| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-15页 |
| 縮略词 | 第15-16页 |
| 第一章 研究背景 | 第16-32页 |
| 前言 | 第16页 |
| ·RA发病机制研究进展 | 第16-24页 |
| ·RA动物模型进展 | 第24-26页 |
| ·RA临床治疗 | 第26-27页 |
| ·JAM-A的结构与功能 | 第27-31页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第31-32页 |
| 第二章 JAMs蛋白家族在健康人淋巴细胞的表达情况 | 第32-46页 |
| 前言 | 第32页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·血样来源 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32页 |
| ·实验主要试剂 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-42页 |
| ·分离淋巴细胞 | 第33-34页 |
| ·分选T淋巴细胞和B淋巴细胞 | 第34-35页 |
| ·磁珠标记 | 第34页 |
| ·磁珠分选 | 第34-35页 |
| ·T淋巴细胞分选 | 第34-35页 |
| ·B淋巴细胞分选 | 第35页 |
| ·总RNA提取 | 第35-36页 |
| ·RNA浓度测定 | 第36页 |
| ·逆转录 | 第36-38页 |
| ·去除RNA样品中的基因组DNA | 第36-37页 |
| ·反转录反应 | 第37-38页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第38页 |
| ·流式细胞学 | 第38-39页 |
| ·Western blot检测JAM-A | 第39-42页 |
| ·细胞膜蛋白提取 | 第39-40页 |
| ·细胞总蛋白提取 | 第40页 |
| ·蛋白浓度测定(BCA法) | 第40页 |
| ·SDS-PAGE | 第40-42页 |
| ·结果 | 第42-44页 |
| ·Jam-a、Jam-b和Jam-c的实时荧光定量PCR | 第42页 |
| ·淋巴细胞膜和细胞质JAMs蛋白的表达 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第三章 JAM-A蛋白在RA患者淋巴细胞的表达 | 第46-53页 |
| 前言 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·血样及分组 | 第46-47页 |
| ·实验仪器 | 第47页 |
| ·实验主要试剂 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47页 |
| ·分离淋巴细胞 | 第47页 |
| ·流式细胞学 | 第47页 |
| ·统计学分析 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-52页 |
| ·健康对照组和RA组的基本情况 | 第47-48页 |
| ·健康对照组和RA组的比较 | 第48-50页 |
| ·健康对照组和RA组淋巴细胞JAM-A蛋白的比较 | 第49-50页 |
| ·健康对照组和RA组淋巴细胞数目的比较 | 第50页 |
| ·健康对照组和未治疗组的比较 | 第50-52页 |
| ·健康对照组和未治疗组淋巴细胞JAM-A蛋白的比较 | 第51页 |
| ·健康对照组和未治疗组淋巴细胞数目的比较 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第四章 JAM-A蛋白在不同治疗的RA患者淋巴细胞的表达 | 第53-65页 |
| 前言 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·血样及分组 | 第53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·实验主要试剂 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·分离淋巴细胞 | 第54页 |
| ·流式细胞学 | 第54页 |
| ·疾病评分 | 第54-55页 |
| ·统计学分析 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-63页 |
| ·RA患者治疗用药及分组 | 第55-57页 |
| ·未治疗组与单用MTX治疗组比较 | 第57-60页 |
