| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第一部分 文献综述 | 第8-17页 |
| 1 牛结核病现状 | 第8页 |
| 2 结核分枝杆菌 | 第8-9页 |
| 3 流行病学 | 第9-10页 |
| 4 诊断技术研究进展 | 第10-13页 |
| ·细菌检测法 | 第10页 |
| ·免疫检测法 | 第10-12页 |
| ·分子生物检测法 | 第12-13页 |
| 5 牛结核病的致病机理 | 第13-14页 |
| 6 牛分枝杆菌主要保护性抗原 | 第14-16页 |
| ·Ag85复合物 | 第14页 |
| ·MPB系列蛋白 | 第14-15页 |
| ·ESAT-6家族蛋白 | 第15-16页 |
| 7 牛结核病的免疫机理 | 第16页 |
| 8 牛结核DNA疫苗研究进展 | 第16页 |
| 9 研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二部分 实验内容 | 第17-48页 |
| 实验一 牛分枝杆菌Ag85A-MPB70-MPB63-MPB64 | 第17-42页 |
| 1 前言 | 第17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-31页 |
| ·材料 | 第17-21页 |
| ·方法 | 第21-31页 |
| 3 结果 | 第31-39页 |
| ·目的基因的PCR扩增产物 | 第31-33页 |
| ·原核重组表达质粒的构建 | 第33页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第33-36页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第36-38页 |
| ·Western blotting分析 | 第38页 |
| ·Ag85A-MPB70-MPB63-MPB64纯化结果分析 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| ·关于目的基因的选择 | 第39页 |
| ·关于融合基因的构建 | 第39-40页 |
| ·关于原核表达系统的选择 | 第40页 |
| ·关于包涵体的变性与复性 | 第40-41页 |
| ·关于融合蛋白的纯化和反应性 | 第41页 |
| 5 小结 | 第41-42页 |
| 实验二 Ag85A-MPB70-MPB63-MPB64在牛结核病ELISA检测中的初步应用 | 第42-48页 |
| 1 前言 | 第42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| 3 结果 | 第45-47页 |
| ·融合蛋白Ag85A-MPB70-MPB63-MPB64最适包被浓度和血清最适稀释浓度的确定 | 第45页 |
| ·酶标抗体的工作浓度 | 第45-46页 |
| ·ELISA判定标准的确定 | 第46页 |
| ·特异性检测结果 | 第46页 |
| ·敏感性检测结果 | 第46页 |
| ·待检血清的检测结果 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47页 |
| 5 小结 | 第47-48页 |
| 第三部分 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 缩略语表 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
