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猪多能干细胞诱导培养体系的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章 诱导多能干细胞研究进展第12-21页
   ·诱导多能干细胞的产生和发展第12-14页
   ·诱导多能性干细胞的机制第14-17页
     ·细胞不完全重编程第14-15页
     ·细胞重编程因子和多能性网络调控第15-17页
   ·多能干细胞诱导培养条件第17-21页
     ·受体细胞的选择第17-18页
     ·采用不同介导载体诱导多能干细胞第18-20页
     ·诱导多能干细胞的培养体系第20-21页
第二章 猪诱导多能干细胞的研究第21-25页
   ·猪诱导多能干细胞的研究现状第21-22页
   ·猪多能干细胞诱导方法和多能性调控第22-23页
     ·猪的多能干细胞诱导方法第22页
     ·猪的多能性信号转导途径第22-23页
   ·猪诱导多能干细胞面临的问题第23-25页
第三章 LIF 和 BFGF 条件下诱导猪胎儿成纤维细胞重编程第25-41页
   ·材料第25-27页
     ·细胞与病毒载体第25页
     ·实验试剂第25-26页
     ·仪器与设备第26-27页
     ·溶液的配制第27页
   ·方法第27-31页
     ·八眉猪胎儿成纤维细胞的分离培养第27-28页
     ·小鼠胎儿成纤维细胞的分离培养及饲养层细胞的制备第28页
     ·逆转录病毒的包装和侵染第28-29页
     ·猪 IPS 细胞的培养与克隆挑取传代第29页
     ·诱导细胞碱性磷酸酶染色第29-30页
     ·RNA 的提取第30页
     ·PCR 反应第30页
     ·诱导细胞免疫荧光检测第30-31页
   ·结果第31-39页
     ·八眉猪 PEF 的分离培养和冻存第31-32页
     ·诱导 PEF 重编程的效率及其形态变化第32-36页
     ·RT-PCR 检测重编程 PEF 内源多能性基因表达第36-37页
     ·细胞免疫荧光检测第37-38页
     ·猪诱导多能干细胞建系第38-39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-41页
第四章 INSULIN 和 2I 条件下诱导猪胎儿成纤维细胞重编程第41-49页
   ·材料第41页
   ·方法第41页
   ·结果第41-47页
     ·诱导 PEF 重编程的效率及其形态变化第41-43页
     ·RT-PCR 检测重编程 PEF 内源多能性基因表达第43-44页
     ·细胞免疫荧光检测第44-46页
     ·两种培养条件下诱导 PEF 重编程的比较第46-47页
   ·讨论第47页
   ·小结第47-49页
第五章 诱导猪卵巢颗粒细胞重编程第49-56页
   ·材料第49页
   ·方法第49-51页
   ·结果第51-54页
     ·猪卵巢颗粒细胞的分离与培养第51-52页
     ·逆转录病毒感染效率的测定第52-53页
     ·诱导猪卵巢颗粒细胞重编程及鉴定第53-54页
   ·讨论第54-55页
   ·小结第55-56页
总结第56-57页
论文创新点第57-58页
参考文献第58-65页
缩略词第65-66页
致谢第66-67页
作者简介第67页

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