| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-29页 |
| 第一章 肠道微生物与寄主的共生关系研究进展 | 第15-26页 |
| ·引言 | 第15页 |
| ·肠道微生物与寄主的共生关系类型 | 第15-16页 |
| ·肠道内微生物群系的建立 | 第16页 |
| ·肠道微生物的多样性 | 第16-17页 |
| ·肠道微生物的附着 | 第17-18页 |
| ·肠道微生物对肠道免疫及疾病治疗的影响 | 第18-19页 |
| ·肠道微生物对肠道免疫反应的影响 | 第18页 |
| ·肠道微生物对免疫系统发育的影响 | 第18页 |
| ·肠道微生物对寄主治疗肠炎的影响 | 第18-19页 |
| ·肠道微生物对寄主治疗代谢紊乱的影响 | 第19页 |
| ·肠道微生物对寄主肠道发育和能量平衡的影响 | 第19-21页 |
| ·肠道微生物对寄主肠道发育的影响 | 第19-20页 |
| ·肠道微生物对寄主能量平衡的影响 | 第20页 |
| ·肠道微生物影响寄主能量平衡的机理 | 第20-21页 |
| ·利用肠道微生物促进人体健康及畜禽生产的可行性探讨 | 第21页 |
| ·肠道微生物与寄主间的串扰(bacterial-epithelial “crosstalk”) | 第21-24页 |
| ·病原菌的侵入 | 第21-22页 |
| ·寄主的免疫调节 | 第22页 |
| ·共生微生物的免疫调节 | 第22页 |
| ·寄主肠道粘膜细胞、共生微生物、致病微生物之间的互作机制 | 第22-23页 |
| ·哺乳动物细胞内的TLR/NOD信号通路 | 第23-24页 |
| ·结语 | 第24-26页 |
| 第二章 丁酸梭菌的研究进展 | 第26-29页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·丁酸梭菌的医用价值 | 第26页 |
| ·丁酸梭菌作为微生态制剂在畜牧领域中的应用价值 | 第26-27页 |
| ·丁酸梭菌在水产养殖中的研究 | 第26页 |
| ·丁酸梭菌在仔猪饲养中的研究 | 第26-27页 |
| ·丁酸梭菌在养鸡业中的研究 | 第27页 |
| ·丁酸梭菌治疗肠道疾病和促进动物生产的可能机制 | 第27页 |
| ·丁酸梭菌的抗逆性强 | 第27页 |
| ·丁酸梭菌可维持肠道生态平衡 | 第27页 |
| ·丁酸梭菌可提供寄主需要的营养物质 | 第27页 |
| ·结语 | 第27-29页 |
| 第二部分 研究内容 | 第29-84页 |
| 第一章 丁酸梭菌对HT-29细胞的免疫刺激作用 | 第29-45页 |
| ·引言 | 第29-30页 |
| ·材料和方法 | 第30-38页 |
| ·试验试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| ·细菌培养 | 第31页 |
| ·细胞培养 | 第31页 |
| ·丁酸梭菌处理HT-29细胞 | 第31-32页 |
| ·IL-8浓度的测定 | 第32页 |
| ·RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·反转录PCR分析 | 第33-35页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第35-36页 |
| ·Western blot分析 | 第36-38页 |
| ·数据分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-43页 |
| ·丁酸梭菌对HT-29细胞TLR2、TLR4、TLR5、TLR9 mRNA表达水平的影响 | 第38-39页 |
| ·丁酸梭菌对HT-29细胞NF-KB活化的影响 | 第39页 |
| ·丁酸梭菌对HT-29细胞MyD88表达水平的影响 | 第39页 |
| ·丁酸梭菌对HT-29细胞IL-8、IL-6、TNF-α表达水平的影响 | 第39-41页 |
| ·丁酸梭菌对HT-29细胞Hsp70、IL-10表达水平的影响 | 第41-42页 |
| ·比较分析丁酸梭菌和EHEC诱导的NF-κB活化和TNF-α、IL-8的表达 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第二章 TLR2/MyD88信号通路在丁酸梭菌诱导的免疫反应中的作用 | 第45-53页 |
| ·引言 | 第45页 |
| ·材料和方法 | 第45-47页 |
| ·试验试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45-46页 |
| ·细菌培养 | 第46页 |
| ·细胞培养 | 第46页 |
| ·SiRNA的转染 | 第46页 |
| ·丁酸梭菌处理细胞 | 第46-47页 |
| ·IL-8浓度的测定 | 第47页 |
| ·RNA的提取及实时荧光定量PCR分析 | 第47页 |
| ·Western blot分析 | 第47页 |
| ·数据分析 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-51页 |
| ·敲除TLR2对丁酸梭菌诱导的NF-κB活化的影响 | 第47-49页 |
| ·敲除TLR2对丁酸梭菌诱导的IL-8、IL-6、TNF-α表达的影响 | 第49-50页 |
| ·敲除MyD88对丁酸梭菌诱导的NF-KB活化的影响 | 第50-51页 |
| ·敲除MyD88对丁酸梭菌诱导的1L-8、IL-6、TNF-α表达的影响 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第三章 TLR2蛋白功能区域分析 | 第53-61页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-54页 |
| ·同源模建人的TLR2 | 第53-54页 |
| ·分子对接 | 第54页 |
| ·跨膜分析 | 第54页 |
| ·信号肽分析 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-60页 |
| ·同源模建 | 第55页 |
| ·模型评价 | 第55-56页 |
| ·分子对接 | 第56-58页 |
| ·跨膜分析 | 第58-59页 |
| ·信号肽分析 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 第四章 IL-10在丁酸梭菌诱导的免疫调节中的作用 | 第61-71页 |
| ·引言 | 第61-62页 |
| ·材料和方法 | 第62-65页 |
| ·试验试剂 | 第62页 |
| ·主要仪器设备 | 第62页 |
| ·细菌培养 | 第62页 |
| ·细胞培养 | 第62页 |
| ·SiRNA的转染 | 第62页 |
| ·中和IL-10 | 第62页 |
| ·丁酸梭菌处理细胞 | 第62-63页 |
| ·IL-8浓度的测定 | 第63页 |
| ·RNA的提取及实时荧光定量PCR分析 | 第63页 |
| ·PI(碘化丙啶)染色 | 第63页 |
| ·Caspase-3活性测定 | 第63-65页 |
| ·DNA片段分析 | 第65页 |
| ·数据分析 | 第65页 |
| ·结果 | 第65-68页 |
| ·丁酸梭菌对HT-29细胞IL-10表达的影响 | 第65-66页 |
| ·中和IL-10对丁酸梭菌诱导的HT-29细胞NF-κB活化和IL-8表达的影响 | 第66页 |
| ·敲除IL-10对丁酸梭菌诱导的HT-29细胞NF-κB活化和IL-8表达的影响 | 第66-67页 |
| ·中和或敲除IL-10对丁酸梭菌诱导的细胞凋亡和坏死的影响 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| 第五章 丁酸梭菌对大肠杆菌诱导的鸡胚肠道细胞凋亡的抑制作用 | 第71-83页 |
| ·引言 | 第71-72页 |
| ·材料和方法 | 第72-76页 |
| ·试验试剂 | 第72页 |
| ·主要仪器设备 | 第72页 |
| ·细菌培养 | 第72页 |
| ·分离培养CEICs | 第72页 |
| ·抑菌试验 | 第72-73页 |
| ·粘附抑制试验 | 第73-74页 |
| ·细胞刺激试验 | 第74页 |
| ·反转录PCR分析 | 第74页 |
| ·Caspase酶活力分析 | 第74-75页 |
| ·Western blot分析 | 第75页 |
| ·Tunel分析 | 第75页 |
| ·流式细胞仪分析 | 第75页 |
| ·数据分析 | 第75-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-81页 |
| ·丁酸梭菌和其SCS对EHEC生长的影响 | 第76页 |
| ·丁酸梭菌和其SCS对EHEC粘附的影响 | 第76页 |
| ·丁酸梭菌和其SCS对EHEC诱导的细胞凋亡的影响 | 第76-77页 |
| ·丁酸梭菌和其SCS对EHEC诱导的XIAP、Bcl2、BclXL、P53、FAS、BAX的表达的影响 | 第77-79页 |
| ·丁酸梭菌和其SCS对EHEC诱导的Caspase-9和Caspase-3活化的影响 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 第六章 本研究的主要结论与创新点 | 第83-84页 |
| ·主要结论 | 第83页 |
| ·创新点 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 附录Ⅰ | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
