| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-25页 |
| ·链格孢菌研究概况 | 第9-13页 |
| ·链格孢菌的危害 | 第9-10页 |
| ·长柄链格孢菌的危害 | 第10-11页 |
| ·长柄链格孢菌的综合防治 | 第11-12页 |
| ·应用前景 | 第12-13页 |
| ·蛋白激酶研究概述 | 第13-18页 |
| ·蛋白激酶的种类 | 第13-14页 |
| ·蛋白激酶活性调节 | 第14-15页 |
| ·几种重要的蛋白激酶功能研究 | 第15-18页 |
| ·真菌MAPK的研究 | 第18-23页 |
| ·促分裂蛋白激酶MAPK | 第18页 |
| ·真菌MAPK信号转导途径的研究现状 | 第18-23页 |
| ·链格孢菌MAPK的研究 | 第23-24页 |
| ·研究的目的意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·供试菌株 | 第25页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·酶和主要的试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器和设备 | 第25页 |
| ·溶液及培养基配制 | 第25-26页 |
| ·长柄链格孢(Alongpes)AlSte7基因的cDNA和DNA的克隆 | 第26-39页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·总RNA的提取(Trizol法) | 第26-27页 |
| ·紫外检测RNA的质量 | 第27页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| ·目的基因cDNA中间片段的分离 | 第28-33页 |
| ·目的基因3’末端和5’末端的分离 | 第33-34页 |
| ·目的基因全长cDNA和DNA的克隆 | 第34-35页 |
| ·原生质体的制备 | 第35-36页 |
| ·打靶载体的构建及验证 | 第36页 |
| ·原生质体转化 | 第36-38页 |
| ·AlSte7基因插入突变体的筛选和验证 | 第38页 |
| ·AlSte7基因插入突变体的生物学性状分析 | 第38-39页 |
| 3 结果分析 | 第39-56页 |
| ·长柄链格孢菌蛋白激酶AlSte7基因的克隆 | 第39-49页 |
| ·长柄链格孢菌蛋白激酶AlSte7基因中间片段的分离 | 第39-49页 |
| ·AlSte7基因插入突变载体的构建及验证 | 第49-50页 |
| ·转化片段(T)的准备 | 第50-51页 |
| ·原生质体的转化 | 第51-52页 |
| ·AlSte7基因插入突变体的筛选和验证 | 第52-53页 |
| ·AlSte7基因转化子生物学性状和致病性分析 | 第53-56页 |
| ·AlSte7基因转化子菌落生长状况及表型观察 | 第53-54页 |
| ·AlSte7基因转化子的菌丝干重检测 | 第54-55页 |
| ·AlSte7基因转化子分生孢子形态的检测 | 第55页 |
| ·AlSte7基因转化子致病性检测 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| ·菌体总RNA提取 | 第56页 |
| ·中间序列的分离 | 第56-57页 |
| ·AlSte7基因3’末端和5’末端的获得 | 第57页 |
| ·AlSte7的基因插入突变载体的构建 | 第57-58页 |
| ·AlSte7的基因的功能推测 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69页 |