| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-30页 |
| 1. 转座子生物学特性 | 第10-13页 |
| ·转座子概念 | 第10页 |
| ·转座子种类 | 第10-11页 |
| ·转座子的转座机制 | 第11-13页 |
| 2. SB系统研究进展 | 第13-16页 |
| ·SB组成结构 | 第13-14页 |
| ·SB-Tn转座的机制 | 第14-15页 |
| ·产物过剩抑制效应 | 第15页 |
| ·SB系统在转基因研究中的应用 | 第15-16页 |
| 3. Tol2转座子研究进展 | 第16-21页 |
| ·Tol2结构组成 | 第16-17页 |
| ·Tol2在转基因鱼中的应用 | 第17-19页 |
| ·Tol2介导的基因捕获技术 | 第19-21页 |
| 4. piggyBack(pB)转座子研究进展 | 第21-24页 |
| ·PB的结构 | 第21-22页 |
| ·PB的转座机制 | 第22-23页 |
| ·PB在昆虫的应用 | 第23页 |
| ·PB在哺乳动物转基因研究中的应用 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-30页 |
| 前言 | 第30-31页 |
| 2. 材料与方法 | 第31-39页 |
| ·菌株、细胞和载体质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·主要的生物信息学网站 | 第32页 |
| ·主要生物学分析软件 | 第32页 |
| ·仪器设备 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·无内毒素质粒提取 | 第33-34页 |
| ·DNA和RNA同时提取 | 第34页 |
| ·反转录反应 | 第34-35页 |
| ·实时定量PCR | 第35-36页 |
| ·成纤维细胞的分离培养 | 第36页 |
| ·细胞转染及荧光观察 | 第36-37页 |
| ·引物的设计与合成 | 第37页 |
| ·实验设计 | 第37-39页 |
| ·SB介导的表达载体pT2-SV40-GFP构建 | 第37页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP的构建 | 第37-38页 |
| ·三种SB转座酶表达质粒SB100X、SB16、SB11转座活性比较 | 第38页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP和SB100x转染质量比优 | 第38页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP和PB转座酶表达质粒PBase转染质量比优化 | 第38页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP和Tol2转座酶表达质粒Tol2TBase转染质量比优化 | 第38页 |
| ·SB、PB和Tol2转座效率比较 | 第38-39页 |
| 3. 实验结果 | 第39-69页 |
| ·PT2-SV40-GFP与pT3-PST-CAG-GFP载体构建与细胞表达验证 | 第39-43页 |
| ·EGFP编码区克隆及序列测定 | 第39页 |
| ·SV40-EGFP酶切结果 | 第39-40页 |
| ·pT2-SV40-EGFP构建及鉴定 | 第40-41页 |
| ·PT2-SV40-EGFP细胞表达验证 | 第41页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP细胞表达验证 | 第41-43页 |
| ·SB100X/SB16/SB11转座酶在PEF和MEF细胞中转座活性比较 | 第43-48页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP与SB100X/SB16/SB11共转PEF细胞 | 第43-45页 |
| ·pT3-PST-CAG-GFP与SB100X/SB16/SB11共转染MEF细胞 | 第45-48页 |
| ·SB转座子系统在PEF和MEF细胞中转座活性优化研究 | 第48-54页 |
| ·SB转座子和转座酶以不同质量比共转染PEF细胞 | 第48-50页 |
| ·SB转座子和转座酶以不同比例共转染MEF细胞 | 第50-54页 |
| ·PB转座子系统在PEF和MEF细胞中转座活性优化研究 | 第54-59页 |
| ·PB转座子和转座酶以不同质量比例共转染PEF细胞 | 第54-56页 |
| ·PB转座子和转座酶以不同质量比例共转染MEF细胞 | 第56-59页 |
| ·Tol2转座子系统在PEF和MEF细胞中转座活性优化研究 | 第59-64页 |
| ·Tol2转座子和转座酶以不同质量比共转染PEF细胞 | 第59-61页 |
| ·Tol2转座子和转座酶以不同质量比共转染MEF细胞 | 第61-64页 |
| ·SB、PB和Tol2转座子系统在PEF和MEF细胞中转座活性比较 | 第64-69页 |
| ·SB/Tol2/PB在PEF细胞中转座活性比较 | 第64-66页 |
| ·SB/Tol2/PB在MEF细胞中转座活性比较 | 第66-69页 |
| 4. 讨论 | 第69-73页 |
| 全文结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间发表学术论文 | 第79-80页 |
