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抗TYLCV RNAi载体的构建及其转基因番茄的抗病性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第1章 绪论第9-17页
   ·课题背景第9-10页
     ·番茄研究进展第9页
     ·番茄的抗病研究第9-10页
   ·番茄黄化曲叶病毒病的研究进展第10-13页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的发生分布第10页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的发病症状第10页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的病原第10-11页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的传播途径第11-12页
     ·番茄黄化曲叶病毒病的防治第12页
     ·番茄抗番茄黄化曲叶病毒病的育种方法第12-13页
   ·RNAi 技术研究进展第13-16页
     ·RNAi 的研究背景第13-14页
     ·RNAi 的作用机制第14-15页
     ·RNAi 在植物中的应用第15-16页
   ·本研究的目的与意义第16-17页
第2章 TYLCV 基因保守序列的克隆及 RNAi 载体构建第17-34页
   ·材料与试剂第17-19页
     ·供试材料第17页
     ·培养基及溶液的配制第17页
     ·生化试剂及仪器设备第17-19页
   ·实验内容与方法第19-26页
     ·番茄(感病)基因组 DNA 的提取第19-20页
     ·TYLCV 基因目标序列的选择第20页
     ·PCR 引物的设计第20页
     ·TYLCV 基因保守序列的克隆第20-24页
     ·RNAi 载体正向片段的连接及鉴定第24-26页
     ·RNAi 载体反向片段的连接及鉴定第26页
   ·实验结果第26-33页
     ·番茄基因组 DNA 的提取第26页
     ·转化片段的选定及克隆第26-29页
     ·RNAi 载体 pFGC5941-FC1-RC1 的构建第29-31页
     ·RNAi 载体 pFGC5941-FC2-RC2 的构建第31-32页
     ·RNAi 载体 pFGC5941-FC1C2-RC1C2 的构建第32-33页
   ·讨论第33页
   ·本章小结第33-34页
第3章 RNAi 载体在番茄植株中的瞬时表达第34-42页
   ·材料与试剂第34页
     ·供试材料第34页
     ·培养基及溶液的配制第34页
   ·实验内容与方法第34-37页
     ·番茄苗的栽培第34页
     ·农杆菌的转化和鉴定第34-35页
     ·农杆菌的准备及注射第35-36页
     ·转化片段的检测第36-37页
     ·番茄植株的抗病性鉴定第37页
   ·实验结果第37-40页
     ·农杆菌中质粒的鉴定第37-38页
     ·转化片段的检测第38页
     ·番茄植株发病情况的观察第38-39页
     ·TYLCV 病毒 DNA 的检测第39-40页
   ·讨论第40-41页
   ·本章小结第41-42页
第4章 番茄再生体系的建立及转化条件的优化第42-53页
   ·材料与培养基第42-43页
     ·供试材料第42页
     ·MS 培养基的配制第42-43页
   ·实验内容与方法第43-45页
     ·番茄再生体系的建立第43-44页
     ·番茄转化方法的优化第44-45页
     ·转基因番茄阳性苗的鉴定第45页
   ·实验结果第45-51页
     ·番茄种子灭菌条件的摸索第45-46页
     ·不同激素配比对番茄愈伤组织和不定芽诱导的影响第46页
     ·不同激素浓度对番茄外植体生根的影响第46-48页
     ·草丁膦使用浓度的筛选第48-49页
     ·不同处理对番茄转化效率的影响第49-50页
     ·转基因阳性苗的筛选第50-51页
   ·讨论第51-52页
     ·不同外植体再生效率的区别第51页
     ·不同激素浓度对外植体生芽及生根的影响第51页
     ·外植体的再生周期和效率第51-52页
     ·番茄遗传转化体系的优化第52页
   ·本章小结第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-59页
攻读硕士学位期间所发表的论文第59-60页
致谢第60页

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