| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-17页 |
| 前言 | 第17-20页 |
| 实验材料 | 第20-25页 |
| 1 研究对象 | 第20页 |
| 2 主要试剂及来源 | 第20-22页 |
| 3 实验仪器 | 第22-25页 |
| 方法 | 第25-41页 |
| 1 IVF-ET治疗及检测 | 第25-28页 |
| ·治疗前的预处理 | 第25页 |
| ·超促排卵治疗 | 第25页 |
| ·取卵及拾卵 | 第25页 |
| ·拆卵及卵细胞的质量评估 | 第25-26页 |
| ·授精 | 第26页 |
| ·获取卵丘颗粒细胞 | 第26-27页 |
| ·胚胎形态观察 | 第27页 |
| ·胚胎移植 | 第27-28页 |
| ·黄体支持以及临床妊娠的随访 | 第28页 |
| 2 卵丘颗粒细胞凋亡的测定 | 第28-31页 |
| ·采用TUNEL测定凋亡 | 第28-31页 |
| ·采用流式细胞仪检测凋亡 | 第31页 |
| 3 Western Blotting检测Bcl—2、Caspase3和CHOP蛋白表达水平 | 第31-38页 |
| ·试剂配制 | 第31-33页 |
| ·总蛋白的提取 | 第33-34页 |
| ·总蛋白的定量 | 第34-35页 |
| ·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第35-36页 |
| ·转膜和孵育抗体 | 第36-37页 |
| ·化学发光,显影以及定影 | 第37页 |
| ·分析凝胶图象数据 | 第37页 |
| ·统计学分析 | 第37-38页 |
| 4 Real-time PCR检测Bcl-2、Caspase3和CHOP基因的RNA表达水平 | 第38-39页 |
| ·基因和引物信息 | 第38页 |
| ·Trizol法总RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·采用RT-PCR逆转录合成cDNA实验 | 第39页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测人Bcl-2、Caspase3和CHOP与内参GAPDH基因方法的建立 | 第39页 |
| 5 统计学分析 | 第39-40页 |
| 技术路线 | 第40-41页 |
| 结果 | 第41-50页 |
| 1. 三组妇女临床指标的比较 | 第41-42页 |
| 2. 比较三组中游离睾酮指数及临床妊娠率 | 第42页 |
| 3. 比较卵丘颗粒细胞凋亡率 | 第42-45页 |
| ·TUNEL法检测凋亡 | 第42-43页 |
| ·流式细胞仪检测凋亡 | 第43-45页 |
| 4. Real-Time PCR检测凋亡调控蛋白Bcl-2、Caspase3以及内质网应激蛋白CHOP的mRNA表达水平 | 第45-50页 |
| ·扩增曲线及融解曲线结果 | 第45-47页 |
| ·Real-Time PCR检测Bcl-2、Caspase3以及CHOP的mRNA基因表达水平分析 | 第47-48页 |
| ·WesternBlot检测Bcl-2、Caspase3和内质网应激蛋白CHOP蛋白表达水平 | 第48-50页 |
| 讨论 | 第50-56页 |
| 1 PCOS的发病机制 | 第50-51页 |
| 2 游离睾酮指数与PCOS高雄激素血症不孕之间的关系 | 第51-53页 |
| 3 卵丘颗粒细胞的凋亡与PCOS之间的关系 | 第53-56页 |
| 全文总结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 中英文对照缩略词表 | 第65-67页 |
| 攻读学位期间成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
