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小麦WK蛋白激酶互作候选蛋白的初步验证及其分子生物学特性分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 文献综述第8-18页
   ·植物蛋白激酶的研究进展第8-10页
     ·植物蛋白激酶的结构第8页
     ·植物蛋白激酶的分类第8-9页
     ·植物蛋白激酶在信号转导通路中的作用第9-10页
   ·植物中与抗逆信号相关的蛋白激酶第10-12页
     ·促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)第10-11页
     ·钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶(CDPKs)第11页
     ·类受体蛋白激酶(RLKs)第11-12页
     ·蔗糖不发酵相关蛋白激酶(SNRKs)第12页
   ·蛋白之间相互作用的研究方法第12-15页
     ·酵母双杂交技术第13页
     ·双分子荧光互补技术第13-14页
     ·GST PULL DOWN技术第14-15页
   ·研究的目的和意义第15-18页
     ·目的和意义第15-16页
     ·主要研究内容第16-17页
     ·技术路线第17-18页
第二章 蛋白激酶WK与WD40、MAPK3的互作验证第18-30页
   ·实验材料、仪器及试剂第18页
     ·材料、载体和菌株第18页
     ·试剂和仪器第18页
   ·实验方法第18-23页
     ·WK、WD40和MAPK3基因的克隆及载体的构建第18-20页
     ·酵母双杂交第20-23页
   ·实验结果与分析第23-28页
     ·WK、WD40、MAPK3基因的扩增及载体的构建第23-26页
     ·自激活验证第26-27页
     ·酵母双杂验证WD40、MAPK3与WK的互作第27-28页
   ·讨论第28-30页
第三章 WD40和MAPK3的表达特性及组织特异性分析第30-37页
   ·实验材料、仪器及试剂第30页
     ·植物材料第30页
     ·试剂与仪器第30页
   ·实验方法第30-32页
     ·植物材料的处理第30页
     ·小白麦总RNA的提取第30-31页
     ·小白麦cDNA的合成第31页
     ·实时定量RT-PCR第31-32页
   ·实验结果与分析第32-35页
     ·小麦总RNA的提取第32-33页
     ·WD40的表达特异性分析第33页
     ·MAPK3的表达特性分析第33-34页
     ·WD40与MAPK3的组织特异性及表达模式分析第34-35页
   ·讨论第35-37页
第四章 WD40和MAPK3的亚细胞定位第37-45页
   ·实验材料、仪器及试剂第37页
   ·实验方法第37-39页
     ·载体的构建第37页
     ·小麦原生质体的制备第37-39页
     ·基因枪轰击洋葱表皮第39页
   ·实验结果与分析第39-44页
     ·WD40、MAPK3与16318HGFP载体的构建第39-43页
     ·WD40亚细胞定位第43页
     ·MAPK3亚细胞定位第43-44页
   ·讨论第44-45页
第五章 转基因植株的获得与繁殖第45-51页
   ·实验材料、仪器及试剂第45页
     ·植物材料与菌株第45页
     ·试剂与仪器第45页
   ·实验方法第45-48页
     ·载体的构建第45页
     ·农杆菌的制备与转化第45-46页
     ·MS培养基的配制第46-47页
     ·拟南芥种子的消毒与播种第47页
     ·拟南芥的侵染第47页
     ·转基因拟南芥的蹄选第47-48页
   ·实验结果与分析第48-51页
     ·WD40和MAPK3与植物转化载体PBI121的构建第48-49页
     ·转基因拟南芥的筛选与繁殖第49-51页
第六章 结论第51-52页
参考文献第52-56页
致谢第56-57页
附录第57-58页
作者简介第58页

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