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大白菜BrCYP79B2/B3启动子克隆及特异性分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
1 文献综述第11-25页
   ·大白菜第11页
   ·硫代葡萄糖苷概况及其功能第11-14页
     ·硫代葡萄糖苷的化学结构第11-12页
     ·硫代葡萄糖苷合成的影响因素第12-14页
       ·基因型对硫代葡萄糖苷的影响第12页
       ·光对硫代葡萄糖苷的影响第12页
       ·温度对硫代葡萄糖苷的影响第12页
       ·水分对硫代葡萄糖苷的影响第12-13页
       ·硫、氮元素对硫代葡萄糖苷的影响第13页
       ·盐胁迫对硫代葡萄糖苷的影响第13页
       ·机械损伤和昆虫取食对硫代葡萄糖苷的影响第13页
       ·激素对硫代葡萄糖苷的影响第13-14页
   ·启动子的特征与结构第14-18页
     ·启动子特征简介第14-15页
     ·启动子的结构第15-18页
       ·核心启动元件第15-16页
       ·上游(或下游)启动元件第16-18页
   ·启动子分类第18-23页
     ·组成型启动子第18-19页
       ·来自非植物自身的组成型启动子第18-19页
       ·来自植物自身的启动子第19页
     ·组织特异性启动子第19-21页
       ·果实特异性启动子第20页
       ·茎叶特异性启动子第20-21页
       ·根特异性启动子第21页
     ·诱导型启动子第21-23页
       ·光诱导表达启动子第22页
       ·热诱导表达启动子第22页
       ·创伤诱导表达启动子第22-23页
       ·其他表达启动子第23页
   ·CKP79基因家族的研究进展第23-24页
   ·本研究的目的及意义第24-25页
2 试验材料与方法第25-43页
   ·试验材料第25页
   ·实验仪器和试剂第25-28页
   ·BrCYP79B2/B3启动子克隆及拟南芥转化第28-38页
     ·大白菜DNA提取第28页
       ·DNA提取试剂盒提取大白菜‘chiifu’总DNA第28页
       ·DNA凝胶电泳检测第28页
     ·BrCYP79B2/B3启动子的克隆第28-30页
       ·引物设计第28-29页
       ·PCR扩增第29-30页
       ·扩增产物凝胶电泳检测第30页
     ·植物克隆载体的构建第30-33页
       ·PCR产物切胶回收第30-31页
       ·目的片段与载体连接构建第31页
       ·连接产物转化大肠杆菌第31-32页
       ·单克隆菌体挑取,培养及PCR检测第32页
       ·菌液PCR凝胶电泳检测第32页
       ·启动子序列分析第32-33页
     ·表达载体的构建第33-36页
       ·质粒提取第33-34页
       ·酶切质粒DNA第34页
       ·连接并构建表达载体第34页
       ·农杆菌感受态细胞制备第34-35页
       ·冻融法转化农杆菌第35页
       ·单克隆菌体挑取,培养及PCR检测第35-36页
       ·菌液PCR凝胶电泳检测第36页
     ·转基因植株的获得第36-38页
       ·拟南芥播种及培养第36页
       ·花序侵染法转化拟南芥第36-37页
       ·筛选转基因拟南芥第37-38页
   ·转基因植株GUS组织化学染色第38-39页
     ·不同处理对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子在转基因拟南芥中表达的影响第39页
   ·qRT-PCR分析NaCl、MeJA、Kyn、AOA对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子表达变化的影响第39-43页
     ·RNA提取及检测第39-40页
       ·Trizol法提取RNA第39-40页
       ·RNA凝胶电泳检测第40页
     ·去除RNA中基因组DNA并进行反转录成为cDNA第40-41页
     ·qRT-PCR第41-43页
3 结果与分析第43-64页
   ·大白菜‘chiifu’基因组DNA提取第43页
   ·BrCYP79B2/B3启动子的克隆第43-44页
   ·启动子序列分析第44-48页
   ·启动子驱动的GUS基因植物表达载体构建第48-50页
     ·启动子载体的酶切鉴定第48-50页
     ·农杆菌中质粒鉴定第50页
   ·转基因拟南芥的获得第50-51页
   ·转基因拟南芥PCR检测第51-52页
   ·ProB_(2-1):GUS、ProB_(2-3):GUS的组织特异性分析第52-61页
     ·子叶期各启动子的组织表达模式第52-53页
     ·莲座期期各启动子的组织表达模式第53-54页
     ·抽薹开花期各启动子的组织表达模式第54-56页
     ·成熟期各启动子的组织表达模式第56-57页
     ·不同处理对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子在转基因拟南芥中表达的影响第57-61页
   ·qRT-PCR分析NaCl、MeJA、Kyn、AOA对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子表达的影响第61-64页
4 讨论第64-65页
5 结论第65-68页
   ·BrCYP79B2-1、BrCYP79B2-2、BrCYP79B2-3和BrCYP79B3启动子区域分析第65页
   ·BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子的表达模式具有相似性第65页
   ·BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子的表达模式具有各自特异部位第65-66页
   ·不同处理对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子表达量影响不同第66页
   ·BrCYP79B2-1和BrCYP7982-3启动子受NaCl、MeJA、Kyn、AOA影响的差异和相似性第66-68页
参考文献第68-76页
个人简介第76-77页
致谢第77页

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