| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-16页 |
| ·课题背景 | 第10-11页 |
| ·肝细胞癌概况 | 第10页 |
| ·抗肿瘤靶向新药的研究进展 | 第10-11页 |
| ·小檗碱抗肿瘤活性研究 | 第11-12页 |
| ·胆酸的概括 | 第12页 |
| ·细胞凋亡 | 第12-15页 |
| ·细胞凋亡的简介 | 第12页 |
| ·细胞凋亡的特征 | 第12-14页 |
| ·细胞凋亡与ROS | 第14-15页 |
| ·立题依据 | 第15-16页 |
| 2 B4诱导SMMC-7721细胞凋亡研究 | 第16-26页 |
| ·实验仪器与材料 | 第16-18页 |
| ·细胞株 | 第16页 |
| ·仪器与设备 | 第16页 |
| ·试剂与材料 | 第16-17页 |
| ·实验器皿准备 | 第17页 |
| ·主要试剂的配置 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-20页 |
| ·细胞培养 | 第18页 |
| ·细胞复苏 | 第18页 |
| ·细胞传代 | 第18页 |
| ·细胞冻存 | 第18页 |
| ·MTT法检测B4的体外肿瘤增值抑制作用 | 第18-19页 |
| ·B4作用于SMMC-7721细胞形态学观察 | 第19页 |
| ·DNA琼脂糖电泳检测细胞凋亡 | 第19页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染检测细胞早期凋亡 | 第19页 |
| ·B4对SMMC-7721细胞周期分布的影响 | 第19-20页 |
| ·实验结果与讨论 | 第20-24页 |
| ·B4对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用 | 第20页 |
| ·B4对人正常肝细胞HL-7702的毒性作用 | 第20-21页 |
| ·B4诱导SMMC-7721细胞凋亡的形态学变化 | 第21-22页 |
| ·B4诱导SMMC-7721细胞DNA片段化 | 第22页 |
| ·B4诱导SMMC-7721细胞凋亡结果 | 第22-23页 |
| ·B4诱导SMMC-7721细胞周期分布结果 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| ·本章小结 | 第25-26页 |
| 3 B4诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制研究 | 第26-33页 |
| ·实验仪器与材料 | 第26-27页 |
| ·仪器与设备 | 第26页 |
| ·试剂与材料 | 第26页 |
| ·主要试剂配制 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-29页 |
| ·B4对SMMC-7721细胞线粒体膜电位(△Ψm)的影响 | 第27页 |
| ·B4对SMMC-7721细胞内Ca~(2+)含量的影响 | 第27页 |
| ·B4对SMMC-7721细胞内ROS含量的影响 | 第27-28页 |
| ·Western Blot分析B4对SMMC-7721细胞内蛋白表达的影响 | 第28-29页 |
| ·实验结果与讨论 | 第29-31页 |
| ·B4对SMMC-7721细胞中△Ψm的影响结果 | 第29页 |
| ·B4诱导SMMC-7721细胞内ROS的改变 | 第29-30页 |
| ·B4诱导SMMC-7721细胞内Ca~(2+)含量变化结果 | 第30-31页 |
| ·Western-Blot检测结果 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·本章小结 | 第32-33页 |
| 4 ROS在B4诱导细胞凋亡中的作用研究 | 第33-41页 |
| ·实验仪器与材料 | 第33-34页 |
| ·仪器与设备 | 第33页 |
| ·试剂与材料 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·NAC对B4诱导凋亡时细胞内ROS变化的影响 | 第34页 |
| ·MTT法检测ROS对细胞增殖变化的影响 | 第34页 |
| ·ROS对B4诱导凋亡时细胞内△Ψm变化的影响 | 第34页 |
| ·ROS对B4诱导凋亡时细胞内Ca~(2+)浓度变化的影响 | 第34-35页 |
| ·Western Blot检测ROS对B4诱导凋亡时蛋白表达变化的影响 | 第35-36页 |
| ·实验结果与讨论 | 第36-39页 |
| ·NAC对B4诱导凋亡时细胞内ROS变化的结果 | 第36页 |
| ·MTT法检测ROS对细胞增殖变化的结果 | 第36-37页 |
| ·ROS对B4诱导凋亡时细胞内△Ψm变化的结果 | 第37-38页 |
| ·ROS对B4诱导凋亡时细胞内Ca~(2+)浓度变化的结果 | 第38-39页 |
| ·Western Blot检测ROS对B4诱导凋亡时蛋白表达变化的结果 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 结论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |