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EPG结合实时荧光定量PCR对新蚜虫疠霉侵染桃蚜致病机理初探

致谢第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-11页
目次第11-14页
图清单第14-15页
表清单第15-16页
1 绪论第16-27页
   ·引言第16-17页
   ·新蚜虫疠霉的生物学特性和研究现状第17-19页
     ·新蚜虫疠霉概述第17页
     ·分离和培养第17-18页
     ·致病机制和侵染循环第18-19页
   ·刺探电位图谱技术第19-22页
     ·刺探电位图谱技术发展简史第19-20页
     ·EPG 的工作原理第20-22页
     ·EPG 实验的影响因素第22页
   ·实时荧光定量PCR研究进展第22-25页
     ·实时荧光定量 PCR 工作原理第22-23页
     ·qPCR 特点:第23-24页
     ·qPCR 的定量方法第24页
     ·qPCR 研究感病桃蚜体内新蚜虫疠霉 DNA 增殖的研究进展第24-25页
   ·本课题的研究内容和研究意义第25-26页
   ·论文的内容安排第26-27页
2 感染新蚜虫疠霉桃蚜的获得及其 EPG 观察第27-46页
   ·材料和方法第27-32页
     ·供试感病蚜虫的获得第27-28页
     ·供试植物第28页
     ·EPG 试验所用的试剂材料第28页
     ·实验方法第28-32页
   ·数据分析方法第32页
   ·结果分析第32-44页
     ·弹孢感病供试桃蚜的获得第32-33页
     ·记录到的 EPG 波形图第33-34页
     ·桃蚜受新蚜虫疠霉感染死亡前 16 小时与正常桃蚜的各种表征参数的比较第34-39页
     ·桃蚜受新蚜虫疠霉感染后 6 小时与正常桃蚜的各种表征参数的比较第39-44页
   ·讨论第44-46页
3 利用实时荧光定量 PCR 筛选新蚜虫疠霉内参基因第46-58页
   ·材料第47-48页
     ·菌株来源第47页
     ·化学试剂第47页
     ·培养基第47页
     ·主要仪器第47页
     ·样品准备第47-48页
   ·方法第48-50页
     ·总 RNA 的提取第48页
     ·cDNA 第一条链生成第48-49页
     ·候选内参基因的选择和引物设计第49页
     ·实时荧光定量 PCR第49页
     ·数据处理和分析第49-50页
   ·结果与分析第50-55页
     ·新蚜虫疠霉 4 种不同生长阶段样品的获得第50-51页
     ·候选内参基因引物扩增效率及特异性第51-52页
     ·候选内参基因的稳定性分析第52-55页
   ·讨论第55-57页
   ·总结论第57-58页
4 qPCR 检测感病桃蚜体内新蚜虫疠霉的增殖第58-64页
   ·材料第58页
     ·实验桃蚜第58页
     ·主要仪器第58页
     ·主要试剂第58页
   ·实验方法第58-60页
     ·感病蚜虫总 DNA 的提取第58-59页
     ·Chelex 100 提取方法第59页
     ·利用 qPCR 检测桃蚜体内新蚜虫疠霉的增殖第59-60页
   ·结果与分析第60-62页
     ·两种方法提取 DNA 的浓度纯度第60-61页
     ·实时荧光定量 PCR 结果第61页
     ·相对表达量的计算及其生长增殖的模型模拟第61-62页
   ·讨论第62-64页
5 总讨论第64-68页
   ·总结第64-66页
   ·创新点第66页
   ·展望第66-68页
参考文献第68-74页
作者简历第74页

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