| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 研究背景 | 第11-25页 |
| 第一节 神经内分泌免疫调节系统简介 | 第11页 |
| 第二节 阿片肽能神经内分泌免疫调节系统概述 | 第11-16页 |
| 一、 阿片肽能神经内分泌免疫调节系统的组成 | 第12-14页 |
| 二、 阿片肽能神经内分泌免疫调节系统的功能 | 第14页 |
| 三、 阿片肽能神经内分泌免疫调节系统的作用机制 | 第14-16页 |
| 第三节 脑啡肽-脑啡肽受体通路概述 | 第16-21页 |
| 一、 脑啡肽-脑啡肽受体通路的组成 | 第16-18页 |
| 二、 脑啡肽-脑啡肽受体通路的功能 | 第18-20页 |
| 三、 脑啡肽-脑啡肽受体通路的调控机制 | 第20-21页 |
| 第四节 无脊椎动物脑啡肽能神经内分泌免疫调节系统的研究进展 | 第21-23页 |
| 一、 无脊椎动物的脑啡肽能神经内分泌系统 | 第21-22页 |
| 二、 无脊椎动物中脑啡肽的免疫调节功能 | 第22-23页 |
| 第五节 本研究的主要目的及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第25-44页 |
| 第一节 实验材料 | 第25-30页 |
| 一、 实验仪器设备 | 第25-26页 |
| 二、 实验动物、菌株及细胞株 | 第26-27页 |
| 三、 实验试剂及引物信息 | 第27-30页 |
| 第二节 实验方法 | 第30-44页 |
| 一、 血淋巴细胞滴片、组织石蜡切片的制备 | 第30页 |
| 二、 免疫荧光组化 | 第30-31页 |
| 三、 鳗弧菌刺激实验 | 第31-32页 |
| 四、 血淋巴上清液中 Met-ENK 和 GAPDH 浓度的测定 | 第32-33页 |
| 五、 血淋巴与 Met-ENK 的孵育 | 第33页 |
| 六、 免疫相关酶活测定 | 第33-35页 |
| 七、 血淋巴细胞吞噬活性的测定 | 第35页 |
| 八、 TNF-α 活性的测定 | 第35-36页 |
| 九、 PAMPs 刺激及组织材料的收集 | 第36-37页 |
| 十、 总 RNA 制备 | 第37页 |
| 十一、RACE 技术获得 CfOGFR 基因 cDNA 全长序列 | 第37-38页 |
| 十二、荧光实时定量 PCR | 第38页 |
| 十三、目的基因的克隆测序 | 第38-39页 |
| 十四、重组质粒的构建 | 第39-40页 |
| 十五、质粒的制备 | 第40页 |
| 十六、蛋白的原核重组、表达、纯化及复性 | 第40-41页 |
| 十七、免疫血清的制备及鉴定 | 第41页 |
| 十八、Western blot | 第41页 |
| 十九、免疫共沉淀（Co-IP） | 第41-42页 |
| 二十、外源基因的瞬时转染 | 第42-43页 |
| 二十一、细胞增殖及毒性实验 | 第43页 |
| 二十二、数据分析方法 | 第43-44页 |
| 第三章 实验结果 | 第44-61页 |
| 第一节 栉孔扇贝中 ENK 的组织分布 | 第44-45页 |
| 第二节 鳗弧菌刺激后栉孔扇贝血清中 Met-ENK 的含量变化 | 第45-46页 |
| 第三节 血淋巴与 Met-ENK 孵育后下游免疫指标的变化 | 第46-50页 |
| 一、 血淋巴上清液中的免疫相关酶活 | 第46-49页 |
| 二、 Met-ENK 对血淋巴细胞吞噬活性的影响 | 第49-50页 |
| 三、 Met-ENK 对血淋巴上清液中 TNF-α 活性的影响 | 第50页 |
| 第四节 阿片肽生长因子受体基因的克隆与 mRNA 表达规律分析 | 第50-57页 |
| 一、 CfOGFR 基因的克隆 | 第50页 |
| 二、 CfOGFR 基因的分子特征 | 第50-55页 |
| 三、 CfOGFR 基因 mRNA 的表达特征 | 第55-57页 |
| 第五节 Met-ENK 与 CfOGFR 的相互作用 | 第57-61页 |
| 一、 CfOGFR 的原核表达及其多克隆抗体制备 | 第57-59页 |
| 二、 Met-ENK 与 CfOGFR 的特异性结合 | 第59-60页 |
| 三、 Met-ENK/CfOGFR 对 HEK293T 细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
| 第四章 分析与讨论 | 第61-68页 |
| 第一节 栉孔扇贝脑啡肽能神经内分泌系统的结构特征及功能验证 | 第62-65页 |
| 一、 栉孔扇贝脑啡肽的组织分布 | 第62-63页 |
| 二、 栉孔扇贝阿片肽生长因子受体基因的确定 | 第63页 |
| 三、 栉孔扇贝阿片肽生长因子受体的功能验证 | 第63-64页 |
| 四、 CfOGFR mRNA 的组织分布及其在栉孔扇贝胚胎发育过程中的时序表达 | 第64-65页 |
| 第二节 栉孔扇贝脑啡肽能神经内分泌系统参与了扇贝的免疫应答反应 | 第65-66页 |
| 第三节 脑啡肽对栉孔扇贝固有免疫应答的调节作用 | 第66-68页 |
| 第五章 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第81页 |
