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两株新城疫病毒的致病性研究、全基因序列测定及全长cDNA的构建

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
文献综述第14-29页
 第一章 新城疫病毒的生物学特性研究进展第14-29页
   ·新城疫病毒第14页
   ·新城疫病毒的基因分型第14-16页
     ·新城疫病毒的全基因分型第14-15页
     ·新城疫病毒的 F 基因分型第15-16页
   ·新城疫病毒与受体的结合第16-19页
     ·新城疫病毒的细胞受体第17页
     ·HN 蛋白与受体的结合第17-19页
   ·新城疫病毒与细胞融合第19-21页
     ·F 蛋白的促细胞融合功能第19-20页
     ·HN 蛋白在病毒与细胞融合中的作用第20-21页
   ·新城疫病毒的复制第21-24页
     ·NP 蛋白的功能第21-22页
     ·P 蛋白的功能第22-23页
     ·L 蛋白的功能第23-24页
   ·新城疫病毒的组装与出芽第24-26页
     ·M 蛋白的功能第24页
     ·病毒的组装第24-25页
     ·病毒的出芽第25-26页
   ·新城疫病毒的致病力第26-27页
     ·不同毒力 NDV 分离株的特点第26-27页
     ·影响 NDV 毒力的因素第27页
   ·新城疫病毒的反向遗传第27-29页
     ·NDV 反向遗传系统的构建第27-28页
     ·NDV 反向遗传系统的应用第28-29页
试验研究第29-63页
 第二章 两株新城疫病毒的致病性研究第29-38页
   ·材料第29-30页
     ·毒株第29页
     ·SPF 鸡胚第29页
     ·1 日龄雏鸡第29-30页
     ·细胞第30页
     ·试剂第30页
     ·培养基及试剂的配置第30页
     ·主要仪器第30页
   ·方法第30-32页
     ·无菌病毒尿囊液的制备第30页
     ·ICPI第30-31页
     ·蚀斑计数法测定病毒的滴度第31页
     ·病毒在 DF-1 细胞上的增殖规律第31-32页
     ·病毒在 DF-1 细胞上形成的合胞体第32页
   ·结果第32-35页
     ·ICPI 的测定结果第32-33页
     ·病毒的滴度第33页
     ·病毒在 DF-1 细胞上形成的合胞体第33-35页
     ·病毒在 DF-1 细胞上的增殖能力第35页
   ·讨论第35-37页
   ·小结第37-38页
 第三章 两株新城疫病毒全基因序列的测定第38-53页
   ·材料第38-40页
     ·SPF 鸡胚第38页
     ·菌株及载体第38页
     ·试剂第38页
     ·NDV 参考毒株第38页
     ·扩增全基因的引物第38-39页
     ·培养基及常用试剂的配制第39-40页
     ·主要仪器第40页
   ·方法第40-43页
     ·病毒的增殖第40页
     ·两株病毒 RNA 的提取第40页
     ·两株 NDV 的 RT-PCR 反应第40-41页
     ·PCR 产物的纯化第41页
     ·纯化 PCR 产物的连接第41页
     ·连接产物的转化第41-42页
     ·重组质粒 pMD19-T-NDV Fragment 的提取第42页
     ·质粒的酶切鉴定第42页
     ·NDV 片段的测序及分析第42-43页
   ·结果第43-50页
     ·两株 NDV 全基因片段的 PCR 扩增第43页
     ·阳性克隆的鉴定第43-44页
     ·两株 NDV 的全基因序列的特征第44-45页
     ·两株 NDV 的分子特征与其它 NDV 毒株的比较第45-50页
   ·讨论第50-51页
   ·小结第51-53页
 第四章 野鸟源 SpottedDove/China/08 分离株全长 cDNA 的构建第53-63页
   ·材料第53-55页
     ·SPF 鸡胚第53页
     ·菌株及载体第53页
     ·主要试剂第53页
     ·构建全长 cDNA 所需的引物第53-54页
     ·培养基及常用试剂的配制第54页
     ·主要仪器第54-55页
   ·方法第55-58页
     ·构建全长 cDNA 的策略第55页
     ·新鲜病毒尿囊液的扩增第55页
     ·病毒 RNA 的提取第55页
     ·RT-PCR 反应第55-56页
     ·SpottedDove/China/08 分离株全长 cDNA 的构建第56-58页
     ·SpottedDove/China/08 片段的克隆及序列测定第58页
   ·结果第58-60页
     ·SpottedDove/China/08 全基因组 6 个子片段的扩增第58页
     ·NDV 12 及 NDV 56 片段的融合 PCR 扩增第58-59页
     ·NDV 123 及 NDV 456 片段的融合 PCR 扩增第59-60页
     ·SpottedDove/China/08 全长 cDNA 片段的融合 PCR 扩增第60页
     ·融合 PCR 产物的序列测定第60页
   ·讨论第60-62页
   ·小结第62-63页
结论第63-64页
参考文献第64-76页
附录第76-78页
缩略词第78-79页
致谢第79-80页
作者简介第80页

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