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山羊生长激素基因乳腺特异性基因打靶载体的构建及阳性细胞株的筛选

目录第1-6页
引言第6-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
第一篇 文献综述第12-36页
 第一章 GH在转基因动物研究中的应用第12-22页
  1 山羊GH的研究进展第12-15页
   ·GH的分布与其在山羊乳腺血浆中的含量变化第12-13页
   ·GH的生物学功能分析第13-15页
  2 GH转基因动物的研究进展第15-19页
   ·GH与转基因动物第16页
   ·转GH基因山羊的生物安全性分析第16-17页
   ·小结第17-19页
  参考文献第19-22页
 第二章 乳腺基因打靶载体的研究进展第22-36页
  1 基因打靶载体的基础理论第22-26页
   ·基因打靶技术的原理和方法第22-23页
   ·影响基因打靶效率的因素第23-25页
   ·基因打靶技术的安全性研究进展第25-26页
  2 乳腺基因打靶技术第26-29页
   ·乳蛋白基因位点第26-28页
   ·启动子和增强子第28-29页
   ·非翻译区第29页
  3 乳腺体细胞基因打靶核移植技术在家畜转基因研究中的应用第29-32页
   ·胚胎干细胞基因打靶技术第29-30页
   ·体细胞基因打靶核移植技术第30页
   ·乳腺体细胞基因打靶核移植技术的应用前景与存在的问题第30-32页
  参考文献第32-36页
第二篇 试验研究第36-82页
 第三章 山羊β-酪蛋白基因5’和3’调控元件克隆及功能验证第36-56页
  摘要第36-37页
  1 材料和方法第37-44页
   ·材料和仪器第37-38页
   ·试验方法第38-44页
  2 结果与分析第44-52页
   ·山羊基因组DNA的提取第44页
   ·β -酪蛋白5’端调控元件的克隆第44-47页
   ·β-酪蛋白3’端调控元件的克隆第47-48页
   ·GFP基因cDNA的克隆第48-49页
   ·基因打靶载体pGFP的构建和酶切验证第49-50页
   ·pGFP质粒瞬时转染Bcap-37细胞检测GFP的表达第50-52页
  3 讨论第52-54页
  参考文献第54-56页
 第四章 山羊GH基因乳腺特异性打靶载体pLG的构建及其生物学功能验证第56-70页
  摘要第56页
  1 材料和方法第56-60页
   ·材料和仪器第56-57页
   ·试验方法第57-60页
  2 结果与分析第60-65页
   ·山羊GH基因乳腺特异性打靶载体pLG的构建第60-63页
   ·基因打靶载体pLG表达效率的验证第63-65页
  3 讨论第65-68页
  参考文献第68-70页
 第五章 山羊GH基因乳腺特异性打靶载体pLG转染山羊耳皮成纤维细胞和细胞筛选第70-82页
  摘要第70页
  1 材料和方法第70-73页
   ·材料和仪器第70-71页
   ·试验方法第71-73页
  2 结果与分析第73-77页
   ·山羊耳皮成纤维细胞G418梯度抗性试验第73页
   ·基因打靶载体pLG转染山羊耳皮成纤维细胞与细胞筛选第73页
   ·单克隆细胞的PCR验证第73-77页
  3 讨论第77-79页
  参考文献第79-82页
全文总结第82-84页
攻读学位期间发表的文章、发明专利及奖项第84-86页
致谢第86页

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