| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 第一章 实验材料及试剂 | 第8-12页 |
| ·仪器设备 | 第8页 |
| ·试剂 | 第8-9页 |
| ·常用培养液、缓冲液等溶液的配制方法 | 第9-12页 |
| ·细胞培养相关试剂 | 第9-10页 |
| ·免疫印迹相关试剂 | 第10-12页 |
| 第二章 实验方法及项目 | 第12-17页 |
| ·shRNA质粒表达载体 | 第12页 |
| ·细胞培养 | 第12-13页 |
| ·实验细胞 | 第12页 |
| ·细胞复苏 | 第12页 |
| ·细胞换液 | 第12页 |
| ·细胞传代 | 第12-13页 |
| ·实验分组 | 第13页 |
| ·稳定转染 | 第13-14页 |
| ·筛选最佳药物浓度 | 第13页 |
| ·细胞转染 | 第13-14页 |
| ·建立稳定转染细胞系 | 第14页 |
| ·免疫印迹检测GRP78蛋白的表达 | 第14-15页 |
| ·单层贴壁细胞总蛋白的提取 | 第14页 |
| ·BCA法蛋白定量 | 第14-15页 |
| ·免疫印迹步骤 | 第15页 |
| ·细胞生物学行为改变 | 第15-16页 |
| ·CCK-8检测细胞的增殖 | 第15-16页 |
| ·流式细胞仪测定细胞周期分布 | 第16页 |
| ·免疫印迹检测p-AKT、AKT、p-ERKl/2及ERK1/2蛋白的表达 | 第16页 |
| ·数据统计分析方法 | 第16-17页 |
| 第三章 实验结果 | 第17-22页 |
| ·shRNA-GRP78对GRP78蛋白表达的抑制情况 | 第17-18页 |
| ·CCK-8检测3组RKO细胞的增殖 | 第18页 |
| ·流式细胞仪测定细胞周期分布 | 第18-19页 |
| ·免疫印迹检测AKT磷酸化水平 | 第19-20页 |
| ·免疫印迹检测ERK磷酸化水平 | 第20-22页 |
| 第四章 讨论 | 第22-26页 |
| 结论 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-31页 |
| 附图 | 第31-33页 |
| 综述 | 第33-47页 |
| 综述参考文献 | 第41-47页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
| 缩略语 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |