| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 引言 | 第8-15页 |
| ·肿瘤及肿瘤血管发生 | 第8-9页 |
| ·血管生成因子 | 第9页 |
| ·碱性成纤维生长因子（bFGF）及其与肿瘤的关系 | 第9-10页 |
| ·碱性成纤维生长因子（bFGF）及其生物学作用 | 第9-10页 |
| ·碱性成纤维生长因子（bFGF）和肿瘤的关系 | 第10页 |
| ·血管生成素研究概况及其生物作用机制 | 第10-11页 |
| ·血管生成素和肿瘤的关系 | 第11-12页 |
| ·本实验室对血管生成素和 bFGF 的前期研究成果 | 第12-13页 |
| ·血管生成素和 bFGF 关系的研究 | 第12-13页 |
| ·血管生成素和 bFGF 对肿瘤细胞的影响 | 第13页 |
| ·本论文研究内容及意义 | 第13-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-32页 |
| ·材料 | 第15-21页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15-16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·重要试剂的配制方法 | 第16-21页 |
| ·重要引物合成 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-32页 |
| ·凝胶迁移实验（electrophoretic mobility shift assay，EMSA） | 第21-23页 |
| ·质粒小量提取 | 第23-24页 |
| ·哺乳动物细胞瞬时转染-脂质体转染法 | 第24页 |
| ·原核表达载体 pGEX-2T-Angiogenin 的构建及在大肠杆菌中的表达 | 第24-28页 |
| ·重组真核表达载体 pKH3-bFGF 的构建 | 第28-30页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第30页 |
| ·GST Pull down 过程 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-43页 |
| ·血管生成素与 bFGF 启动子中 4CT 重复序列的作用 | 第32-33页 |
| ·原核表达载体 pGEX-2T-Angiogenin 的构建 | 第33-35页 |
| ·重组质粒 pGEX-2T-Angiogenin 在大肠杆菌中的表达 | 第35-37页 |
| ·GST- Angiogenin 重组蛋白初步表达 | 第35-36页 |
| ·最适蛋白表达条件的确定 | 第36-37页 |
| ·重组真核表达载体 pKH3-bFGF 的构建 | 第37-40页 |
| ·GST-Angiogenin 重组蛋白的提取及纯化 | 第40-41页 |
| ·bFGF 基因的真核表达及 bFGF 蛋白和血管生成素蛋白的体外作用 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| ·血管生成素参与 bFGF 的转录调控 | 第43-44页 |
| ·对血管生成素和 bFGF 在蛋白水平的相互作用机制的探讨 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第53页 |
| 参与科研项目情况 | 第53页 |
