中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
前言 | 第13-17页 |
实验材料及方法 | 第17-38页 |
1 实验材料 | 第17-22页 |
·动物和临床标本 | 第17页 |
·生化试剂和试剂盒 | 第17-19页 |
·主要仪器设备 | 第19-20页 |
·实验试剂配伍 | 第20-22页 |
2 实验方法 | 第22-38页 |
·男性精液标本的采集和分类 | 第22页 |
·精浆中H_2S水平的检测 | 第22-23页 |
·超声法提取人类精子蛋白质 | 第23页 |
·Bradford法测定蛋白浓度 | 第23-24页 |
·动物实验分组及方案 | 第24-25页 |
·血浆的制备 | 第25页 |
·组织的提取及制备 | 第25页 |
·小鼠附睾尾部精子质量的测定 | 第25页 |
·组织总蛋白的提取 | 第25页 |
·组织核蛋白的提取 | 第25-26页 |
·BCA法检测蛋白浓度 | 第26页 |
·HE染色步骤 | 第26-27页 |
·组织中H_2S生成的检测 | 第27-28页 |
·凝胶迁移率实验(EMSA)检测NF-κB结合活性 | 第28-29页 |
·DHE荧光染色检测睾丸中O_2-水平 | 第29-30页 |
·试剂盒检测组织中MDA含量 | 第30页 |
·试剂盒检测组织GSH、GSSG含量 | 第30-31页 |
·试剂盒检测SOD活性(用SOD的抑制率表示) | 第31-32页 |
·TUNEL染色步骤 | 第32-33页 |
·试剂盒检测睾丸组织中caspase-3活性 | 第33页 |
·ELISA试剂盒检测血清睾酮的含量 | 第33-34页 |
·小鼠睾丸冰冻切片免疫荧光 | 第34页 |
·实时定量PCR检测组织细胞因子mRNA水平 | 第34-35页 |
·SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶)电泳、Western blot免疫印迹 | 第35-36页 |
·人精子实验及分组 | 第36-37页 |
·数据处理与统计分析 | 第37-38页 |
实验结果 | 第38-64页 |
1 人精液标本中的H_2S | 第38-39页 |
·人类精浆中H_2S水平的检测 | 第38-39页 |
·人类精子中内源性H_2S合成酶CBS和CSE的表达 | 第39页 |
2 H_2S对小鼠精子质量的影响 | 第39-42页 |
·H_2S对炎症小鼠精子质量的影响 | 第40-41页 |
·H_2S对糖尿病小鼠精子质量的影响 | 第41-42页 |
3 H_2S对小鼠睾丸中内源性H_2S合成体系的影响 | 第42-45页 |
·H_2S对炎症小鼠内源性H_2S合成体系的影响 | 第42-45页 |
·H_2S对糖尿病小鼠内源性H_2S合成体系的影响 | 第45页 |
4 H_2S对小鼠睾丸生精结构的影响 | 第45-46页 |
·H_2S对炎症小鼠睾丸生精结构的影响 | 第45-46页 |
·H_2S对糖尿病小鼠睾丸生精结构的影响 | 第46页 |
5 H_2S对小鼠睾丸炎症水平的影响 | 第46-49页 |
·H_2S对小鼠睾丸促炎因子表达的影响 | 第46-48页 |
·H_2S对小鼠睾丸抗炎因子的影响 | 第48页 |
·H_2S对NF-κB活性的影响 | 第48-49页 |
6 H2S对小鼠睾丸中氧化应激水平的影响 | 第49-52页 |
·DHE检测小鼠睾丸中的氧化应激水平 | 第49-50页 |
·H_2S对小鼠睾丸中MDA水平的影响 | 第50页 |
·H_2S对小鼠睾丸中抗氧化因子的影响 | 第50-51页 |
·H_2S对Nrf2核转位的影响 | 第51-52页 |
7 H_2S对小鼠睾丸中生精细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
·TUNEL染色观察小鼠睾丸中生精细胞的凋亡 | 第52-53页 |
·H_2S对凋亡信号通路的影响 | 第53页 |
8 H_2S对睾酮合成的影响 | 第53-55页 |
·H_2S对血清睾酮水平的影响 | 第53-54页 |
·H_2S对睾酮合成相关蛋白的影响 | 第54-55页 |
9 H_2S对血睾屏障的影响 | 第55-56页 |
10 H_2S对MAPK信号通路的影响 | 第56-57页 |
11 睾丸组织特异性过表达CBS对炎症损伤睾丸的影响 | 第57-60页 |
·内源性H_2S合成酶CBS在睾丸组织中过表达 | 第57-58页 |
·睾丸组织特异性过表达CBS对炎症条件下精子质量的影响 | 第58-59页 |
·睾丸组织特异性过表达CBS对炎症条件下睾丸生精结构的影响 | 第59-60页 |
·睾丸组织特异性过表达CBS对炎症条件下血睾屏障的影响 | 第60页 |
12 H_2S对人类精子活力的影响 | 第60-64页 |
·H_2S对人类精子活力和超激活运动的影响 | 第60-62页 |
·H_2S对弱精子症病人精子活力的影响 | 第62-64页 |
讨论 | 第64-73页 |
小结 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-84页 |
文献综述 | 第84-105页 |
参考文献 | 第93-105页 |
攻读学位期间发表的文章及科研工作情况 | 第105-106页 |
致谢 | 第106页 |