| ·未治疗组与单用MTX治疗组外周血淋巴细胞膜JAM-A蛋白比较 | 第57-58页 |
| ·未治疗组和单用MTX治疗组淋巴细胞数目比较 | 第58-59页 |
| ·未治疗组与单用MTX治疗组疾病活动程度评分比较 | 第59-60页 |
| ·单用MTX治疗组淋巴细胞JAM-A蛋白水平与疾病活动评分的相关性分析 | 第60页 |
| ·未治疗组与其它药物治疗组的比较 | 第60-63页 |
| ·未治疗组与其它药物治疗组淋巴细胞膜JAM-A蛋白比较 | 第61-62页 |
| ·未治疗组和各个药物治疗组淋巴细胞数目的比较 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 第五章 JAM-A在关节炎小鼠的变化 | 第65-84页 |
| 前言 | 第65页 |
| ·实验材料 | 第65-66页 |
| ·实验动物 | 第65页 |
| ·实验仪器 | 第65页 |
| ·实验主要试剂 | 第65-66页 |
| ·实验方法 | 第66-72页 |
| ·实验动物分组 | 第66页 |
| ·灌胃 | 第66-67页 |
| ·关节炎小鼠模型的诱发 | 第67-68页 |
| ·配制冰乙酸溶液 | 第67页 |
| ·配制牛Ⅱ型胶原蛋白冰醋酸溶液 | 第67页 |
| ·胶原蛋白乳化 | 第67-68页 |
| ·免疫C57BL/6小鼠 | 第68页 |
| ·小鼠相关指标观察 | 第68-69页 |
| ·小鼠体重变化观察 | 第68页 |
| ·C57BL/6小鼠关节炎指数观察 | 第68-69页 |
| ·C57BL/6小鼠外周血样处理 | 第69-70页 |
| ·肝素稀释液制备 | 第69页 |
| ·小鼠血液样品采集 | 第69页 |
| ·配制红细胞裂解液(1×) | 第69-70页 |
| ·红细胞裂解 | 第70页 |
| ·流式细胞学检测 | 第70-71页 |
| ·实验时间点及技术路线说明 | 第71-72页 |
| ·统计学分析 | 第72页 |
| ·结果 | 第72-83页 |
| ·C57/BL6小鼠一般状况观察 | 第72-73页 |
| ·C57/BL6小鼠体重变化 | 第73-74页 |
| ·胶原诱导性关节炎建模成功率比较 | 第74-75页 |
| ·C57/BL6小鼠关节炎指数变化 | 第75-76页 |
| ·各组小鼠淋巴细胞JAM-A比较 | 第76-83页 |
| ·正常对照组(CON)与甲氨喋呤组(MTX)比较 | 第76-79页 |
| ·正常对照组与关节炎组比较 | 第79-80页 |
| ·胶原诱导性关节炎模型组(CIA)与甲氨喋呤治疗关节炎组(MTX+CIA)比较 | 第80-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第六章 对人淋巴细胞JAM-A的细胞实验 | 第84-96页 |
| 前言 | 第84页 |
| ·实验材料 | 第84-85页 |
| ·血样及分组 | 第84-85页 |
| ·实验仪器 | 第85页 |
| ·实验主要试剂 | 第85页 |
| ·实验方法 | 第85-90页 |
| ·淋巴细胞分离 | 第86页 |
| ·细胞培养和MTX处理细胞 | 第86页 |
| ·细胞计数 | 第86页 |
| ·MTX处理细胞 | 第86页 |
| ·淋巴细胞总RNA提取和鉴定 | 第86-87页 |
| ·淋巴细胞cDNA获取 | 第87页 |
| ·荧光实时定量PCR | 第87页 |
| ·流式细胞学 | 第87-88页 |
| ·细胞迁移试验 | 第88-89页 |
| ·MTS实验 | 第89页 |
| ·统计学分析 | 第89-90页 |
| ·结果 | 第90-95页 |
| ·MTX对淋巴细胞存活的影响 | 第90-91页 |
| ·MTX对淋巴细胞Jam-a基因表达的影响 | 第91页 |
| ·MTX对淋巴细胞JAM-A蛋白表达的影响 | 第91-93页 |
| ·RA患者与正常人淋巴细胞体外细胞迁移试验的比较 | 第93-94页 |
| ·MTX对淋巴细胞体外细胞迁移试验的影响 | 第94页 |
| ·J10.4对淋巴细胞体外细胞迁移试验的影响 | 第94-95页 |
| ·小结 | 第95-96页 |
| 第七章 讨论 | 第96-100页 |
| ·讨论 | 第96-98页 |
| ·实验存在的问题和展望 | 第98-99页 |
| ·总结 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-112页 |
| 附录1 常见溶液的配制方法 | 第112-113页 |
| 附录2：博士研究生期间论文发表和项目参与情况 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
