稻瘟菌分泌蛋白基因克隆及功能初步分析
| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-19页 |
| ·课题背景 | 第9页 |
| ·文献综述 | 第9-19页 |
| ·稻瘟菌分泌蛋白组 | 第10-12页 |
| ·影响致病性的稻瘟菌分泌蛋白 | 第12-13页 |
| ·诱导植物细胞坏死的稻瘟菌效应蛋白 | 第13-14页 |
| ·稻瘟菌Avr蛋白 | 第14-17页 |
| ·展望 | 第17-19页 |
| 第2章 稻瘟菌效应因子的规模化克隆 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·基因来源 | 第19页 |
| ·实验菌株、载体、植物材料 | 第19页 |
| ·实验试剂和主要仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·生物信息学相关数据库运用及软件使用 | 第19页 |
| ·PCR扩增 | 第19-20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第20页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第20-21页 |
| ·TA-克隆 | 第21-22页 |
| ·测序 | 第22页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第22-23页 |
| ·烟草注射 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-28页 |
| ·生物信息学方法分析预测基因 | 第23-26页 |
| ·测序结果分析 | 第26-27页 |
| ·农杆菌克隆子鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组载体瞬时表达分析 | 第28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| ·后续工作 | 第29-31页 |
| 第3章 原核表达载体的构建、表达、纯化 | 第31-43页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·实验菌株和载体 | 第31页 |
| ·实验试剂和主要仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·载体构建 | 第32-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·原核表达载体构建 | 第36-37页 |
| ·测序结果分析 | 第37页 |
| ·GST-融合蛋白诱导表达 | 第37-38页 |
| ·His-蛋白诱导表达 | 第38-39页 |
| ·GST-融合蛋白可溶性分析 | 第39-40页 |
| ·His-蛋白可溶性分析 | 第40页 |
| ·GST-融合蛋白纯化 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| ·后续工作 | 第42-43页 |
| 第4章 5个效应子转基因植株创制 | 第43-49页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·实验菌株、载体、植物材料 | 第43页 |
| ·实验试剂和主要仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·引物设计 | 第43-44页 |
| ·PCR扩增效应子基因 | 第44页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第44页 |
| ·载体重组 | 第44页 |
| ·农杆菌介导的水稻转化 | 第44页 |
| ·转基因植株潮霉素(Hyg)初筛 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-46页 |
| ·载体构建 | 第45页 |
| ·转化获得转基因植株 | 第45-46页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| ·后续工作 | 第47-49页 |
| 第5章 讨论 | 第49-51页 |
| ·稻瘟菌分泌蛋白基因筛选 | 第49页 |
| ·稻瘟菌效应因子功能分析 | 第49-51页 |
| ·原核诱导表达 | 第49-50页 |
| ·XVE化学诱导系统 | 第50-51页 |
| 附录1 | 第51-55页 |
| 附录2 | 第55-59页 |
| 附录3 | 第59-61页 |
| 附录4 | 第61-63页 |
| 附录5 | 第63-65页 |
| 附录6 | 第65-67页 |
| 附录7 | 第67-69页 |
| 附录8 | 第69-75页 |
| 附录9 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 个人简历 | 第89-90页 |
