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丹参酮IIA对人肝癌HepG2细胞自噬和凋亡的影响及机制研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
英汉缩略词语对照表第12-14页
前言第14-19页
1 材料与方法第19-35页
   ·实验材料及仪器第19-21页
     ·主要药品试剂第19-20页
     ·主要实验仪器第20-21页
   ·细胞第21页
   ·试剂配制第21-22页
   ·实验方法第22-34页
     ·细胞培养第22-24页
       ·细胞培养条件第22-23页
       ·细胞培养操作步骤第23-24页
     ·实验分组第24页
     ·MTT 法第24页
     ·Hoechst33258 染色第24-25页
     ·Annexin V/PI 双染流式细胞仪测细胞凋亡第25页
     ·PI 单染法检测细胞周期第25-26页
       ·LC3B-AF555/β-actin-AF488/DAPI 复染荧光倒置显微镜下观察自噬现象第26页
     ·流式细胞仪检测自噬相关标记抗体 LC3B,Beclin1第26-27页
     ·RT-PCR 检测 PI3K、AKT、mTOR 及 TSC1/2 mRNA 的表达第27-34页
       ·提取细胞总 RNA第27-30页
         ·材料准备第27-28页
         ·实验操作步骤第28-30页
       ·逆转录第30-31页
       ·PCR 反应第31-33页
       ·RT-PCR 数据计算第33-34页
   ·统计学处理第34-35页
2 结果第35-47页
   ·倒置显微镜下观察 Tan IIA 对人肝癌细胞 HepG2 生长的影响 .30第35-36页
   ·Tan IIA 对 HepG2 细胞增殖的影响第36-37页
   ·Heochst33258 染色检测细胞凋亡情况第37页
   ·流式细胞仪检测 Tan IIA 对 HepG2 细胞凋亡的影响第37-39页
   ·流式细胞仪检测 Tan IIA 对 HepG2 细胞周期的影响第39-40页
   ·兔抗 LC3B-AF555/兔抗β-actin-AF488/DAPI 复染检测 Tan IIA 对 HepG2 细胞自噬的影响第40-42页
   ·流式细胞仪检测 Tan IIA 对 HepG2 细胞自噬相关标记 LC3B 和 Bclin1 的影响第42-43页
   ·Tan IIA 诱导 HepG2 凋亡与细胞自噬的关系第43-44页
   ·RT-PCR 检测 Tan IIA 对 HepG2 细胞 PI3K/AKT/m TOR 信号转导通路的影响第44-47页
3 讨论第47-53页
4 结论第53-54页
参考文献第54-62页
综述第62-75页
 参考文献第69-75页
攻读学位期间发表的学术论文目录第75-76页
致谢第76页

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