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基于鳖甲功效的先导化合物的发现研究(二)--鳖甲寡肽快速检测方法及模拟胃肠液消化研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-12页
前言第12-13页
第一部分 文献综述第13-32页
 第一章 天然产物中寡肽的研究进展第13-23页
  第一节 寡肽提取、分离纯化方法研究进展第13-16页
   1 寡肽类物质提取方法的研究进展第13页
   2 寡肽类物质分离和纯化方法的研究进展第13-16页
  第二节 蛋白类薄层检识研究进展第16-19页
   1 通用显色剂第16-18页
   ·茚三酮显色剂的研究进展第16-17页
   ·双缩脲试剂的研究进展第17-18页
   2 含有特殊官能团的蛋白类显色剂考察第18-19页
   ·酪氨酸的显色反应研究进展第18页
   ·色氨酸的显色反应研究进展第18-19页
   ·组氨酸的显色反应研究进展第19页
   ·精氨酸的显色反应研究进展第19页
  第三节 寡肽含量测定方法研究进展第19-21页
   1 定氮法第20页
   2 双缩脲比色法第20页
   3 Folin-酚试剂法(又称Lowry法)第20页
   4 BCA法第20页
   5 Bradford法第20-21页
  第四节 寡肽药理作用研究进展第21-22页
  本章总结与展望第22-23页
 第二章 药物-蛋白结合作用研究进展第23-26页
  1 平衡透析法第23页
  2 超滤法第23-24页
  3 微透析法第24页
  4 毛细管电泳法第24页
  5 表面等离子共振法第24-26页
 第三章 模拟胃肠液相关研究第26-32页
  1 胃液第26页
  2 胰液第26-27页
  3 胆汁第27页
  4 小肠液第27-28页
  5 模拟胃肠液消化条件第28-29页
  6 外源蛋白在模拟胃肠环境中稳定性和水解度方法第29-31页
   ·稳定性测定第29页
   ·水解度测定第29-31页
  7 总结和讨论第31-32页
第二部分 实验研究第32-74页
 第一章 醋炙鳖甲中寡肽含量测定和薄层检识研究第32-41页
  第一节 基于醋炙鳖甲肽类分离过程定量方法的考察第32-37页
   1 材料第32页
   ·药物和试剂第32页
   ·仪器第32页
   2 方法和结果第32-37页
   ·波长的确定第32页
   ·对照品溶液的制备第32-33页
   ·供试品溶液的制备第33页
   ·双缩脲显色反应各试剂用量的考察第33-34页
   ·线性关系的考察第34-35页
   ·精密度试验第35页
   ·重复性试验第35页
   ·显色稳定性试验第35页
   ·加样回收率试验第35页
   ·生鳖甲和醋鳖甲中肽类含量测定第35-36页
   ·醋鳖甲分离过程紫外在线监测和双缩脲显色在线监测比较第36-37页
   3 讨论第37页
  第二节 含特殊官能团氨基酸寡肽的薄层显色探讨第37-41页
   1 试剂和材料第37-38页
   2 样品制备第38页
   3 含有特殊官能团肽类的薄层显色反应方法第38页
   4 结果与讨论第38-39页
   ·茚三酮薄层显色反应第38页
   ·含组氨酸(咪唑基)的肽类薄层显色鉴定第38-39页
   ·含酪氨酸(对位取代酚)的肽类薄层显色鉴定第39页
   ·含色氨酸(吲哚环)的肽类第39页
   ·含精氨酸(胍基)的肽类第39页
   5 讨论及应用第39-41页
 第二章 鳖甲七肽与小鼠体外各组织蛋白结合研究第41-48页
  第一节 鳖甲七肽与小鼠肝组织蛋白结合研究第41-45页
   1 材料与仪器第41页
   ·仪器第41页
   ·药品与试剂第41页
   ·动物第41页
   2 方法第41-42页
   ·溶液的配制第41页
   ·双缩脲反应-酶联免疫检测仪联用测定含药透析液含量方法第41-42页
   ·肝组织蛋白结合率的测定第42页
   ·统计方法第42页
   3 结果第42-44页
   ·线性关系考察第42页
   ·精密度考察第42页
   ·显色稳定性考察第42页
   ·肝组织蛋白结合率的测定第42-44页
   4 讨论第44-45页
  第二节 鳖甲七肽I-C-f与各组织蛋白结合率比较第45-48页
   1 材料与仪器第45-46页
   ·受试动物第45页
   ·仪器和试剂第45页
   ·主要试剂配制第45-46页
   2 方法第46页
   ·96孔板测定蛋白含量(Bradford法)第46页
   ·平衡透析结合双缩脲反应-酶联免疫检测仪测定鳖甲七肽的相互作用第46页
   3 结果和讨论第46-48页
 第三章 鳖甲W-A-80模拟胃肠液消化研究第48-54页
  1 材料与仪器第48页
   ·药物和试剂第48页
   ·仪器第48页
   ·动物第48页
  2 方法和结果第48-52页
   ·试剂配制第48页
   ·鳖甲水提物W-A-80的制备第48-49页
   ·鳖甲水提物W-A-80在人工胃液酶解程度检测第49-50页
     ·鳖甲水提物W-A-80胃蛋白酶酶底比考察第49页
     ·鳖甲水提物W-A-80人工胃液反应因素和反应时间的考察第49-50页
   ·鳖甲水提物W-A-80人工肠液酶解程度检测第50-51页
     ·鳖甲水提物W-A-80胰蛋白酶酶底比的考察第50-51页
     ·鳖甲水提物W-A-80人工肠液反应时间的考察第51页
   ·模拟胃/肠液酶解寡肽与肝组织蛋白结合率测定第51-52页
  3 讨论第52-54页
 第四章 鳖甲寡肽化合物分离纯化第54-72页
  第一节 鳖甲寡肽的初步分离及有效部位的确定第54-56页
   1 材料第54页
   ·药材与试剂第54页
   ·仪器第54页
   ·实验动物第54页
   2 实验方法第54-55页
   ·水提醇沉实验第54页
   ·各醇沉部位薄层显色第54-55页
   ·各醇沉部位单胺氧化酶活性测定第55页
   3 结果第55-56页
   ·各部位所得净含量、比重和肽含量结果第55页
   ·阳性药和各部位对单胺氧化酶(MAO)的活性影响第55-56页
   4 讨论第56页
  第二节 反相柱层析对80%醇沉部位纯化第56-60页
   1 材料第56-57页
   ·药材与试剂第56页
   ·仪器第56-57页
   2 方法和结果第57-59页
   ·80%醇沉部位模拟肠液消化初试第57页
   ·各分离部位肽含量测定第57-58页
   ·各分离部位液相检测第58-59页
   ·各分离部位单胺氧化酶活性第59页
   3 讨论第59-60页
  第三节 色谱联用法对R-8%部位纯化第60-64页
   1 材料第60页
   ·药材与试剂第60页
   ·仪器第60页
   2 方法第60页
   3 结果第60-63页
   ·第一次葡聚糖凝胶ScphadcxLH-20色谱分离结果第60-62页
   ·第二次葡聚糖凝胶ScphadcxLH-20色谱分离结果第62-63页
   ·R-8%-L2-c葡聚糖凝胶ScphadcxG-10色谱分离结果第63页
   4 讨论第63-64页
  第四节 色谱联用法对R-35%部位纯化第64-71页
   1 材料第64页
   ·药材与试剂第64页
   ·仪器第64页
   2. 方法和结果第64-70页
   ·R-35%上SephadcxLH-20色谱分离结果及MAO活性第65-66页
   ·R-35%-Ll-b上Scphadcx G-10色谱纯化结果第66页
   ·R-35%-Ll-b-G-10活性成分的质谱分析第66-70页
   3 讨论第70-71页
  本章小结第71-72页
 第五章 总结与讨论第72-74页
参考文献第74-81页
致谢第81-82页
个人简历第82页

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