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杉木材质相关MYB基因的表达及功能研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-7页
目录第7-10页
第一章 文献综述第10-18页
   ·木材形成机制研究进展第10-15页
     ·木质素生物合成的相关酶基因第10-13页
       ·苯丙氨酸解氨酶 PAL第10-11页
       ·肉桂酸 4-羟基化酶 C4H第11页
       ·4 -香豆酸辅酶 A 连接酶 4CL第11-12页
       ·肉桂酰辅酶 A 还原酶 CCR第12页
       ·咖啡酰辅酶 A-O-甲基转移酶 CCoAOMT第12页
       ·肉桂醇脱氢酶 CAD第12-13页
     ·纤维素生物合成的相关酶基因第13页
       ·植物纤维素合成酶基因家族第13页
       ·蔗糖合成酶基因家族第13页
     ·木材形成相关的转录因子第13-15页
       ·MYB 转录因子的研究第14页
       ·其他相关的转录因子第14-15页
   ·杉木育种研究进展第15-16页
   ·研究目的与意义第16-17页
   ·技术路线第17-18页
第二章 ClMYB1 和 ClMYB2 转录因子的进化树及亚细胞定位分析第18-25页
   ·材料第18-19页
     ·实验材料第18-19页
   ·方法第19-21页
     ·ClMYB 转录因子的进化树分析第19页
     ·引物设计与合成第19页
     ·sGFP 融合表达载体的构建第19-20页
     ·基因枪法转化洋葱表皮细胞第20-21页
     ·结果与分析第21-23页
     ·ClMYB 转录因子的进化树分析第21-22页
     ·重组质粒的 PCR 鉴定第22页
     ·重组质粒在洋葱表皮细胞中的瞬时表达第22-23页
   ·讨论第23-25页
第三章 杉木 ClMYB1 、ClMYB2 基因的表达特性分析第25-45页
   ·材料第25-37页
     ·实验材料第25-26页
       ·定量实验材料第25-26页
       ·原位杂交实验材料第26页
     ·试剂第26页
       ·定量试剂第26页
       ·原位杂交试剂第26页
     ·仪器第26页
     ·方法第26-37页
       ·杉木总 RNA 的提取第26-27页
       ·RNA 质量检测第27-28页
       ·cDNA 第一链的合成第28-29页
       ·杉木不同组织的固定与包埋第29-31页
       ·组织切片第31页
       ·番红-固绿染色第31页
       ·RNA 探针的制备第31-33页
       ·载玻片处理、切片以及对切片完整性的检测第33-34页
       ·杂交与显色第34-36页
       ·结果处理第36-37页
   ·结果与分析第37-43页
     ·ClMYB 基因在杉木不同器官中的表达分析第37页
     ·ClMYB 基因在杉木不同组织中的表达分析第37-41页
       ·定量表达分析第37-38页
       ·原位杂交表达分析第38-41页
     ·ClMYB 基因与木质素合成相关酶基因表达的相关性分析第41-43页
   ·讨论第43-45页
第四章 ClMYB1、ClMYB2 在烟草中的表达及其相关功能分析第45-53页
   ·材料第45-46页
     ·实验材料第45页
     ·主要仪器设备第45页
     ·培养基第45页
     ·烟草 PCR 引物第45-46页
   ·方法第46-48页
     ·农杆菌介导的烟草叶盘法转化第46-47页
       ·烟草的培养第46页
       ·叶片预培养第46页
       ·农杆菌侵染第46-47页
       ·共培养第47页
       ·筛选培养第47页
       ·生根培养第47页
       ·炼苗与移栽第47页
     ·转基因阳性植株的鉴定第47-48页
       ·GUS 染色检测第47页
       ·TPS 法快速提取烟草 DNA第47页
       ·TRIzol 法提取烟草幼叶 RNA第47-48页
     ·转基因植株染色第48页
     ·转基因植株木质素含量测定第48页
     ·转基因烟草中木质素合成相关酶的表达分析第48页
   ·结果第48-51页
     ·转基因烟草的筛选和鉴定第48-49页
     ·转基因烟草的 GUS 检测第49页
     ·转基因烟草的 DNA 以及 RNA 水平的检测第49页
     ·转基因烟草的表型观测第49-50页
     ·烟草切片的染色观察第50页
     ·木质素含量的测定第50-51页
     ·转基因烟草中木质素合成相关酶的表达第51页
   ·讨论第51-53页
第五章 结论与展望第53-55页
   ·研究结论第53-54页
   ·研究展望第54-55页
文献综述第55-62页
附录第62-65页
个人简介第65-66页
论文发表情况第66-67页
社会实践及学术交流活动第67-68页
致谢第68页

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