模式分析 | 第91页 |
| 2 结果与分析 | 第91-97页 |
| ·木奈WRKY 基因全长 cDNA 的分离与序列分析 | 第91页 |
| ·木奈WRKY 基因系统进化分析 | 第91-94页 |
| ·木奈PsWRKY 与 W 盒特异性结合分析 | 第94页 |
| ·木奈PsWRKY 的亚细胞定位分析 | 第94-95页 |
| ·木奈PsWRKY 的在酵母细胞中的转录激活活性分析 | 第95页 |
| ·木奈PsWRKY 基因启动子序列克隆与分析 | 第95-96页 |
| ·PsWRKY 基因在木奈果实采后的表达模式分析 | 第96-97页 |
| ·PsWRKY 基因在木奈褐变果和未褐变果中以及机械损伤后的表达模式 | 第96-97页 |
| ·PsWRKY 基因在木奈采后各种非生物胁迫和乙烯处理下的表达模式分析 | 第97页 |
| 3 讨论 | 第97-100页 |
| ·首次从木奈物种中分离了 WRKY 转录因子 | 第97-98页 |
| ·WRKY 类转录因子参与调控植物植物生长发育及次生代谢途径 | 第98页 |
| ·WRKY 类转录因子参与植物非生物胁迫 | 第98-100页 |
| 第七章 木奈生长发育过程中和受机械损伤后 PPO 基因的表达 | 第100-106页 |
| 1 材料与方法 | 第100-101页 |
| ·植物材料与处理 | 第100页 |
| ·试验方法 | 第100-101页 |
| ·木奈成熟叶片均一化全长 cDNA 文库构建 | 第100页 |
| ·PPO 基因的筛选与序列分析 | 第100页 |
| ·PPO 基因在生长发育和受机械损伤后的表达模式分析 | 第100-101页 |
| ·PPO 活性的测定 | 第101页 |
| 2 结果与分析 | 第101-104页 |
| ·PsPP02 基因的分离与序列分析 | 第101-103页 |
| ·木奈不同的生长发育时期 PPO 基因的表达 | 第103页 |
| ·木奈成熟果实受机械损伤后 PPO 基因的表达和 PPO 酶活性的变化 | 第103-104页 |
| 3 讨论 | 第104-106页 |
| 第八章 结论与展望 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-129页 |
| 附录 | 第129-140页 |
| 附录 1 木奈苯丙氨酸解氨酶（PAL）基因 cDNA 全长序列及推定的氨基酸序列 | 第129-131页 |
| 附录 2 木奈PsEXP1 基因 cDNA 全长序列及推定的氨基酸序列以及启动子序列和内含子序列 | 第131-133页 |
| ·木奈PsEXP1 基因 cDNA 全长序列及推定的氨基酸序列 | 第131-132页 |
| ·木奈PsEXP1 基因启动子序列 | 第132页 |
| ·木奈PsEXP1 基因内含子序列 | 第132-133页 |
| 附录 3 木奈PsEXP2 基因 cDNA 全长序列及推定的氨基酸序列以及启动子序列和内含子序列 | 第133-135页 |
| ·木奈PsEXP2 基因 cDNA 全长序列及推定的氨基酸序列 | 第133-134页 |
| ·木奈PsEXP2 基因启动子序列 | 第134页 |
| ·木奈PsEXP2 基因内含子序列 | 第134-135页 |
| 附录4 木奈PsEXP3基因cDNA全长序列及推定的氨基酸序列以及启动子序列和内含子序列 | 第135-137页 |
| ·木奈PsEXP3 基因 cDNA 全长序列及推定的氨基酸序列 | 第135-136页 |
| ·木奈PsEXP3 基因启动子序列 | 第136页 |
| ·木奈PsEXP3 基因内含子序列 | 第136-137页 |
| 附录 5 木奈PsNAC 基因 cDNA 全长序列及推定的氨基酸序列以及启动子序列 | 第137-139页 |
| ·木奈PsNAC 基因 cDNA 全长序列及推定的氨基酸序列 | 第137-138页 |
| ·木奈PsNAC 基因启动子序列 | 第138-139页 |
| 附录 6 木奈PsWRKY 基因启动子序列 | 第139-140页 |
| 博士就读期间发表论文情况 | 第140-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
