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硫化氢对精子发生及功能障碍的保护作用及机制的研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-13页
前言第13-17页
实验材料及方法第17-38页
 1 实验材料第17-22页
   ·动物和临床标本第17页
   ·生化试剂和试剂盒第17-19页
   ·主要仪器设备第19-20页
   ·实验试剂配伍第20-22页
 2 实验方法第22-38页
   ·男性精液标本的采集和分类第22页
   ·精浆中H_2S水平的检测第22-23页
   ·超声法提取人类精子蛋白质第23页
   ·Bradford法测定蛋白浓度第23-24页
   ·动物实验分组及方案第24-25页
   ·血浆的制备第25页
   ·组织的提取及制备第25页
   ·小鼠附睾尾部精子质量的测定第25页
   ·组织总蛋白的提取第25页
   ·组织核蛋白的提取第25-26页
   ·BCA法检测蛋白浓度第26页
   ·HE染色步骤第26-27页
   ·组织中H_2S生成的检测第27-28页
   ·凝胶迁移率实验(EMSA)检测NF-κB结合活性第28-29页
   ·DHE荧光染色检测睾丸中O_2-水平第29-30页
   ·试剂盒检测组织中MDA含量第30页
   ·试剂盒检测组织GSH、GSSG含量第30-31页
   ·试剂盒检测SOD活性(用SOD的抑制率表示)第31-32页
   ·TUNEL染色步骤第32-33页
   ·试剂盒检测睾丸组织中caspase-3活性第33页
   ·ELISA试剂盒检测血清睾酮的含量第33-34页
   ·小鼠睾丸冰冻切片免疫荧光第34页
   ·实时定量PCR检测组织细胞因子mRNA水平第34-35页
   ·SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶)电泳、Western blot免疫印迹第35-36页
   ·人精子实验及分组第36-37页
   ·数据处理与统计分析第37-38页
实验结果第38-64页
 1 人精液标本中的H_2S第38-39页
   ·人类精浆中H_2S水平的检测第38-39页
   ·人类精子中内源性H_2S合成酶CBS和CSE的表达第39页
 2 H_2S对小鼠精子质量的影响第39-42页
   ·H_2S对炎症小鼠精子质量的影响第40-41页
   ·H_2S对糖尿病小鼠精子质量的影响第41-42页
 3 H_2S对小鼠睾丸中内源性H_2S合成体系的影响第42-45页
   ·H_2S对炎症小鼠内源性H_2S合成体系的影响第42-45页
   ·H_2S对糖尿病小鼠内源性H_2S合成体系的影响第45页
 4 H_2S对小鼠睾丸生精结构的影响第45-46页
   ·H_2S对炎症小鼠睾丸生精结构的影响第45-46页
   ·H_2S对糖尿病小鼠睾丸生精结构的影响第46页
 5 H_2S对小鼠睾丸炎症水平的影响第46-49页
   ·H_2S对小鼠睾丸促炎因子表达的影响第46-48页
   ·H_2S对小鼠睾丸抗炎因子的影响第48页
   ·H_2S对NF-κB活性的影响第48-49页
 6 H2S对小鼠睾丸中氧化应激水平的影响第49-52页
   ·DHE检测小鼠睾丸中的氧化应激水平第49-50页
   ·H_2S对小鼠睾丸中MDA水平的影响第50页
   ·H_2S对小鼠睾丸中抗氧化因子的影响第50-51页
   ·H_2S对Nrf2核转位的影响第51-52页
 7 H_2S对小鼠睾丸中生精细胞凋亡的影响第52-53页
   ·TUNEL染色观察小鼠睾丸中生精细胞的凋亡第52-53页
   ·H_2S对凋亡信号通路的影响第53页
 8 H_2S对睾酮合成的影响第53-55页
   ·H_2S对血清睾酮水平的影响第53-54页
   ·H_2S对睾酮合成相关蛋白的影响第54-55页
 9 H_2S对血睾屏障的影响第55-56页
 10 H_2S对MAPK信号通路的影响第56-57页
 11 睾丸组织特异性过表达CBS对炎症损伤睾丸的影响第57-60页
   ·内源性H_2S合成酶CBS在睾丸组织中过表达第57-58页
   ·睾丸组织特异性过表达CBS对炎症条件下精子质量的影响第58-59页
   ·睾丸组织特异性过表达CBS对炎症条件下睾丸生精结构的影响第59-60页
   ·睾丸组织特异性过表达CBS对炎症条件下血睾屏障的影响第60页
 12 H_2S对人类精子活力的影响第60-64页
   ·H_2S对人类精子活力和超激活运动的影响第60-62页
   ·H_2S对弱精子症病人精子活力的影响第62-64页
讨论第64-73页
小结第73-75页
参考文献第75-84页
文献综述第84-105页
 参考文献第93-105页
攻读学位期间发表的文章及科研工作情况第105-106页
致谢第106页

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