摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
1 文献综述 | 第11-25页 |
·大白菜 | 第11页 |
·硫代葡萄糖苷概况及其功能 | 第11-14页 |
·硫代葡萄糖苷的化学结构 | 第11-12页 |
·硫代葡萄糖苷合成的影响因素 | 第12-14页 |
·基因型对硫代葡萄糖苷的影响 | 第12页 |
·光对硫代葡萄糖苷的影响 | 第12页 |
·温度对硫代葡萄糖苷的影响 | 第12页 |
·水分对硫代葡萄糖苷的影响 | 第12-13页 |
·硫、氮元素对硫代葡萄糖苷的影响 | 第13页 |
·盐胁迫对硫代葡萄糖苷的影响 | 第13页 |
·机械损伤和昆虫取食对硫代葡萄糖苷的影响 | 第13页 |
·激素对硫代葡萄糖苷的影响 | 第13-14页 |
·启动子的特征与结构 | 第14-18页 |
·启动子特征简介 | 第14-15页 |
·启动子的结构 | 第15-18页 |
·核心启动元件 | 第15-16页 |
·上游(或下游)启动元件 | 第16-18页 |
·启动子分类 | 第18-23页 |
·组成型启动子 | 第18-19页 |
·来自非植物自身的组成型启动子 | 第18-19页 |
·来自植物自身的启动子 | 第19页 |
·组织特异性启动子 | 第19-21页 |
·果实特异性启动子 | 第20页 |
·茎叶特异性启动子 | 第20-21页 |
·根特异性启动子 | 第21页 |
·诱导型启动子 | 第21-23页 |
·光诱导表达启动子 | 第22页 |
·热诱导表达启动子 | 第22页 |
·创伤诱导表达启动子 | 第22-23页 |
·其他表达启动子 | 第23页 |
·CKP79基因家族的研究进展 | 第23-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
2 试验材料与方法 | 第25-43页 |
·试验材料 | 第25页 |
·实验仪器和试剂 | 第25-28页 |
·BrCYP79B2/B3启动子克隆及拟南芥转化 | 第28-38页 |
·大白菜DNA提取 | 第28页 |
·DNA提取试剂盒提取大白菜‘chiifu’总DNA | 第28页 |
·DNA凝胶电泳检测 | 第28页 |
·BrCYP79B2/B3启动子的克隆 | 第28-30页 |
·引物设计 | 第28-29页 |
·PCR扩增 | 第29-30页 |
·扩增产物凝胶电泳检测 | 第30页 |
·植物克隆载体的构建 | 第30-33页 |
·PCR产物切胶回收 | 第30-31页 |
·目的片段与载体连接构建 | 第31页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第31-32页 |
·单克隆菌体挑取,培养及PCR检测 | 第32页 |
·菌液PCR凝胶电泳检测 | 第32页 |
·启动子序列分析 | 第32-33页 |
·表达载体的构建 | 第33-36页 |
·质粒提取 | 第33-34页 |
·酶切质粒DNA | 第34页 |
·连接并构建表达载体 | 第34页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第34-35页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第35页 |
·单克隆菌体挑取,培养及PCR检测 | 第35-36页 |
·菌液PCR凝胶电泳检测 | 第36页 |
·转基因植株的获得 | 第36-38页 |
·拟南芥播种及培养 | 第36页 |
·花序侵染法转化拟南芥 | 第36-37页 |
·筛选转基因拟南芥 | 第37-38页 |
·转基因植株GUS组织化学染色 | 第38-39页 |
·不同处理对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子在转基因拟南芥中表达的影响 | 第39页 |
·qRT-PCR分析NaCl、MeJA、Kyn、AOA对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子表达变化的影响 | 第39-43页 |
·RNA提取及检测 | 第39-40页 |
·Trizol法提取RNA | 第39-40页 |
·RNA凝胶电泳检测 | 第40页 |
·去除RNA中基因组DNA并进行反转录成为cDNA | 第40-41页 |
·qRT-PCR | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-64页 |
·大白菜‘chiifu’基因组DNA提取 | 第43页 |
·BrCYP79B2/B3启动子的克隆 | 第43-44页 |
·启动子序列分析 | 第44-48页 |
·启动子驱动的GUS基因植物表达载体构建 | 第48-50页 |
·启动子载体的酶切鉴定 | 第48-50页 |
·农杆菌中质粒鉴定 | 第50页 |
·转基因拟南芥的获得 | 第50-51页 |
·转基因拟南芥PCR检测 | 第51-52页 |
·ProB_(2-1):GUS、ProB_(2-3):GUS的组织特异性分析 | 第52-61页 |
·子叶期各启动子的组织表达模式 | 第52-53页 |
·莲座期期各启动子的组织表达模式 | 第53-54页 |
·抽薹开花期各启动子的组织表达模式 | 第54-56页 |
·成熟期各启动子的组织表达模式 | 第56-57页 |
·不同处理对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子在转基因拟南芥中表达的影响 | 第57-61页 |
·qRT-PCR分析NaCl、MeJA、Kyn、AOA对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子表达的影响 | 第61-64页 |
4 讨论 | 第64-65页 |
5 结论 | 第65-68页 |
·BrCYP79B2-1、BrCYP79B2-2、BrCYP79B2-3和BrCYP79B3启动子区域分析 | 第65页 |
·BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子的表达模式具有相似性 | 第65页 |
·BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子的表达模式具有各自特异部位 | 第65-66页 |
·不同处理对BrCYP79B2-1和BrCYP79B2-3启动子表达量影响不同 | 第66页 |
·BrCYP79B2-1和BrCYP7982-3启动子受NaCl、MeJA、Kyn、AOA影响的差异和相似性 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
个人简介 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |