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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)NF-κB信号通路相关基因的分子克隆及其功能初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 综述第11-26页
 1 免疫系统概述和鱼类免疫系统研究进展第11-13页
   ·免疫系统概述第11-12页
   ·鱼类免疫系统的研究进展第12-13页
 2 NF-κB信号转导通路第13-18页
   ·NF-κB信号转导通路概述第13-14页
   ·NF-κB信号通路的分子生物学基础第14-17页
   ·NF-κB信号转导通路的激活及其调节机制第17-18页
 3 NF-κB与动物免疫信号转导研究进展第18-21页
   ·NF-κB与无脊椎动物免疫信号转导研究第18页
   ·NF-κB与脊椎动物免疫信号转导研究第18-21页
 4 病毒利用宿主的NF-KB信号通路实现免疫逃避和快速增值第21页
 5 石斑鱼及其疾病研究第21-25页
   ·石斑鱼研究进展第21-22页
   ·石斑鱼虹彩病毒研究进展第22-25页
 6 研究的目的和意义第25-26页
第二章 石斑鱼两种类型的IκBα的分子克隆和功能分析第26-61页
 1 前言第26-27页
 2 实验材料第27-30页
   ·实验动物第27页
   ·细胞、病毒及其它微生物病原第27页
   ·质粒载体和受体菌株第27-28页
   ·细胞培养基及细菌培养基第28页
   ·酶类及相关标准品第28页
   ·实验用试剂盒第28-29页
   ·其他溶液和试剂第29页
   ·常用的生物信息学分析软件和网站第29-30页
 3 实验方法和步骤第30-46页
   ·GS细胞培养和传代第30页
   ·病毒的增殖第30页
   ·用GS细胞测定SGIV病毒滴度第30-31页
   ·鱼体组织样品采集及免疫刺激第31页
   ·总RNA样品的提取第31页
   ·设计RACE引物,获得石斑鱼IκBα的cDNA序列第31-35页
   ·石斑鱼两种类型的EcIκBα基因全长的获得第35-38页
   ·半定量PCR检测石斑鱼IκBα的mRNA表达谱第38-40页
   ·qPCR检测不同刺激后石斑鱼头肾组织中IκBα表达变化第40页
   ·EcIκBαA和EcIκBαB亚细胞定位分析第40-42页
   ·两种类型的EcIκBα对NF-κB因子p65和c-Rel的调节第42-44页
   ·过表达EcIκBαA和EcIκBαB对SGIV复制的影响第44-45页
   ·数据分析软件第45-46页
 4 实验结果与分析第46-58页
   ·EcIκBαA和EcIκBαB cDNA全长扩增和序列分析第46-48页
   ·EcIκBαA和EcIκBαB基因组全长扩增和序列分析第48-50页
   ·EcIκBαA和EcIκBαB氨基酸序列比对及进化关系分析第50-52页
   ·石斑鱼EcIκBαA和EcIκBαB基因表达模式分析第52-54页
   ·石斑鱼EcIκBαA和EcIκBαB亚细胞定位分析第54-55页
   ·过表达EcIκBαA和EcIκBαB对NF-κB的调节第55-57页
   ·过表达EcIκBαA和EcIκBαB对SGIV复制的影响第57-58页
 5 讨论第58-60页
 6 小结第60-61页
第三章 石斑鱼IκB激酶EcIKKα基因的分离和功能研究第61-71页
 1 前言第61-62页
 2 实验材料和试剂第62页
 3 实验方法第62-64页
   ·设计引物,利用RACE技术获得IκBα基因序列第62-63页
   ·石斑鱼IKKα基因的表达模式分析第63页
   ·聚肌胞苷酸(Poly I:C)免疫刺激石斑鱼第63页
   ·生物统计学软件分析第63-64页
 4 实验结果与分析第64-70页
   ·石斑鱼IKKα基因扩增和序列分析第64-66页
   ·EcIKKα和已报道物种的IKKα氨基酸序列比对及进化关系分析第66-68页
   ·EcIKKα基因表达模式分析第68页
   ·polyI:C刺激后EcIKKα的变化第68-70页
 5 讨论第70页
 6 小结第70-71页
全文总结和今后工作展望第71-73页
 全文总结第71-72页
 今后可进一步开展以下工作第72-73页
参考文献第73-80页
略缩词第80-82页
攻读硕士学位期间发表的和待发表的论文第82-83页
攻读硕士期间参加的学术交流活动第83-84页
致谢第84-85页

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