摘要 | 第1-5页 |
Summary | 第5-7页 |
目录 | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-31页 |
1 美洲南瓜及其种皮研究进展 | 第12-15页 |
·美洲南瓜研究进展 | 第12-14页 |
·美洲南瓜营养价值及光合特性 | 第12-13页 |
·美洲南瓜病害研究 | 第13页 |
·美洲南瓜分子标记及基因克隆研究 | 第13-14页 |
·裸仁美洲南瓜种皮性状及其相关酶活性研究 | 第14-15页 |
2 苯丙氨酸解氨酶(PAL)的研究进展 | 第15-24页 |
·PAL 的存在和分布 | 第16-17页 |
·PAL 的基本特性 | 第17页 |
·PAL 的三维结构 | 第17-18页 |
·PAL 对植物生理代谢的意义 | 第18页 |
·在细胞分化和木质化中的作用 | 第18页 |
·在植物色素形成过程中的作用 | 第18页 |
·在调控黄酮类化合物合成中的作用 | 第18页 |
·PAL 在植物逆境中的作用 | 第18-20页 |
·PAL 在植物抗病中的作用 | 第19页 |
·PAL 参与植物抗病的机制 | 第19-20页 |
·PAL 与植物抗虫性的关系 | 第20页 |
·PAL 基因的表达和克隆 | 第20-24页 |
·植物 PAL 基因的结构 | 第20页 |
·植物 PAL 基因表达的特点 | 第20-21页 |
·植物 PAL 酶及基因的表达调控 | 第21-22页 |
·PAL 基因的克隆及序列分析 | 第22-24页 |
3 实时荧光定量(FQ-PCR)研究进展 | 第24-26页 |
·组织表达特异性分析 | 第25页 |
·非生物胁迫条件下基因表达分析 | 第25-26页 |
·生物胁迫条件下基因表达分析 | 第26页 |
4 灰霉病及其与植物相关防御酶活性的关系 | 第26-31页 |
·灰霉病菌的分类学地位和形态学特征 | 第27页 |
·瓜类灰霉病的发病症状 | 第27页 |
·植物对灰霉病的抗性及与防御酶活性的关系 | 第27-31页 |
·接种灰霉病病菌对植物的影响 | 第27-29页 |
·外源物质诱导植物对灰霉病的抗性及与防御酶活性的关系 | 第29-31页 |
第二章 美洲南瓜种皮 PAL 基因 cDNA 片段克隆及分析 | 第31-47页 |
1 材料与方法 | 第31-35页 |
·试验材料 | 第31页 |
·试验方法 | 第31-35页 |
·主要药品及仪器 | 第31-32页 |
·种皮总 RNA 的提取 | 第32-34页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第34页 |
·美洲南瓜 PAL 基因 cDNA 片段的克隆 | 第34页 |
·PCR 产物的回收、克隆及测序 | 第34-35页 |
·美洲南瓜 PAL 基因的生物信息学分析 | 第35页 |
2 结果分析 | 第35-45页 |
·美洲南瓜种皮总 RNA 的提取 | 第35页 |
·美洲南瓜种皮 PAL 基因 cDNA 片段的扩增 | 第35-37页 |
·美洲南瓜种皮 PAL 基因 cDNA 片段序列分析 | 第37-42页 |
·有壳美洲南瓜种皮 PAL 基因 cDNA 片段序列分析 | 第37-39页 |
·裸仁美洲南瓜种皮 PAL 基因 cDNA 片段序列分析 | 第39-42页 |
·有壳和裸仁美洲南瓜种皮 PAL 基因核苷酸和氨基酸序列比对分析 | 第42-45页 |
3 讨论与结论 | 第45-47页 |
第三章 有壳美洲南瓜种皮 PAL 基因全长序列克隆及其生物信息学分析 | 第47-70页 |
1 材料与方法 | 第47-53页 |
·试验材料 | 第47-48页 |
·试验方法 | 第48-53页 |
·主要药品及仪器 | 第48页 |
·种皮总 RNA 的提取 | 第48-49页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第49-50页 |
·有壳美洲南瓜(P3)种皮 PAL 基因末端快速克隆(RACE) | 第50-53页 |
·P3 种皮 PAL 基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列生物信息学分析 | 第53页 |
2 结果分析 | 第53-68页 |
·有壳美洲南瓜(P3)种皮总 RNA 的提取 | 第53-54页 |
·P3 种皮 PAL 基因 cDNA 中间序列的克隆及分析 | 第54页 |
·P3 种皮 PAL 基因全长序列的克隆 | 第54-55页 |
·种皮 PAL 基因 3′端和 5′端序列的获得 | 第54-55页 |
·种皮 PAL 基因全长序列的获得 | 第55页 |
·有壳美洲南瓜(P3)种皮 PAL 基因(CP-PAL)生物信息学分析 | 第55-62页 |
·CP-PAL 基因全长核苷酸序列及其推导的氨基酸序列分析 | 第55页 |
·CP-PAL 蛋白功能域分析 | 第55-58页 |
·CP-PAL 蛋白理化性质分析 | 第58页 |
·CP-PAL 蛋白导肽、信号肽及亚细胞定位预测与分析 | 第58-59页 |
·CP-PAL 蛋白功能位点分析 | 第59页 |
·CP-PAL 蛋白跨膜结构域分析 | 第59页 |
·CP-PAL 蛋白磷酸化位点预测 | 第59-60页 |
·CP-PAL 蛋白疏水性/亲水性预测 | 第60-61页 |
·CP-PAL 蛋白二级结构分析 | 第61页 |
·CP-PAL 基因编码氨基酸固有无序化特性分析 | 第61-62页 |
·CP-PAL 基因编码氨基酸序列多重比较、系统进化树构建及蛋白三级结构预测 | 第62-68页 |
3 讨论与结论 | 第68-70页 |
第四章 裸仁美洲南瓜种皮 PAL 基因全长序列克隆及其生物信息学分析 | 第70-91页 |
1 材料与方法 | 第70-73页 |
·试验材料 | 第70页 |
·试验方法 | 第70-73页 |
·主要药品及仪器 | 第70页 |
·种皮总 RNA 的提取 | 第70-71页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第71页 |
·裸仁美洲南瓜(P13)种皮 PAL 基因末端快速克隆(RACE) | 第71-72页 |
·P13 种皮 PAL 基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列生物信息学分析 | 第72-73页 |
2 结果分析 | 第73-89页 |
·裸仁美洲南瓜(P13)种皮总 RNA 的提取 | 第73页 |
·P13 种皮 PAL 基因 cDNA 中间序列的克隆及分析 | 第73-74页 |
·P13 种皮 PAL 基因全长序列的克隆 | 第74-75页 |
·PAL 基因 3′端和 5′端序列的获得 | 第74-75页 |
·种皮 PAL 基因全长序列的获得 | 第75页 |
·裸仁美洲南瓜(P13)种皮 PAL 基因(CPL-PAL)生物信息学分析 | 第75-82页 |
·CPL-PAL 基因全长核苷酸序列及其推导的氨基酸序列对比分析 | 第75页 |
·CPL-PAL 蛋白功能域分析 | 第75-78页 |
·CPL-PAL 蛋白理化性质分析 | 第78页 |
·CPL-PAL 蛋白导肽及信号肽分析 | 第78-79页 |
·CPL-PAL 蛋白功能位点分析 | 第79页 |
·CPL-PAL 蛋白亚细胞定位及跨膜结构域分析 | 第79-80页 |
·CPL-PAL 蛋白磷酸化位点预测 | 第80页 |
·CPL-PAL 蛋白疏水性/亲水性预测 | 第80-81页 |
·CPL-PAL 蛋白二级结构分析 | 第81页 |
·CPL-PAL 基因编码氨基酸固有无序化特性分析 | 第81-82页 |
·CPL-PAL 基因编码氨基酸序列多重比较、系统进化树构建及蛋白三级结构预测 | 第82-89页 |
3 讨论与结论 | 第89-91页 |
第五章 PAL 基因在有壳和裸仁美洲南瓜种皮及植株中表达特性分析 | 第91-101页 |
1 材料与方法 | 第91-94页 |
·试验材料 | 第91-92页 |
·试验方法 | 第92-94页 |
·主要药品及仪器 | 第92页 |
·植物样品 PAL 酶活性测定 | 第92-93页 |
·植物样品总 RNA 的提取 | 第93页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第93页 |
·实时荧光定量 PCR | 第93-94页 |
2 结果分析 | 第94-99页 |
·有壳和裸仁美洲南瓜种皮发育过程中 PAL 基因的表达特性分析 | 第94-95页 |
·PAL 基因在有壳美洲南瓜(P3,P5)种皮发育过程中的表达特性分析 | 第94页 |
·PAL 基因在裸仁美洲南瓜(P13,P15)种皮发育过程中的表达特性分析 | 第94-95页 |
·PAL 基因在有壳和裸仁美洲南瓜种皮中的表达差异分析 | 第95页 |
·有壳和裸仁美洲南瓜植株不同发育时期不同组织部位 PAL 酶活性的变化 | 第95-97页 |
·有壳美洲南瓜(Y1,Y2)植株不同发育时期不同组织部位 PAL 酶活性分析 | 第95-96页 |
·裸仁美洲南瓜(W1,W2)植株不同发育时期不同组织部位 PAL 酶活性分析 | 第96页 |
·PAL 酶活性在有壳和裸仁美洲南瓜植株不同组织部位对比分析 | 第96-97页 |
·有壳和裸仁美洲南瓜植株不同发育时期不同组织部位 PAL 基因的表达特性分析 | 第97-99页 |
·PAL 基因在有壳美洲南瓜(Y1,Y2)植株不同发育时期不同组织部位表达特性分析 | 第97-98页 |
·PAL 基因在裸仁美洲南瓜(W1,W2)植株不同发育时期不同组织部位表达特性分析 | 第98页 |
·PAL 基因在有壳和裸仁美洲南瓜植株不同组织部位表达差异分析 | 第98-99页 |
3 讨论与结论 | 第99-101页 |
第六章 灰霉病菌对裸仁美洲南瓜植株防御酶活性及 PAL 基因表达的影响 | 第101-115页 |
1 材料与方法 | 第102-105页 |
·试验材料 | 第102页 |
·试验方法 | 第102-105页 |
·灰霉病菌孢子悬浮液的制备 | 第102页 |
·接种处理 | 第102页 |
·病情指数统计 | 第102页 |
·植株样品叶绿素含量的测定 | 第102-103页 |
·植株样品 PAL 酶活性测定 | 第103页 |
·植株样品 POD 酶活性测定 | 第103-104页 |
·植株样品 PPO 酶活性测定 | 第104-105页 |
·实时荧光定量 PCR | 第105页 |
2 结果分析 | 第105-111页 |
·裸仁美洲南瓜抗病和感病品种病情指数比较 | 第105-106页 |
·裸仁美洲南瓜抗病和感病品种不同组织部位叶绿素含量变化 | 第106-107页 |
·裸仁美洲南瓜抗病和感病品种不同组织部位防御酶活性变化 | 第107-110页 |
·裸仁美洲南瓜抗病和感病品种不同组织部位 PAL 酶活性变化 | 第107-108页 |
·裸仁美洲南瓜抗病和感病品种不同组织部位 POD 酶活性变化 | 第108-109页 |
·裸仁美洲南瓜抗病和感病品种不同组织部位 PPO 酶活性变化 | 第109-110页 |
·裸仁美洲南瓜抗病和感病品种不同组织部位 PAL 基因表达特性分析 | 第110-111页 |
3 讨论与结论 | 第111-115页 |
第七章 主要结论及创新点 | 第115-116页 |
1 主要结论 | 第115页 |
2 创新点 | 第115-116页 |
附图 | 第116-123页 |
致谢 | 第123-124页 |
作者简介 | 第124-125页 |
导师简介 | 第125-127页 |
参考文献 | 第127-138页 |