中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
前言 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-32页 |
第一章 天然产物中寡肽的研究进展 | 第13-23页 |
第一节 寡肽提取、分离纯化方法研究进展 | 第13-16页 |
1 寡肽类物质提取方法的研究进展 | 第13页 |
2 寡肽类物质分离和纯化方法的研究进展 | 第13-16页 |
第二节 蛋白类薄层检识研究进展 | 第16-19页 |
1 通用显色剂 | 第16-18页 |
·茚三酮显色剂的研究进展 | 第16-17页 |
·双缩脲试剂的研究进展 | 第17-18页 |
2 含有特殊官能团的蛋白类显色剂考察 | 第18-19页 |
·酪氨酸的显色反应研究进展 | 第18页 |
·色氨酸的显色反应研究进展 | 第18-19页 |
·组氨酸的显色反应研究进展 | 第19页 |
·精氨酸的显色反应研究进展 | 第19页 |
第三节 寡肽含量测定方法研究进展 | 第19-21页 |
1 定氮法 | 第20页 |
2 双缩脲比色法 | 第20页 |
3 Folin-酚试剂法(又称Lowry法) | 第20页 |
4 BCA法 | 第20页 |
5 Bradford法 | 第20-21页 |
第四节 寡肽药理作用研究进展 | 第21-22页 |
本章总结与展望 | 第22-23页 |
第二章 药物-蛋白结合作用研究进展 | 第23-26页 |
1 平衡透析法 | 第23页 |
2 超滤法 | 第23-24页 |
3 微透析法 | 第24页 |
4 毛细管电泳法 | 第24页 |
5 表面等离子共振法 | 第24-26页 |
第三章 模拟胃肠液相关研究 | 第26-32页 |
1 胃液 | 第26页 |
2 胰液 | 第26-27页 |
3 胆汁 | 第27页 |
4 小肠液 | 第27-28页 |
5 模拟胃肠液消化条件 | 第28-29页 |
6 外源蛋白在模拟胃肠环境中稳定性和水解度方法 | 第29-31页 |
·稳定性测定 | 第29页 |
·水解度测定 | 第29-31页 |
7 总结和讨论 | 第31-32页 |
第二部分 实验研究 | 第32-74页 |
第一章 醋炙鳖甲中寡肽含量测定和薄层检识研究 | 第32-41页 |
第一节 基于醋炙鳖甲肽类分离过程定量方法的考察 | 第32-37页 |
1 材料 | 第32页 |
·药物和试剂 | 第32页 |
·仪器 | 第32页 |
2 方法和结果 | 第32-37页 |
·波长的确定 | 第32页 |
·对照品溶液的制备 | 第32-33页 |
·供试品溶液的制备 | 第33页 |
·双缩脲显色反应各试剂用量的考察 | 第33-34页 |
·线性关系的考察 | 第34-35页 |
·精密度试验 | 第35页 |
·重复性试验 | 第35页 |
·显色稳定性试验 | 第35页 |
·加样回收率试验 | 第35页 |
·生鳖甲和醋鳖甲中肽类含量测定 | 第35-36页 |
·醋鳖甲分离过程紫外在线监测和双缩脲显色在线监测比较 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37页 |
第二节 含特殊官能团氨基酸寡肽的薄层显色探讨 | 第37-41页 |
1 试剂和材料 | 第37-38页 |
2 样品制备 | 第38页 |
3 含有特殊官能团肽类的薄层显色反应方法 | 第38页 |
4 结果与讨论 | 第38-39页 |
·茚三酮薄层显色反应 | 第38页 |
·含组氨酸(咪唑基)的肽类薄层显色鉴定 | 第38-39页 |
·含酪氨酸(对位取代酚)的肽类薄层显色鉴定 | 第39页 |
·含色氨酸(吲哚环)的肽类 | 第39页 |
·含精氨酸(胍基)的肽类 | 第39页 |
5 讨论及应用 | 第39-41页 |
第二章 鳖甲七肽与小鼠体外各组织蛋白结合研究 | 第41-48页 |
第一节 鳖甲七肽与小鼠肝组织蛋白结合研究 | 第41-45页 |
1 材料与仪器 | 第41页 |
·仪器 | 第41页 |
·药品与试剂 | 第41页 |
·动物 | 第41页 |
2 方法 | 第41-42页 |
·溶液的配制 | 第41页 |
·双缩脲反应-酶联免疫检测仪联用测定含药透析液含量方法 | 第41-42页 |
·肝组织蛋白结合率的测定 | 第42页 |
·统计方法 | 第42页 |
3 结果 | 第42-44页 |
·线性关系考察 | 第42页 |
·精密度考察 | 第42页 |
·显色稳定性考察 | 第42页 |
·肝组织蛋白结合率的测定 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-45页 |
第二节 鳖甲七肽I-C-f与各组织蛋白结合率比较 | 第45-48页 |
1 材料与仪器 | 第45-46页 |
·受试动物 | 第45页 |
·仪器和试剂 | 第45页 |
·主要试剂配制 | 第45-46页 |
2 方法 | 第46页 |
·96孔板测定蛋白含量(Bradford法) | 第46页 |
·平衡透析结合双缩脲反应-酶联免疫检测仪测定鳖甲七肽的相互作用 | 第46页 |
3 结果和讨论 | 第46-48页 |
第三章 鳖甲W-A-80模拟胃肠液消化研究 | 第48-54页 |
1 材料与仪器 | 第48页 |
·药物和试剂 | 第48页 |
·仪器 | 第48页 |
·动物 | 第48页 |
2 方法和结果 | 第48-52页 |
·试剂配制 | 第48页 |
·鳖甲水提物W-A-80的制备 | 第48-49页 |
·鳖甲水提物W-A-80在人工胃液酶解程度检测 | 第49-50页 |
·鳖甲水提物W-A-80胃蛋白酶酶底比考察 | 第49页 |
·鳖甲水提物W-A-80人工胃液反应因素和反应时间的考察 | 第49-50页 |
·鳖甲水提物W-A-80人工肠液酶解程度检测 | 第50-51页 |
·鳖甲水提物W-A-80胰蛋白酶酶底比的考察 | 第50-51页 |
·鳖甲水提物W-A-80人工肠液反应时间的考察 | 第51页 |
·模拟胃/肠液酶解寡肽与肝组织蛋白结合率测定 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
第四章 鳖甲寡肽化合物分离纯化 | 第54-72页 |
第一节 鳖甲寡肽的初步分离及有效部位的确定 | 第54-56页 |
1 材料 | 第54页 |
·药材与试剂 | 第54页 |
·仪器 | 第54页 |
·实验动物 | 第54页 |
2 实验方法 | 第54-55页 |
·水提醇沉实验 | 第54页 |
·各醇沉部位薄层显色 | 第54-55页 |
·各醇沉部位单胺氧化酶活性测定 | 第55页 |
3 结果 | 第55-56页 |
·各部位所得净含量、比重和肽含量结果 | 第55页 |
·阳性药和各部位对单胺氧化酶(MAO)的活性影响 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56页 |
第二节 反相柱层析对80%醇沉部位纯化 | 第56-60页 |
1 材料 | 第56-57页 |
·药材与试剂 | 第56页 |
·仪器 | 第56-57页 |
2 方法和结果 | 第57-59页 |
·80%醇沉部位模拟肠液消化初试 | 第57页 |
·各分离部位肽含量测定 | 第57-58页 |
·各分离部位液相检测 | 第58-59页 |
·各分离部位单胺氧化酶活性 | 第59页 |
3 讨论 | 第59-60页 |
第三节 色谱联用法对R-8%部位纯化 | 第60-64页 |
1 材料 | 第60页 |
·药材与试剂 | 第60页 |
·仪器 | 第60页 |
2 方法 | 第60页 |
3 结果 | 第60-63页 |
·第一次葡聚糖凝胶ScphadcxLH-20色谱分离结果 | 第60-62页 |
·第二次葡聚糖凝胶ScphadcxLH-20色谱分离结果 | 第62-63页 |
·R-8%-L2-c葡聚糖凝胶ScphadcxG-10色谱分离结果 | 第63页 |
4 讨论 | 第63-64页 |
第四节 色谱联用法对R-35%部位纯化 | 第64-71页 |
1 材料 | 第64页 |
·药材与试剂 | 第64页 |
·仪器 | 第64页 |
2. 方法和结果 | 第64-70页 |
·R-35%上SephadcxLH-20色谱分离结果及MAO活性 | 第65-66页 |
·R-35%-Ll-b上Scphadcx G-10色谱纯化结果 | 第66页 |
·R-35%-Ll-b-G-10活性成分的质谱分析 | 第66-70页 |
3 讨论 | 第70-71页 |
本章小结 | 第71-72页 |
第五章 总结与讨论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
个人简历 | 第82页 |