| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| ·雌雄异株植物性别分化研究概况 | 第12-19页 |
| ·雌雄异株植物性别表现的多样性 | 第12-13页 |
| ·雌雄异株植物性别决定方式的多样性 | 第13-16页 |
| ·雌雄异株植物性别分化研究进展 | 第16-19页 |
| ·菠菜性别分化研究概况 | 第19-21页 |
| ·抑制性消减杂交（SSH）技术概述及应用 | 第21-23页 |
| ·EST 序列的生物信息学分析 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-40页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·仪器设备 | 第26页 |
| ·主要试剂盒、试剂及配方 | 第26-29页 |
| ·菠菜总 RNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第29页 |
| ·RNA 样品纯度、产量和完整性检测 | 第29-30页 |
| ·双链 cDNA 的制备 | 第30-31页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第30页 |
| ·cDNA 第二链合成 | 第30-31页 |
| ·SSH 杂交 | 第31-36页 |
| ·RsaⅠ酶切 | 第31-32页 |
| ·接头连接 | 第32-33页 |
| ·第一次杂交 | 第33页 |
| ·第二次杂交 | 第33-34页 |
| ·PCR 扩增 | 第34-36页 |
| ·SSH 文库的构建 | 第36-37页 |
| ·连接 | 第36页 |
| ·转化 | 第36-37页 |
| ·挑取单克隆 | 第37页 |
| ·PCR 验证 | 第37页 |
| ·斑点杂交 | 第37-38页 |
| ·测序及 EST 序列功能分析 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-48页 |
| ·总 RNA 提取质量检测 | 第40-41页 |
| ·Ds-cDNA 合成及 LD-PCR 效率检测结果 | 第41页 |
| ·纯化及 RsaⅠ酶切效率检测 | 第41-42页 |
| ·接头连接效率检测 | 第42-43页 |
| ·消减杂交效率检测 | 第43-44页 |
| ·SSH 产物克隆及菌落 PCR 检测结果 | 第44页 |
| ·斑点杂交确认差异阳性克隆 | 第44-45页 |
| ·EST 序列生物信息学分析 | 第45-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| ·RNA 提取问题 | 第48-49页 |
| ·SSH 对菠菜 cDNA 进行的差异基因筛选 | 第49-50页 |
| ·斑点验证需要注意的一些问题 | 第50页 |
| ·EST 序列功能分析及其利用 | 第50-51页 |
| ·半定量及荧光定量 PCR 功能验证 | 第51页 |
| ·下一步需要开展的工作 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第106-107页 |